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B82細胞（小鼠腫瘤細胞係）貨號：STM-CL-6017 規格：1×10⁶cells/T25培養(yang) 瓶或1mL凍存管

B82細胞（小鼠腫瘤細胞係）

  • 來源：皮下結締組織；疏鬆結締組織及脂肪
  • 細胞特征：貼壁細胞 , 成纖維細胞樣
  • 培養(yang) 基：MEM＋10% FBS＋1% P/S
  • 其他：B82細胞是通過在溴脫氧尿苷（BUdR）中對L929細胞係進行逐步選擇而獲得的衍生株
Tags： 腫瘤細胞係    
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價(jia) 格：￥ 1,300.00
提供STR鑒定報告

B82小鼠腫瘤細胞係源自小鼠脂肪組織中的成纖維細胞，其前身是NCTC克隆929細胞係，B82細胞係通過在溴脫氧尿苷（BUdR）中的漸進選擇過程而得到。B82細胞具有70-80%的高克隆效率，常用於(yu) 染色體(ti) 分析和遺傳(chuan) 雜交研究。其核型為(wei) 2n=51。

B82小鼠腫瘤細胞係參數表

細胞名稱B82小鼠腫瘤細胞係
別稱B82 (Hamprecht); B-82; GM00347; GM-347
物種來源小鼠（C3H/An）
組織來源皮下結締組織；疏鬆結締組織及脂肪
細胞類型腫瘤細胞
細胞形態成纖維細胞樣
生長特性貼壁生長
疾病特征自然永生細胞係
培養基MEM培養基，90%；胎牛血清（FBS），10%
培養環境空氣，95%；二氧化碳，5%；培養溫度37℃；培養濕度：70%-80%
傳代比例1:2至1:6
傳代頻率每周2次
細胞消化0.25%胰蛋白酶，消化1-3分鍾
倍增時間每周2至3次
克隆效率70-80%
應用染色體分析和遺傳雜交研究
凍存條件90% FBS，10% DMSO
保藏機構ECACC; 08062522
安全等級BSL-1

培養教程

B82小鼠腫瘤細胞係培養教程

B82細胞複蘇

  • 將含有1 mL B82細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍。

  • 加入4-5 mL預熱的完全培養(yang) 基，混合均勻。

  • 在1000 RPM條件下離心4-5分鍾，棄去上清液。

  • 用1-2 mL新鮮培養(yang) 基重懸B82細胞。

  • 將B82細胞懸液轉移到含有8 mL培養(yang) 基的培養(yang) 瓶或10 cm培養(yang) 皿中。

  • 置於(yu) 37℃、5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) 過夜。

  • 次日換液並檢查B82細胞密度和狀態。

B82細胞傳代

  • 當B82細胞密度達80%-90%時，進行傳(chuan) 代：

  • 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗B82細胞1-2次。

  • 加入1 mL 0.25% Trypsin-0.53 mM EDTA消化液，37℃消化1-3分鍾。

  • 顯微鏡下觀察，當大部分B82細胞變圓並脫落時，加入少量培養(yang) 基終止消化。

  • 補加6-8 mL培養(yang) 基，輕輕打勻。

  • 1000 RPM離心4分鍾，棄去上清。

  • 用1-2 mL新鮮培養(yang) 基重懸B82細胞。

  • 按1:2至1:6的比例將B82細胞分裝到新的培養(yang) 瓶中，每瓶加入8 mL完全培養(yang) 基。

  • 置於(yu) 37℃、5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) 。

B82細胞凍存

  • 收集處於(yu) 良好生長狀態的B82細胞。

  • 1000 RPM離心4分鍾，棄去上清。

  • 用PBS洗滌一次。

  • 加入無血清細胞凍存液，調整B82細胞密度至5×10^6~1×10^7/mL。

  • 每支凍存管分裝1 mL B82細胞懸液，做好標識。

  • 將凍存管放入-80℃冰箱24小時。

  • 轉入液氮中長期保存。

B82細胞係培養的特殊之處

  • 培養(yang) 基組成：B82細胞的培養(yang) 基通常為(wei) MEM培養(yang) 基，配以10%胎牛血清（FBS）。某些細胞係可能使用不同類型的培養(yang) 基（如DMEM或RPMI）。

  • 傳(chuan) 代比例：B82細胞的傳(chuan) 代比例通常為(wei) 1:2至1:6，而其他細胞係可能有不同的傳(chuan) 代比例要求。

  • 克隆形成能力：B82細胞具有70-80%的克隆形成能力，這使其在某些實驗（如遺傳(chuan) 雜交研究）中表現出色，而其他細胞係的克隆形成能力可能較低。

  • 凍存和複蘇條件：B82細胞在凍存和複蘇過程中需要特別注意DMSO的濃度和凍存步驟，確保細胞存活率較高。

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