細胞培養(yang) 
細胞工程 
細胞生物學 
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品牌價(jia) 值 
貨號：STM-CE-3306 規格：5×10⁵cells/T25細胞培養(yang) 瓶
大鼠牙周膜成纖維細胞（kaiyun网站安全）
- 來源：牙周膜組織
- 細胞特征：貼壁細胞 , 成纖維細胞樣
- 培養(yang) 基：kaiyun网站安全專(zhuan) 用培養(yang) 基
- 其他：成骨相關(guan) 基因ALP、COL1和RUNX2在牙周膜成纖維細胞中表達，並且可以通過調控這些基因的表達來影響細胞的成骨分化
大鼠牙周膜成纖維細胞（Periodontal Ligament Fibroblasts, PLFs）來源於(yu) 大鼠牙周膜組織，牙周膜是連接牙齒與(yu) 牙槽骨的重要結構，由致密結締組織構成，並含有神經、血管、淋巴管及上皮細胞，以維持牙周組織的穩態。PLFs細胞是牙周膜的主要間質細胞，形態呈梭形或星形，細胞核較大，核仁明顯，胞質透明，具有合成膠原蛋白、糖蛋白及彈力纖維的能力，同時能夠降解膠原並參與(yu) 牙周組織的病變、修複及再生過程。
大鼠牙周膜成纖維細胞在牙周組織修複及再生過程中發揮關(guan) 鍵作用，與(yu) 成骨細胞相互調控，影響成骨分化，並廣泛應用於(yu) 牙周疾病的體(ti) 外模型構建，以研究牙周組織的損傷(shang) 及再生機製。此外，大鼠牙周膜成纖維細胞在牙周再生材料的生物相容性評估中也具有重要價(jia) 值，如功能化聚乳酸-羥基乙酸共聚物（PLGA）在牙周炎相關(guan) 骨缺損修複中的潛力。
大鼠牙周膜成纖維細胞特性特征
形態特征： 成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為(wei) 突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。
細胞形態 成纖維細胞樣、貼壁生長。
主要功能： 牙周膜成纖維細胞是牙周膜的主要間質細胞，具有合成膠原、基質、彈力纖維和糖蛋白的功能，還有吸收膠原吞噬異物的能力，還參與(yu) 了牙周組織的病變、修複及再生過程。
蛋白表達： 纖維連接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）免疫熒光染色為(wei) 陽性。
體(ti) 外模型： 利用牙周膜細胞建立體(ti) 外模型，已經成為(wei) 研究牙周組織疾病的重要手段。
相互作用： 牙周膜成纖維細胞與(yu) 成骨細胞相互調控，共同參與(yu) 牙周組織再生。牙周膜成纖維細胞能抑製成骨細胞的成骨作用，而成骨細胞則能誘導牙周膜成纖維細胞向成骨樣細胞分化
大鼠牙周膜成纖維細胞參數表
| 細胞名稱 | 原代大鼠牙周膜成纖維細胞 |
| 英文名稱 | Rat Periodontal Ligament Fibroblast Cells |
| 種屬來源 | 大鼠 (Rattus norvegicus) |
| 組織來源 | 牙周膜組織 |
| 細胞類型 | 成纖維細胞 (Fibroblast) |
| 形態特征 | 突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，剛分離的細胞呈圓形，貼壁後伸展成梭形 |
| 生長方式 | 貼壁生長 |
| 細胞純度 | ≥90%（Vimentin免疫熒光染色鑒定） |
| 質量檢測 | 纖維連接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）免疫熒光染色為陽性，不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等 |
| 推薦培養基 | kaiyun网站安全專用培養基 |
| 培養條件 | 氣相：空氣，95%；CO2，5%；37℃ |
| 換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
| 傳代 | 細胞密度達80%-90%時進行傳代 |
| 傳代比例 | 首次傳代建議1：2 |
| 傳代方法 | 胰蛋白酶消化 |
| 消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
| 可傳代數 | 可傳5代左右；3代以內狀態最佳 |
| 主要功能 | 合成膠原、基質、彈力纖維和糖蛋白，吸收膠原吞噬異物，參與牙周組織的病變、修複及再生過程 |
| 產品用途 | 僅能用於科研，未通過直接用於活體動物和人的審核，未通過用於活體診斷的審核 |
