3T3 Swiss albino 小鼠胚胎成纖維細胞

3T3-Swiss albino小鼠胚胎成纖維細胞係於(yu) 1962年由George J. Todaro和Howard Green從(cong) 瑞士小鼠胚胎中分離建立。3t3 swiss albino細胞係具有超三倍體(ti) 特性，其模式染色體(ti) 數為(wei) 68，大約30%的細胞中能檢測到這一染色體(ti) 數目，同時有2.4%的細胞顯示出更高的倍性。

3T3 Swiss albino細胞特性特征

• 病毒易感性：3t3 swiss albino細胞對多瘤病毒和SV40病毒易感，檢測結果顯示鼠痘病毒呈陰性。

• 基因表達：3T3-Swiss albino細胞能夠表達溶血磷脂酰膽堿（lyso-PC），並通過蛋白激酶C非依賴性途徑誘導AP-1活性和c-jun N-末端激酶活性（JNK1）。

• 免疫表型：在角蛋白免疫過氧化物酶染色中呈陽性，表明3t3 swiss albino細胞具有成纖維細胞的特征

• 3T3-Swiss albino細胞具有接觸抑製特性，當形成單層時，其生長密度可達到約40000個(ge) 細胞/cm²。盡管3T3-Swiss albino細胞在某些玻璃表麵上生長不佳，但在塑料培養(yang) 瓶中能夠良好生長，並且飽和密度可達到約50000個(ge) 細胞/cm²。

• 3T3-Swiss albino細胞係經過檢測，確認不含鼠痘病毒。
  

3T3 Swiss albino細胞參數表

3T3 Swiss albino小鼠胚胎成纖維細胞培養教程

swiss3t3細胞複蘇

• 從(cong) 液氮罐中取出凍存的swiss3t3細胞管，立即將其放入37°C的水浴中，輕輕搖動以加速複蘇過程。
  

• 同時，準備好預熱至37°C的培養(yang) 基：DMEM（高糖）+ 10% FBS + 1% P/S。

• swiss3t3細胞完全融化後，迅速將細胞懸液轉移至15 mL離心管，加入5 mL預熱的培養(yang) 基。
  

• 輕輕混勻後，以1000 rpm離心5分鍾，棄去上清液。

• 用5 mL新鮮培養(yang) 基重懸swiss3t3細胞，並將其轉移至T25培養(yang) 瓶中。
  

• 將swiss3t3細胞培養(yang) 瓶置於(yu) 37°C、5% CO2的培養(yang) 箱中培養(yang) 。複蘇後24小時更換新鮮培養(yang) 基，以去除殘餘(yu) 的DMSO和死亡細胞。
  

swiss3t3細胞培養

• 采用DMEM（高糖）+ 10% FBS + 1% P/S作為(wei) swiss3t3細胞的培養(yang) 基，需預熱至37°C。
  

• 將swiss3t3細胞維持在37°C、95%空氣和5% CO2的培養(yang) 環境中。
  

• 每2-3天更換一次swiss3t3細胞的培養(yang) 基，以確保其健康生長。
  

• 通過顯微鏡定期檢查swiss3t3細胞的形態，確保其正常生長並無汙染。swiss3t3細胞應呈纖維狀且具有接觸抑製特性，當細胞覆蓋培養(yang) 瓶表麵時應達到約40000個(ge) 細胞/cm²。
  

swiss3t3細胞傳代

• 當swiss3t3細胞達到80-90%的匯合度時，應進行傳(chuan) 代操作。
  

• 首先，用PBS洗滌swiss3t3細胞，去除殘留的培養(yang) 基。
  

• 加入0.25%胰酶，放入37°C培養(yang) 箱中消化2-5分鍾，直到swiss3t3細胞開始脫落。

• 加入預熱的培養(yang) 基中止胰酶消化，並輕輕吹打混勻swiss3t3細胞。

• 以1000 rpm離心5分鍾，棄去上清液。
  

• 用新鮮培養(yang) 基重懸swiss3t3細胞，按照1:2至1:4的比例分配至新的培養(yang) 瓶中繼續培養(yang) 。

swiss3t3細胞凍存

• 配製swiss3t3細胞的凍存液：60% DMEM培養(yang) 基 + 30% FBS + 10% DMSO。
  

• 將swiss3t3細胞以1000 rpm離心5分鍾，去除上清液。
  

• 用凍存液重懸swiss3t3細胞，並分裝至凍存管中。

• 將swiss3t3細胞凍存管置於(yu) -80°C的冷凍箱中，緩慢降溫至約1°C/分鍾。
  

• 24小時後，將swiss3t3細胞凍存管轉移至液氮罐中儲(chu) 存（-196°C）。

注意事項

• 細胞狀態監測：定期檢查swiss3t3細胞的形態，確保無汙染和細胞健康。

• 無菌操作：在生物安全櫃中進行所有swiss3t3細胞的操作，確保無菌條件。

• 運輸要求：複蘇swiss3t3細胞應在常溫下運輸，而凍存swiss3t3細胞需使用幹冰進行運輸，以保持低溫環境。