大鼠前體(ti) 脂肪細胞（kaiyun网站安全）

大鼠前脂肪細胞主要來源於(yu) 脂肪組織，是一種具有增殖能力並可分化為(wei) 成熟脂肪細胞的特化前體(ti) 細胞。在脂肪組織中，前脂肪細胞與(yu) 成熟脂肪細胞共存：前者呈梭形，具備分裂和增殖能力，而後者因胞漿內(nei) 脂滴積聚而呈圓形，並已喪(sang) 失增殖能力。

大鼠前脂肪細胞通常通過分離脂肪組織獲得，主要來源包括大網膜脂肪組織。相比成熟脂肪細胞，前脂肪細胞在形態上更接近成纖維細胞，並在適宜條件下逐步吸收脂質，最終分化為(wei) 成熟脂肪細胞。這一過程在脂肪再生、組織修複及肥胖發生機製中起到關(guan) 鍵作用。

前脂肪細胞因其較強的抗機械損傷(shang) 能力，在組織工程領域也具有應用前景，被認為(wei) 可作為(wei) 軟組織修複的潛在填充材料。其分化受炎症微環境調控，研究表明，炎症狀態可影響前脂肪細胞的增殖及分化能力，從(cong) 而調節脂肪組織的再生與(yu) 功能重塑。

大鼠前體脂肪細胞特性特征

• 與(yu) 肥胖的關(guan) 係：前脂肪細胞與(yu) 肥胖密切相關(guan) ，是一類具有增殖和向脂肪細胞分化能力的特異化前體(ti) 細胞。

• 細胞特性：貼壁生長，細胞形態為(wei) 成纖維細胞樣。
  

• 力學特性：對外界機械損傷(shang) 的抵抗力較強，可望成為(wei) 軟組織缺損的有益填充物。

• 前脂肪細胞因子-1 (Pref-1)：免疫熒光染色為(wei) 陽性。

• SREBP家族：SREBP-1a是所有SREBP反應基因的強激活劑，SREBP-1c可激活脂肪酸合成所需的基因轉錄，SREBP-2增強膽固醇合成。ADD1/ SREBP-1c mRN A 水平在誘導分化後24 h增加，暗示它在脂肪形成的早期發揮重要作用。

• C/EBP家族：C/EBPβ 和C/EBPδ 的表達很快增加，隨後活化的C/EBPβ 和C/EBPδ可以激活C/EBPα。C/EBPα 基因啟動子上具有C/EBP調節元件，該元件能結合 C/EBPα 進而激活其自身表達，維持分化狀態。

大鼠前體脂肪細胞參數表

原代大鼠前體脂肪細胞培養教程

細胞複蘇

• 準備工作：取適量完全培養(yang) 基，在37℃水浴中預熱。

• 解凍細胞：從(cong) 液氮中取出大鼠前脂肪細胞凍存管，迅速放入37℃水浴中輕輕搖晃，使細胞液完全溶解。

• 離心：將細胞懸液轉移至15 mL離心管中，加入5 mL預熱培養(yang) 基，1000 rpm離心4分鍾，棄去上清液。

• 重懸細胞：加入1-2 mL完全培養(yang) 基，輕輕吹打使前脂肪細胞均勻分散。

• 培養(yang) ：將細胞懸液接種至培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿（如T25瓶加入6 mL培養(yang) 基，10 cm皿加入8 mL培養(yang) 基），置於(yu) 37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) 過夜。

• 更換培養(yang) 基：次日更換新鮮培養(yang) 基，並觀察前脂肪細胞貼壁及生長狀態。

細胞傳代

• 觀察細胞密度：當前脂肪細胞密度達到80%-90%時，可進行傳(chuan) 代。

• 清洗細胞：棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

• 消化細胞：加入1 mL 0.25% Trypsin-0.53mM EDTA消化液，置於(yu) 37℃培養(yang) 箱消化1-2分鍾，顯微鏡下觀察細胞狀態，待細胞變圓並脫落後取出。

• 終止消化：輕敲培養(yang) 瓶後，加入少量培養(yang) 基終止消化。

• 離心：加入6-8 mL培養(yang) 基，輕輕混勻後吸出，1000 rpm離心4分鍾，棄去上清液。

• 重懸細胞：加入1-2 mL培養(yang) 基後輕輕吹勻。

• 傳(chuan) 代：按1:2比例將前脂肪細胞懸液接種至新的培養(yang) 皿或瓶中，加入適量培養(yang) 基（如10 cm皿加入8 mL培養(yang) 基）。

• 培養(yang) ：將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。

• 更換培養(yang) 基：細胞貼壁後，每3天更換一次培養(yang) 基。

細胞凍存

• 準備凍存液：通常使用含有DMSO的培養(yang) 基或專(zhuan) 用細胞凍存液。

• 收集細胞：按照傳(chuan) 代步驟收集前脂肪細胞，並調整細胞密度。

• 加入凍存液：將細胞重懸於(yu) 凍存液中，使細胞密度達到適當濃度。

• 凍存：將細胞分裝至凍存管中，先在4℃放置10-15分鍾，然後依次轉移至-20℃、-80℃冰箱，最終存入液氮中長期保存。