3T3-L1 小鼠胚胎成纖維細胞

3T3-L1細胞來源小鼠胚胎成纖維細胞的連續亞(ya) 株，具有成纖維細胞樣的特性，喜貼壁生長。3T3-L1細胞用於(yu) 研究與(yu) 糖尿病、肥胖和相關(guan) 疾病機製。

3T3-L1小鼠胚胎成纖維細胞在培養(yang) 過程中表達胰島素，並具備產(chan) 生甘油三酯的能力。當細胞經曆快速分裂到長滿且接觸抑製時，會(hui) 發生從(cong) 前脂肪向脂肪樣的轉變。培養(yang) 液中高血清含量的存在有助於(yu) 促進細胞內(nei) 脂肪的積累。

3T3-L1細胞特征

• 3T3-L1細胞是通過克隆分離得到的3T3（Swiss小白鼠）的連續亞(ya) 株，源自小鼠胚胎成纖維細胞。

• 細胞特性：成纖維細胞樣，貼壁生長。

• 3T3-L1細胞表達胰島素，並產(chan) 生甘油三酯。

• 細胞從(cong) 快速分裂到長滿且接觸抑製時，3T3-L1細胞會(hui) 經曆前脂肪向脂肪樣的轉變。

• 培養(yang) 液中高血清含量可促進細胞內(nei) 脂肪的積累。

• 3T3-L1細胞主要用於(yu) 研究與(yu) 糖尿病、肥胖和相關(guan) 疾病相關(guan) 的基本細胞機製。

• 3T3-L1細胞鼠痘病毒呈陰性。

• 3T3-L1細胞可作為(wei) 轉染宿主細胞。

3T3-L1細胞參數表

研究發現，噻唑烷二酮類化合物（TZDs）如羅格列酮和吡格列酮在2μM濃度下不影響3T3-L1細胞的活性或細胞凋亡，但可以顯著增加細胞內(nei) 脂質積累，進而促進脂肪細胞的分化，並通過增加Pparγ和NF-κB特異性蛋白的表達來證實脂肪細胞的完全分化。此外，3T3-L1脂肪細胞衍生的外囊泡對胰島β細胞和人胰島的存活、增殖和功能有正負兩(liang) 麵的影響，取決(jue) 於(yu) 脂肪細胞的狀態和脂肪組織的來源。在健康狀態下，外囊泡對胰島β細胞有益，但在肥胖和胰島素抵抗等病理條件下，外囊泡會(hui) 加劇胰島素抵抗和胰島β細胞功能障礙的進展。

3T3-L1細胞培養說明

培養基和培養條件

• 使用DMEM培養(yang) 基，含有10% FBS (新生牛血清)

• 培養(yang) 密度控製在40-60%的匯合度，避免細胞過度匯合

• 細胞在快速增值階段時，每2-3天更換一次培養(yang) 基

• 匯合度達到70-80%時進行傳(chuan) 代

注意事項

• 為(wei) 避免細胞聚集，等待細胞消化時，不要通過擊打或搖晃瓶子來刺激細胞，難以消化的細胞可置於(yu) 37°C條件下

• 注意血清類型，避免使用胎牛血清，以免導致細胞分化

• 如果培養(yang) 過程中出現空泡，優(you) 先考慮環境壓力，如培養(yang) 基成分、二氧化碳濃度、營養(yang) 物質等是否合適

• 使用胎牛血清可能會(hui) 造成細胞分化，因此應盡量避免使用

分化誘導過程

• 細胞生長至融合期，出現接觸抑製

• 添加誘導劑，如0.5mM IBMX、1μmol/L 地塞米鬆和1-10μg/mL 胰島素，培養(yang) 48小時

• 換成隻含胰島素的培養(yang) 基，培養(yang) 48小時

• 最後換成不含誘導劑的常規培養(yang) 基，每2天換液1次

• 用油紅O染色法鑒定細胞是否誘導成功

傳代方法和凍存條件

• 傳(chuan) 代比例為(wei) 1:2至1:6，每周2次

• 凍存條件為(wei) 90%完全培養(yang) 基 + 10% DMSO，液氮凍存