
3T6-Swiss albino 小鼠胚胎成纖維細胞
- 來源:胚胎
- 細胞特征:貼壁細胞 , 成纖維細胞
- 培養(yang) 基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:基因表達:溶血磷脂酰膽堿(lyso-PC)通過蛋白激酶c-非依賴性途徑誘導AP-1活性和c-jun N-末端激酶活性(JNK1);角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性
3T6-Swiss albino小鼠胚胎成纖維細胞最初於(yu) 1962年從(cong) 小鼠胚胎中分離出來。3T6細胞具有超三倍體(ti) 的細胞係,其中30%的細胞具有68條染色體(ti) ,中倍性較高的細胞比例為(wei) 2.4%。
3T6細胞具有接觸抑製特性,在融合的單層培養(yang) 條件下可以達到40000個(ge) 細胞/cm²。3T6細胞適合在塑料培養(yang) 瓶中生長,但在某些類型的玻璃表麵上生長效果不佳。3T6細胞飽和密度約為(wei) 50000個(ge) 細胞/cm²。
3T6細胞特性特征
分泌能力:3T6細胞能分泌膠原質和透明質酸。
基因表達:溶血磷脂酰膽堿(lyso-PC)通過蛋白激酶c-非依賴性途徑誘導AP-1活性和c-jun N-末端激酶活性(JNK1)、角蛋白免疫過氧化物酶染色呈陽性
病毒易感性:對多瘤病毒敏感;對SV40病毒敏感
檢測結果:經檢測,3T6細胞鼠痘呈陰性
3T6小鼠胚胎成纖維細胞參數表
細胞名稱 | 3T6-Swiss albino 小鼠胚胎成纖維細胞 |
別名 | 3T6 cells, Swiss 3T6 cells |
物種 | 小鼠 (Mus musculus) |
組織來源 | 胚胎組織 |
建立時間 | 1963年 |
細胞類型 | 成纖維細胞 |
基因表達 | lyso-PC誘導AP-1活性和JNK1活性;角蛋白免疫過氧化物酶陽性 |
生長方式 | 貼壁生長 |
接觸抑製 | 是 |
融合密度 | 40,000個細胞/cm² |
飽和密度 | 50,000個細胞/cm² |
細胞形態 | 成纖維細胞形態,長梭形 |
培養基 | 90% DMEM + 10%胎牛血清 |
培養環境 | 培養溫度 37°C;CO₂濃度 5% |
培養容器 | 塑料瓶(在某些玻璃表麵上生長不佳) |
傳代方法 | PBS洗滌,0.25%胰酶-0.53mM EDTA消化 |
傳代比例 | 1:3至1:6 |
基礎更換頻率 | 每2-3天 |
分泌物 | 膠原質、透明質酸 |
易感病毒 | 多瘤病毒、SV40病毒 |
檢測結果 | 鼠痘陰性 |
凍存 | 10% DMSO + 90%胎牛血清;-196°C(液氮) |
存活率 | 80-90% |
研究用途 | 細胞生物學、藥物篩選、細胞外基質研究、組織工程、染色體不穩定性研究、癌症研究 |
計數方法 | 台盼藍染色計數法 |
培養教程
3T6-Swiss albino小鼠胚胎成纖維細胞培養教程
細胞複蘇
將含有1mL3T6細胞懸液的凍存管在37°C水浴中快速解凍(約1-2分鍾)。
解凍後,將3T6細胞懸液轉移到含有4mL預熱培養(yang) 基的離心管中。
在1000RPM條件下離心4分鍾。
棄去上清液,用1-2mL新鮮培養(yang) 基重懸3T6細胞。
將3T6細胞懸液轉移到準備好的培養(yang) 瓶中,加入適量培養(yang) 基。
傳代方法
當3T6細胞融合度達到80-90%時進行傳(chuan) 代。
用PBS輕輕衝(chong) 洗細胞層1-2次。
加入0.25%胰酶-0.53mM EDTA溶液,在37°C孵育2-3分鍾。
輕輕拍打培養(yang) 瓶,觀察3T6細胞脫落情況。
加入含血清的培養(yang) 基終止消化。
收集3T6細胞懸液,1000RPM離心4分鍾。
棄去上清液,用新鮮培養(yang) 基重懸3T6細胞。
按1:3到1:6的比例接種到新的培養(yang) 瓶中。
細胞密度控製
融合密度:約40,000個(ge) 3T6細胞/cm²。
飽和密度:約50,000個(ge) 3T6細胞/cm²。
接種密度可根據實驗需求調整,但不要過低,以免影響3T6細胞生長。
細胞凍存
使用10% DMSO + 90%胎牛血清的凍存介質。
緩慢降溫至-80°C,然後轉移至-196°C液氮中長期保存。
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參考文獻
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