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3T3-L1細胞培養(yang) 常見問題

3T3-L1細胞培養(yang) 常見問題

开云在线登录公司是否對3T3-L1細胞係的脂肪細胞形成進行檢測?

本公司對3T3-L1細胞係脂肪細胞的形成包進行了檢測,並且所有批次都列出脂肪細胞分化的指標。本公司的方案讓細胞達到融合,在大約2周內(nei) 觀察脂滴的形成。我們(men) 沒有用地塞米鬆、IBMX和胰島素的混合物誘導3T3-L1的分化。

為(wei) 了保證所有批次的3T3-L1細胞都顯示出脂肪細胞分化,我們(men) 有如下過程:用一個(ge) 燒瓶混合(使用補充有开云在线登录配套的胎牛血清和培養(yang) 液)。每周更換兩(liang) 次液體(ti) ,觀察細胞是否有脂肪細胞形成的跡象。在所有批次的3T3-L1細胞中,脂肪積累在100%匯合後約5天開始,並且在匯合後15-16天後有50%分化為(wei) 脂肪細胞。所檢查的每個(ge) 領域都有帶有細胞質液滴的細胞灶。

參考文獻:

建立的脂肪前細胞係及其在培養(yang) 中的分化。Cell 3:127-1331974 PubMed:75037596

細胞1,113-116 1974

《細胞》第5期,1975年第19-27頁

3T3-L1細胞的推薦細胞密度和培養條件是什麽?

3T3-L1細胞應在僅(jin) 3×103個(ge) 細胞/cm2的推薦接種密度下開始培養(yang) ,並應在培養(yang) 物達到70%至80%融合之前,或當細胞達到5×104至6×104個(ge) 活細胞/cm2時進行亞(ya) 培養(yang) 。細胞培養(yang) 物的低密度會(hui) 使培養(yang) 瓶顯得稀疏,這是正常的。產(chan) 品質量檢測報告上的特定批次信息提供細胞/小瓶的數量。3T3-L1細胞的存活率不能僅(jin) 通貼壁細胞著來確定,因為(wei) 在從(cong) 冷凍保存中恢複的過程中也有漂浮細胞的存活。應通過溫和的離心作用保留漂浮的細胞,並將其添加回細胞群體(ti) 中。

該細胞係的基礎培養(yang) 基是开云在线登录配套培養(yang) 基,其補充有小牛血清至10%的最終濃度。當複蘇和傳(chuan) 代3T3-L1細胞時,根據培養(yang) 基中的碳酸氫鈉濃度適當調節CO2環境是非常重要的。非开云在线登录製劑外的DMEM製劑可能含有更高的碳酸氫鈉(3.7g/L),並且在培養(yang) 這些細胞時需要增加的CO2水平(7-10%)。


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