
Psi2 DAP小鼠胚胎成纖維細胞
- 來源:正常胚胎
- 細胞特征:貼壁細胞 , 成纖維細胞樣
- 培養(yang) 基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:被Psi2 DAP產(chan) 生的載體(ti) 感染的細胞會(hui) 表達組織化學可檢測的堿性磷酸酶,可用作體(ti) 內(nei) 追蹤細胞命運的標記
Psi2 DAP小鼠胚胎成纖維細胞是一種經過基因改造的小鼠細胞係,衍生自Psi2細胞。Psi2 DAP細胞係通過插入重組逆轉錄病毒基因組(DAP)而獲得。Psi2 DAP細胞能夠生成一種載體(ti) ,這種載體(ti) 表達編碼人胎盤堿性磷酸酶和新黴素抗性基因。Psi2 DAP細胞經常用於(yu) 探究基因功能和細胞行為(wei) 。
Psi2 DAP小鼠胚胎成纖維細胞特性特征
分子特征:含有插入的重組逆轉錄病毒基因組(DAP)、能夠產(chan) 生可感染小鼠細胞的載體(ti)
基因表達:表達人胎盤堿性磷酸酶轉導載體(ti) 、產(chan) 生編碼人胎盤堿性磷酸酶基因的載體(ti) 、產(chan) 生編碼新黴素抗性基因的載體(ti)
功能特征:產(chan) 生的載體(ti) 可以感染小鼠細胞
被Psi2 DAP細胞產(chan) 生的載體(ti) 感染的細胞會(hui) 表達組織化學可檢測的堿性磷酸酶、表達的堿性磷酸酶可用作追蹤細胞在體(ti) 內(nei) 命運的標記
生物安全特征:Psi2 DAP細胞可能產(chan) 生輔助病毒,需要注意生物安全
Psi2 DAP小鼠胚胎成纖維細胞參數表
細胞名稱 | Psi2 DAP小鼠胚胎成纖維細胞 |
細胞別名 | Psi2-DAP; Psi-2-DAP; Psi-2 DAP; psi2dap |
來源/類型 | 小鼠胚胎; 成纖維細胞 |
形態生長特性 | 成纖維細胞樣; 貼壁生長 |
保藏信息 | ATCC; CRL-1949; 低代次; PN5 |
生物安全等級 | 1級(BSL-1) |
細胞檢測 | 支原體檢測陰性 |
培養基 | DMEM + 10%胎牛血清 + 1%雙抗 |
培養環境 | 37°C, 5% CO2, 95%空氣, 70-80%濕度 |
傳代信息 | 比例1:2或1:3; 消化2-5分鍾; 3天長滿; 每周換液2-3次 |
凍存液 | 90% FBS + 10% DMSO或專用非程序凍存液; -80°C或液氮 |
基因表達/抗性 | 人胎盤堿性磷酸酶轉導載體; 新黴素抗性 |
載體產生 | 產生可感染小鼠細胞的載體,編碼人胎盤堿性磷酸酶基因和新黴素抗性基因 |
標記功能 | 堿性磷酸酶(可用於細胞追蹤) |
其他特性 | 可能產生輔助病毒 |
應用領域 | 基因功能研究、細胞追蹤、逆轉錄病毒研究 |
使用限製 | 僅限於科學研究,不可用於動物或人類疾病的治療 |
培養教程
Psi2 DAP小鼠胚胎成纖維細胞培養教程
細胞複蘇
從(cong) 液氮中取出凍存的Psi2-DAP細胞管,迅速放入37°C水浴中解凍,輕輕搖動以加速解凍過程。
解凍後立即將細胞懸液轉移到含10 ml預熱完全培養(yang) 基的離心管中。
離心:以1000 rpm的速度離心5分鍾,棄去上清液。
重懸細胞:加入新鮮培養(yang) 基重懸Psi2-DAP細胞,確保細胞均勻分散。
接種:將重懸的Psi2-DAP細胞轉移到T25培養(yang) 瓶中,置於(yu) 37°C,5% CO2的培養(yang) 箱中培養(yang) 。
細胞傳代
準備傳(chuan) 代:當Psi2-DAP細胞生長至80-90%匯合時,準備進行傳(chuan) 代。
洗滌:用不含鈣鎂的PBS洗滌細胞,以去除舊的培養(yang) 基。
消化:加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,消化2-5分鍾,輕輕搖動培養(yang) 瓶以使Psi2-DAP細胞脫落。
中和:加入等體(ti) 積的完全培養(yang) 基以中和胰蛋白酶。
離心:以1000 rpm的速度離心5分鍾,棄去上清液。
重懸細胞:加入新鮮培養(yang) 基重懸Psi2-DAP細胞,確保細胞均勻分散。
接種:按1:2或1:3的比例將Psi2-DAP細胞接種至新的培養(yang) 瓶中,繼續培養(yang) 。
細胞凍存
準備凍存液:使用90% FBS和10% DMSO的凍存液,或專(zhuan) 用的非程序凍存液,以凍存Psi2-DAP細胞。
重懸細胞:將Psi2-DAP細胞按1×10^6 cells/ml的濃度重懸於(yu) 凍存液中,分裝到凍存管中。
冷凍:逐步降溫至-80°C,隨後轉移至液氮中進行長期保存。
注意事項
確保所有操作在無菌條件下進行,以防止Psi2-DAP細胞汙染。
定期檢查Psi2-DAP細胞的生長狀態,確保細胞健康。
使用前確保培養(yang) 基和試劑均已預熱至37°C。
其他特性
基因表達:Psi2-DAP細胞係生成的載體(ti) 表達編碼人胎盤堿性磷酸酶基因和新黴素抗性基因,這種堿性磷酸酶可用於(yu) 組織化學檢測。
標記功能:堿性磷酸酶作為(wei) 細胞追蹤的標記,能夠監測Psi2-DAP細胞體(ti) 內(nei) 的動態變化。
載體(ti) 產(chan) 生:Psi2-DAP細胞產(chan) 生的載體(ti) 能夠感染小鼠細胞,用於(yu) 基因功能研究和病毒載體(ti) 研究。
應用領域:基因功能研究、細胞追蹤、逆轉錄病毒研究;僅(jin) 限科研用途。
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