
NIH/3T3細胞(小鼠胚胎細胞)
- 來源:胚胎
- 細胞特征:貼壁細胞 ,成纖維細胞樣
- 培養(yang) 基:生長培養(yang) 基:DMEM+10% NCS+1% P/S
- 其他:NIH/3T3細胞是多克隆群體(ti) ,存在可辨別的克隆畸變,但易於(yu) 細胞轉化。
NIH/3T3細胞是從(cong) 小鼠NIH/Swiss胚胎中分離的成纖維細胞係,對肉瘤病毒和白血病病毒敏感,特別適用於(yu) DNA轉染研究。
NIH/3T3細胞是多克隆群體(ti) ,存在可辨別的克隆畸變,但易於(yu) 細胞轉化。
經過多次亞(ya) 克隆,NIH/3T3細胞確立為(wei) 適合轉化分析的亞(ya) 株,保持了對轉化實驗的高度敏感性和可靠性。
NIH/3T3細胞源自NIH Swiss小鼠胚胎培養(yang) 物,經過五輪以上亞(ya) 克隆,確保了其形態學特征更適合轉化分析。
經檢測,NIH/3T3細胞對鼠痘病毒呈陰性。
NIH/3T3小鼠胚胎細胞產品參數表
細胞名稱 | NIH/3T3小鼠胚胎細胞 |
別稱 | NIH-3T3; NIH3T3; 3T3; 3T3NIH; 3T3-Swiss; Swiss-3T3; Swiss/3T3; Swiss 3T3; Swiss3T3; nih3t3 |
來源 | 小鼠NIH/Swiss胚胎 |
細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
生長特性 | 貼壁生長 |
多克隆性 | 是 |
克隆畸變 | 存在可辨別的克隆畸變 |
轉化性 | 易於細胞轉化 |
亞株特性 | 形態學特征適合於轉化分析 |
建立過程 | 來源於NIH Swiss小鼠胚胎培養物,經過五輪以上亞克隆 |
鼠痘病毒 | 陰性 |
應用領域 | 腫瘤病毒和白血病病毒研究、DNA轉染研究、轉化分析等 |
生物安全等級 | BSL1 |
倍增時間 | ~20小時 |
傳代比例 | 1:2-1:3 |
細胞消化 | 1-3分鍾 |
完全培養基 | DMEM培養基;10% NCS;1%雙抗 |
凍存液 | 40%FBS,DMSO 5%,或非程序凍存液 |
包裝規格 | T25瓶或者1mL凍存管包裝 |
溫度 | 37攝氏度,培養箱濕度為70%-80% |
培養環境 | 空氣,95%;二氧化碳,5% |
凍存條件 | 基礎培養基+5%DMSO +40%FBS,液氮保存 |
保藏機構 | ATCC; HTB-33; CRL-1658; DSMZ; ACC-59; CCTCC; GDC0030 |
NIH/3T3細胞的典型應用模型
病毒感染模型:
肉瘤病毒感染模型:NIH/3T3細胞可用於(yu) 建立肉瘤病毒感染模型,研究肉瘤病毒的感染機製、病毒複製周期以及腫瘤形成機製等。
白血病病毒感染模型:利用NIH/3T3細胞可以構建白血病病毒感染模型,探究白血病病毒與(yu) 宿主細胞的相互作用、病毒複製與(yu) 傳(chuan) 播等相關(guan) 機製。
DNA轉染研究模型:
基因轉染模型:NIH/3T3細胞可作為(wei) 基因轉染研究的模型細胞,用於(yu) 向細胞內(nei) 導入外源性DNA,探究基因的功能和調控機製,以及基因在細胞內(nei) 的表達和影響。
轉化實驗模型:NIH/3T3細胞係常被用於(yu) 進行轉化實驗,研究腫瘤相關(guan) 基因的功能、致癌機製以及腫瘤細胞的增殖和轉移等過程,有助於(yu) 揭示腫瘤發生發展的分子機製。
培養教程
複蘇NIH/3T3細胞
在37℃水浴中快速搖晃解凍含有1mL NIH/3T3細胞懸液的凍存管。
將解凍的NIH/3T3細胞懸液加入8-10mL培養(yang) 基中,並混合均勻。
在1000RPM條件下離心5分鍾,棄去上清液,補加1-2mL培養(yang) 基後吹勻。
將所有NIH/3T3細胞懸液加入培養(yang) 瓶中,進行過夜培養(yang) 。
NIH/3T3細胞傳代
當NIH/3T3細胞密度達到80%-90%時,即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
棄去培養(yang) 上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗NIH/3T3細胞1-2次。
加入1mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)於(yu) 培養(yang) 瓶中,37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾。
在顯微鏡下觀察NIH/3T3細胞消化情況,若細胞大部分變圓並脫落,則迅速終止消化並補加培養(yang) 基。
補加培養(yang) 基後,輕輕打勻後吸出,在1000RPM條件下離心5分鍾,棄去上清液,補加培養(yang) 液後吹勻。
將NIH/3T3細胞懸液按1:2比例分到新的含8mL培養(yang) 基的新皿中或者瓶中。
NIH/3T3細胞凍存
當NIH/3T3細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。
棄去培養(yang) 基後,用PBS清洗NIH/3T3細胞一遍後加入1mL胰酶。
NIH/3T3細胞變圓脫落後,加入4mL含血清的培養(yang) 基終止消化。
使用血球計數板計數後,進行離心去除上清液。
加入血清重懸NIH/3T3細胞,根據細胞數量加入血清和DMSO,DMSO終濃度為(wei) 5%,每支凍存管凍存1mL細胞懸液。
將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中,放入-80度冰箱4個(ge) 小時以上轉入液氮灌儲(chu) 存。
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STR鑒定及相關
STR點位信息
18-3 | 17,19 |
6-7 | 12 |
5-5 | 14,15 |
X-1 | 25 |
1-2 | 13,17 |
7-1 | 29 |
8-1 | 15 |
1-1 | 10 |
19-2 | 11,12 |
15-3 | 20.3 |
12-1 | 20 |
6-4 | 16 |
4-2 | 19.3,20.3 |
3-2 | 14,15 |
2-1 | 9 |
13-1 | 16.2 |
11-2 | 15,17 |
17-2 | 13,14 |

參考文獻
- 第二軍醫大學學報 > 2008年8期
- 摘要:...:探討腺病毒介導人血管內皮細胞生長因子(hVEGF)基因感染NIH3T3細胞後目的基...
- 《河南師範大學》 2015年
- 摘要:為從轉錄水平研究永生化的小鼠成纖維細胞NIH3T3細胞周期進程中的基因表達差異與功能,本文...
- 《解剖學報》 1995年03期
- 摘要:...間接免疫熒光和蛋白質免疫印跡方法,研究了血清饑餓的NIH3T3成纖維細胞受血清誘導重...
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