小鼠脂肪幹細胞（kaiyun网站安全）

小鼠脂肪幹細胞（Adipose-derived Stem Cells, ADSCs）是從(cong) 小鼠脂肪組織中分離出的具有多向分化潛能的間充質幹細胞，是再生醫學和組織工程研究中的重要種子細胞。小鼠脂肪幹細胞主要來源於(yu) 成年小鼠的腹部、腹股溝或大腿區域的脂肪組織，通常以4周齡的雄性小鼠為(wei) 實驗模型（如ICR品係），通過外科手術獲取脂肪組織後，結合酶解和分離技術提取獲得。

小鼠脂肪幹細胞具有顯著的自我更新能力和多向分化潛力，可分化為(wei) 脂肪、骨、軟骨等多種細胞類型，且來源廣泛、獲取相對容易，對供區損傷(shang) 小，並在體(ti) 外擴增效率高，適合大規模培養(yang) 需求。脂肪組織不僅(jin) 是能量儲(chu) 存的重要部位，還是調控胰島素敏感性、血壓、炎症反應等多種生理功能的內(nei) 分泌器官，小鼠脂肪幹細胞在組織修複、細胞再生及抗衰老等方麵具有重要應用價(jia) 值，其在改善亞(ya) 健康狀態及推動再生醫學技術發展中發揮了重要作用。

小鼠脂肪幹細胞特性特征

• 自我更新能力：小鼠脂肪幹細胞能夠在體(ti) 外長期培養(yang) 而不失去增殖能力，具有良好的自我更新能力。

• 多向分化潛能：可以分化為(wei) 多種細胞類型，包括脂肪細胞、成骨細胞、軟骨細胞和心肌細胞等，顯示出較強的多向分化潛力。

• 來源豐(feng) 富：主要來源於(yu) 成年小鼠的脂肪組織，獲取過程相對簡單且創傷(shang) 較小。

• 高增殖速率：在適當的培養(yang) 條件下，小鼠脂肪幹細胞的體(ti) 外擴增速率較高，能夠快速獲得大量細胞。

• 表麵標誌物：小鼠脂肪幹細胞通常表達一係列特定的表麵標誌物，如CD29、CD44、CD90等，而幾乎不表達CD45。這些標誌物是鑒定間充質幹細胞的重要指標。
  

• 基因表達：ADSCs在分化過程中會(hui) 表現出不同的基因表達模式。例如，在向脂肪細胞分化時，會(hui) 上調PPARγ、C/EBPα等與(yu) 脂肪生成相關(guan) 的轉錄因子。

• 增殖特征：在低代次（如第3代）時，ADSCs表現出良好的增殖能力和活性，而高代次（如第30代）時可能出現衰老現象，增殖能力下降.
  

• 轉錄因子的表達：ADSCs在不同誘導條件下會(hui) 表現出不同的轉錄因子活性，這些轉錄因子對於(yu) 其向特定細胞類型的分化至關(guan) 重要。例如，成骨分化過程中會(hui) 激活Runx2等成骨相關(guan) 基因，而脂肪分化則涉及PPARγ和C/EBPβ等基因的表達。
  

• 基因組穩定性：隨著傳(chuan) 代次數的增加，ADSCs可能會(hui) 出現染色體(ti) 異常和DNA含量變化，這些變化可能影響其功能和應用

小鼠脂肪幹細胞參數表

原代小鼠脂肪幹細胞培養教程

細胞複蘇

• 消毒：使用75%酒精對培養(yang) 瓶和操作台進行消毒處理。

• 細胞解凍：將凍存管中的脂肪幹細胞迅速放入37℃水浴中，輕輕搖動，1-2分鍾內(nei) 解凍完全。

• 稀釋DMSO：將解凍後的脂肪幹細胞懸液轉移至含有9 mL完全培養(yang) 基的15 mL無菌離心管中。

• 離心：以1000 rpm離心5分鍾，去除上清，保留細胞沉澱。

• 重懸細胞：用1-2 mL完全培養(yang) 基重懸細胞沉澱，確保脂肪幹細胞分散均勻。

• 培養(yang) ：將重懸後的脂肪幹細胞移至培養(yang) 瓶中，加入適量培養(yang) 基，放入37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) ，次日更換培養(yang) 基以去除殘留的DMSO。

細胞傳代

• 觀察細胞生長狀態：當脂肪幹細胞生長至80%-90%匯合時進行傳(chuan) 代。

• 洗滌：吸棄培養(yang) 基，加入PBS潤洗細胞1次以去除殘留血清。

• 消化：加入適量0.25%胰酶覆蓋細胞層，將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中1-2分鍾，直至脂肪幹細胞開始收縮變圓。

• 終止消化：加入1倍體(ti) 積完全培養(yang) 基中和胰酶，輕輕拍打培養(yang) 瓶底使脂肪幹細胞脫落。

• 離心：將細胞懸液轉移至15 mL離心管中，以1000 rpm離心5分鍾，去除上清。

• 重懸和分瓶：用完全培養(yang) 基重懸脂肪幹細胞沉澱，根據實驗需求按1:3或1:4比例進行分瓶，加入新鮮培養(yang) 基後繼續培養(yang) 。

細胞凍存

• 收集細胞：按照傳(chuan) 代方法消化脂肪幹細胞，並用培養(yang) 基中和胰酶後離心收集細胞沉澱。

• 細胞計數：使用台盼藍法進行脂肪幹細胞活性評估，確保細胞密度為(wei) 1 × 10⁶個(ge) /mL。

• 製備凍存液：用預冷的凍存液重懸脂肪幹細胞沉澱，確保混勻。

• 裝管：將脂肪幹細胞懸液分裝至凍存管中，每管1 mL。

• 程序凍存：將凍存管置於(yu) 程序凍存盒中，在-80℃凍存過夜，然後轉移至液氮中長期保存。

注意事項

• 培養(yang) 條件：確保培養(yang) 環境穩定（37℃、5% CO₂），定期觀察脂肪幹細胞狀態，及時更換培養(yang) 基。

• 操作無菌：所有操作需在無菌條件下進行，以防止汙染。

• 細胞密度控製：複蘇和傳(chuan) 代時應嚴(yan) 格控製脂肪幹細胞密度，以保證細胞的增殖和分化能力。