| 增殖能力 | α-MEM培養基培養PDLSC一周後，MTT 法檢測PDLSC增殖曲線，A、B 2個實驗組均表現出較強的增殖能力，但相比A組，B組細胞增殖較緩慢，從第5天開始，2個實驗組出現顯著的統計學差異 |
| 細胞分化 | 具有向成骨細胞和成脂細胞分化的能力 |
| 與年齡的關係 | 隨年齡增長能在牙周膜中獲取PDLSC，隨年齡增加其增殖與成骨分化能力下降，但成脂分化能力和SA-β表達則增加. |
| 力學作用 | 在正畸力加載下的牙周膜中存在肌成纖維細胞，牙周膜肌成纖維細胞通過表達alpha-SMA 和TN-C 這兩種功能上相互拮抗的蛋白，來調節細胞內外的應力環境. |
| 與bFGF的關係 | 堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)可以加快成骨細胞和牙周膜成纖維細胞的遷移和生長速度. |
| 納米形貌影響 | 表麵納米形貌可以影響牙周膜幹細胞的衰老和分化. |
| 細胞因子影響 | 轉化生長因子-β1（TGF-β1）可誘導成纖維細胞向肌成纖維細胞轉化. |
培養教程
原代大鼠牙周膜成纖維細胞培養教程
細胞複蘇
快速解凍： 從(cong) 液氮中取出 plfs細胞 凍存管，立即放入 37℃水浴 中快速搖晃，使其在 1-2 分鍾內(nei) 完全融化。
離心去除冷凍液： 迅速將細胞懸液轉移到 5-10 mL 完全培養(yang) 基 中，並以 1000-2000 rpm 離心 5-10 分鍾，去除冷凍保護劑。
重懸細胞： 小心吸除上清液，加入 適量完全培養(yang) 基 輕輕吹勻，使細胞均勻分散。
接種培養(yang) ： 將細胞懸液轉移至 培養(yang) 瓶或培養(yang) 板，補充適量培養(yang) 基，置於(yu) 37℃、5% CO₂ 培養(yang) 箱 內(nei) 培養(yang) 。
靜置穩定： 細胞複蘇後 靜置培養(yang) 3-4 小時，避免幹擾，以便 plfs細胞 適應新環境。
換液優(you) 化： 複蘇後的 前3天建議每天更換培養(yang) 基，以去除殘留 DMSO，並提供新鮮養(yang) 分促進細胞恢複。
細胞傳代
觀察細胞密度： 當 plfs細胞 貼壁生長達到 80%-90% 匯合度 時，可進行傳(chuan) 代。
PBS清洗： 吸棄舊培養(yang) 基，用 無鈣鎂 PBS 緩衝(chong) 液 輕柔清洗細胞 1次。
消化細胞： 加入 0.25% 胰蛋白酶（EDTA 可選），室溫靜置 1-2 分鍾，直至細胞變圓脫落（顯微鏡觀察）。
終止消化： 迅速加入 含血清的完全培養(yang) 基 中和胰酶，並輕輕吹打，使細胞分散。
離心收集細胞： 以 1000-2000 rpm 離心 5-10 分鍾，棄去上清，加入培養(yang) 基重懸。
細胞接種： 按 1:2 - 1:6 比例 將 plfs細胞 重新分瓶，加入新鮮培養(yang) 基，繼續培養(yang) 。
培養(yang) 環境： 置於(yu) 37℃、5% CO₂、95% 濕度 的培養(yang) 箱中，確保細胞增殖良好。
定期換液： 每 2-3 天更換一次培養(yang) 基，避免代謝產(chan) 物積累，保持培養(yang) 環境穩定。
細胞凍存
收集細胞： 選擇生長狀態良好的 plfs細胞，消化後離心，去除培養(yang) 基。
製備凍存液： 使用 90% 完全培養(yang) 基 + 10% DMSO 配製 凍存液，並將 plfs細胞 重懸至適當濃度（5×10⁵ cells/mL）。
分裝細胞： 將細胞懸液均勻分裝至 凍存管，確保密封良好。
程序降溫： 置於(yu) -80℃ 冰箱 中 程序降溫（每分鍾降低 1℃），確保細胞存活率。
液氮長期保存： 24小時後，將凍存管轉移至 液氮儲(chu) 存（-196℃），避免細胞損傷(shang) 。
培養條件
培養(yang) 基： plfs細胞 適用的特定完全培養(yang) 基（可參考供應商推薦方案）。
培養(yang) 溫度： 37℃，保持恒溫狀態。
CO₂濃度： 5%，確保細胞生長所需的弱酸性環境。
濕度要求： 95% 濕度，防止培養(yang) 液蒸發，維持細胞穩定。
換液頻率： 每2-3天更換一次培養(yang) 基，保持最佳培養(yang) 環境。
注意事項
解凍速度要快，避免冰晶損傷(shang) ；水浴解凍時間不宜過長（控製在 1-2 分鍾 內(nei) ）。
plfs細胞消化時間不可過久，以防細胞損傷(shang) ，建議在顯微鏡下監測狀態。
凍存前細胞狀態需良好，避免高傳(chuan) 代數或狀態差的細胞進行凍存，以確保複蘇存活率。
傳(chuan) 代比例應根據細胞生長情況調整，一般 1:2 - 1:6，避免過度稀釋或密度過高影響生長。
嚴(yan) 禁使用汙染的培養(yang) 基或試劑，確保無菌操作，防止細胞汙染影響實驗數據