貨號：STM-CL-6065 規格：1×10⁶cells/T25培養(yang) 瓶或1mL凍存管

STO細胞（小鼠胚成纖維細胞係）

來源：胚胎
細胞特征：貼壁細胞 , 成纖維細胞樣
培養(yang) 基：DMEM＋10% FBS＋1% P/S
其他：STO細胞易於(yu) 轉染，常用於(yu) 製備經過絲(si) 裂黴素C或輻照處理的飼養(yang) 層細胞，以維持幹細胞處於(yu) 未分化狀態

Tags：胚成纖維細胞

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價(jia) 格：￥ 1,300.00

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STO小鼠胚胎成纖維細胞是一種從(cong) SIM小鼠胚胎中分離的細胞係，由拿大多倫(lun) 多安大略癌症研究所建立。作為(wei) 一種繼代生長的胚胎成纖維細胞係，STO細胞主要應用於(yu) 製備飼養(yang) 層細胞和其他研究。STO細胞具有成纖維細胞的形態特征，並在貼壁條件下生長。

STO細胞特性特征

細胞名稱	STO細胞（小鼠胚成纖維細胞係）
種屬來源	小鼠胚胎
生長特性	貼壁生長
細胞形態	成纖維細胞樣
生物安全等級	1
保藏機構	ATCC; CRL-1503; ECACC; 86032003
細胞規格	1×10^6 cells/T25培養瓶
培養基	DMEM＋10% FBS＋1% P/S
培養條件	氣相：空氣，95%；CO2，5%；溫度：37℃
傳代比例	1:2
傳代條件	細胞密度達80%-90%時進行傳代
凍存條件	55%基礎培養基+40%FBS+5%DMSO，溫度：液氮
抗性特征	對6-硫鳥嘌呤和哇巴因具有抗性，對HAT培養基敏感，HPRT陰性
HPRT基因狀態	陰性
胞質空泡現象	在長期傳代中常會產生
病毒檢測	對小鼠痘病毒呈陰性
應用	用於製備飼養層細胞，支持幹細胞研究
處理方法	可通過輻照或絲裂黴素C處理製備飼養層
儲存條件	-20℃或液氮中長期儲存

解凍STO細胞: 在37℃水浴中快速解凍含有1 mL細胞懸液的凍存管，持續搖晃以加速解凍過程。
加入培養(yang) 基: 解凍後立即向凍存管中加入4 mL培養(yang) 基，輕輕混合均勻。
離心處理: 在1000 rpm條件下離心3分鍾，棄去上清液。
重懸STO細胞: 加入1-2 mL培養(yang) 基，輕輕吹打使STO細胞均勻懸浮。
培養(yang) 過夜: 將STO細胞懸液轉移至含有適量培養(yang) 基的培養(yang) 瓶中，或者6 cm培養(yang) 皿中（加入約4 mL完全培養(yang) 基），培養(yang) 過夜。

觀察STO細胞密度: 在第三天進行換液並檢查STO細胞密度。
確定傳(chuan) 代時機: 當STO細胞密度達到80%-90%時，可以進行傳(chuan) 代。
清洗STO細胞: 棄去培養(yang) 液，用PBS清洗STO細胞一次。
消化STO細胞: 添加約1 mL的0.25%胰蛋白酶消化液，觀察STO細胞回縮變圓。
終止消化: 加入完全培養(yang) 液終止消化，輕輕吹打STO細胞使其脫落。
離心與(yu) 重懸: 將STO細胞懸液轉移至15 mL離心管中，1000 rpm離心5分鍾，棄去上清，沉澱STO細胞用12 mL完全培養(yang) 基重懸。
分瓶傳(chuan) 代: 按1:2比例進行分瓶傳(chuan) 代，放入37℃、5% CO2的細胞培養(yang) 箱中培養(yang) STO細胞。
觀察與(yu) 換液: 待STO細胞完全貼壁後，觀察培養(yang) 結果，並根據需要進行換液或再次傳(chuan) 代。

無菌操作: 確保所有操作在無菌環境下進行，以避免STO細胞汙染。
培養(yang) 基使用: 使用優(you) 化的STO細胞專(zhuan) 用培養(yang) 基，該培養(yang) 基已經包含了STO細胞生長所需的各種成分，無需額外添加血清和抗生素。
消化與(yu) 傳(chuan) 代: 在傳(chuan) 代時，使用0.25%胰蛋白酶消化液，觀察STO細胞回縮變圓後立即終止消化，以防止STO細胞過度消化。避免過度傳(chuan) 代，保持適當的傳(chuan) 代比例（如1:2或1:3），並在STO細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代。
培養(yang) 條件: 維持培養(yang) 環境的穩定，氣相為(wei) 95%空氣和5% CO2，溫度為(wei) 37℃。定期換液，通常在第三天換液並檢查STO細胞密度。
減少胞質空泡產(chan) 生: 控製傳(chuan) 代頻率，避免長期連續傳(chuan) 代。確保培養(yang) 基的新鮮和適當的營養(yang) 成分，避免營養(yang) 缺乏。觀察STO細胞狀態，及時調整培養(yang) 條件以減少應激反應。