C3H/10T1/2細胞 clone8細胞（小鼠胚胎成纖維細胞） （暫不提供）

C3H/10T1/2, Clone 8細胞係是一種來源於(yu) C3H小鼠胚胎的成纖維細胞，最早由C. Reznikoff等人在1972年從(cong) C3H小鼠胚胎細胞中分離。C3H/10T1/2, Clone 8細胞係屬於(yu) 小鼠成纖維細胞係，具有典型的成纖維細胞形態，並且具備80條染色體(ti) 。

C3H/10T1/2細胞 clone8細胞特性特征

• 致瘤性：c3h10t1/2細胞在免疫抑製小鼠中不致瘤，且在同源小鼠中不產(chan) 生腫瘤，顯示出良好的安全性。

• 接觸抑製：c3h10t1/2細胞對過度生長的抑製非常敏感，表現出明顯的接觸抑製特性。
  

• 轉化敏感性：c3h10t1/2細胞係極易被化學試劑轉化，盡管沒有可檢測到的背景自發轉變。

• 病毒檢測：經檢測，鼠痘病毒呈陰性，表明c3h10t1/2細胞係未被病毒感染。

• 基因表達：C3H/10T1/2 Clone 8細胞係的基因表達特征尚未詳細列出，但一般情況下，成纖維細胞會(hui) 表達特定的細胞外基質成分，如膠原蛋白和纖維連接蛋白。

C3H/10T1/2細胞 clone8細胞參數表

C3H/10T1/2 clone8細胞 小鼠胚胎成纖維細胞培養教程

細胞複蘇

• 從(cong) 液氮罐中取出clone8細胞的凍存管後，迅速將其置於(yu) 37℃的水浴中進行解凍。輕輕搖晃凍存管以加速解凍過程，注意避免細胞因過熱而受損。
  

• clone8細胞完全解凍後，立即將細胞懸液轉移至含有4 mL完全培養(yang) 基的離心管中，混勻。

• 以1000 RPM的速度離心4分鍾，棄去上清液，以去除冷凍保護劑。
  

• 用1-2 mL完全培養(yang) 基重懸沉澱後的clone8細胞，輕輕吹打以確保細胞分散均勻。
  

• 將重懸的clone8細胞懸液轉移至一個(ge) T25培養(yang) 瓶中，或者將其加入10 cm的培養(yang) 皿中，加入8 mL培養(yang) 基，進行過夜培養(yang) 。
  

• 次日，棄去舊的培養(yang) 基，加入新鮮的完全培養(yang) 基，並檢查clone8細胞的密度與(yu) 生長狀態。
  

細胞傳代

• 當clone8細胞覆蓋率達到80%-90%時，準備進行傳(chuan) 代。
  

• 棄去培養(yang) 基，用不含鈣和鎂的PBS洗滌clone8細胞1-2次，以去除殘留的血清和代謝物。
  

• 加入1 mL 0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA消化液，並將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中，消化1-2分鍾，觀察clone8細胞變圓並逐漸脫落。
  

• 當大多數clone8細胞脫落時，輕輕敲擊培養(yang) 瓶的側(ce) 麵，並加入少量培養(yang) 基終止消化。

• 加入6-8 mL培養(yang) 基將clone8細胞懸浮液打勻後，在1000 RPM下離心4分鍾，棄去上清液。
  

• 用1-2 mL完全培養(yang) 基重懸clone8細胞，輕輕混勻。
  

• 按1:2比例將clone8細胞懸液分裝至新的培養(yang) 瓶中，並加入8 mL新鮮培養(yang) 基，繼續培養(yang) 。
  

細胞凍存

• 在clone8細胞生長狀態良好時，進行細胞凍存準備。
  

• 按傳(chuan) 代步驟離心clone8細胞，並棄去上清液。
  

• 用含10% DMSO的凍存液重懸clone8細胞。
  

• 將重懸後的clone8細胞懸液分裝至凍存管中，每管約1 mL。
  

• 將clone8細胞凍存管放入-80℃冰箱中進行過夜冷凍，然後轉移至液氮罐中長期保存。
  

注意事項

• 在clone8細胞操作過程中，始終保持無菌操作，以防止汙染。

• 不同批次的血清可能會(hui) 影響clone8細胞的形態和實驗結果，因此建議使用相同批次的培養(yang) 基和血清進行實驗。

• 定期觀察clone8細胞狀態，若發現汙染，需立即采取措施處理。