HGF-1細胞（人牙齦成纖維細胞）

HGF-1細胞是一種典型成纖維細胞形態的人牙齦成纖維細胞，於(yu) 1989年從(cong) 一位28歲白人男性的牙齦組織中分離。HGF1細胞在體(ti) 外培養(yang) 時具有合成膠原和彈性纖維的能力，是牙齦結締組織中的主要細胞類型，對牙周組織的修複和保護起著關(guan) 鍵作用。

HGF-1細胞係能夠在體(ti) 外增殖，研究顯示在細胞衰老之前，可以經曆22次的群體(ti) 倍增。然而，群體(ti) 倍增數（PDL）不同於(yu) 通道數，建議在使用當前批次的細胞前，參考PDL分析證書(shu) 。在經過冷凍保存後，HGF-1細胞在推薦的培養(yang) 條件下還能經曆4-5次群體(ti) 倍增。

HGF-1細胞特性特征

• 生長因子刺激：HGF-1細胞對表皮生長因子（EGF）和血小板衍生生長因子（PDGF）敏感。

• 受體(ti) 表達：HGF-1細胞表麵存在緩激肽受體(ti) ，其表觀密度為(wei) 每細胞22000個(ge) ，解離常數（Kd）為(wei) 1.2 nM。這些受體(ti) 與(yu) 磷脂酶C和A2以及鈣通道效應器的信號通路相互作用，參與(yu) 細胞信號轉導。

• 細胞外基質合成：HGF-1細胞能夠合成膠原蛋白和其他細胞外基質成分，這使其在牙周組織的修複和再生中具有重要作用。

• 緩激肽表達：HGF-1細胞能夠表達緩激肽，參與(yu) 調節細胞的生長和功能。

• 生長因子受體(ti) ：HGF1細胞表麵表達多種生長因子受體(ti) ，能夠響應外源性生長因子的刺激，促進細胞DNA合成和增殖。

• 細胞信號通路：HGF-1細胞與(yu) 多條細胞信號通路相互作用，特別是在與(yu) 生長因子相關(guan) 的信號轉導過程中，表現出高度的調節能力

HGF-1細胞參數表

HGF-1人牙齦成纖維細胞培養教程

HGF1細胞複蘇

• 解凍步驟：

• 從(cong) 液氮中迅速取出HGF1細胞凍存管，立即放入37℃水浴中，輕輕搖晃凍存管，直至管內(nei) 冰晶完全融化（通常需要1-2分鍾）。

• 使用75%酒精對凍存管外壁進行消毒，以確保無菌操作。

  
  

• 轉移HGF1細胞：

• 將解凍後的HGF1細胞懸液轉移至裝有5 mL完全培養(yang) 基的離心管中，輕輕混勻HGF1細胞懸液。

• 在1000 RPM下離心5分鍾，棄去上清液，以除去DMSO和其他凍存介質。

  
  

• 重懸HGF1細胞：向HGF1細胞沉澱中加入4-6 mL完全培養(yang) 基，輕輕吹打混勻HGF1細胞，確保均勻分散。

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• HGF1細胞培養(yang) ：將HGF1細胞懸液轉移至T25培養(yang) 瓶中，並將培養(yang) 瓶放入37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) ，確保適宜的生長環境。

HGF1細胞傳代

• 傳(chuan) 代時機：當HGF1細胞生長至80-90%匯合時，應進行傳(chuan) 代，以維持HGF1細胞的最佳狀態。

  
  

• 傳(chuan) 代步驟：

• 棄去HGF1細胞培養(yang) 上清液，並用無菌PBS或生理鹽水清洗HGF1細胞1-2次，去除殘留的培養(yang) 基成分。

• 加入1-2 mL 0.25%胰酶，使其均勻覆蓋整個(ge) 培養(yang) 瓶底，室溫孵育2-5分鍾，觀察HGF1細胞脫落情況。當HGF1細胞開始脫落時，立即加入等體(ti) 積的完全培養(yang) 基中和胰酶作用。

  
  

• 離心與(yu) 重懸HGF1細胞：將HGF1細胞懸液轉移至離心管中，1000 RPM離心5分鍾，棄去上清液。加入適量的完全培養(yang) 基重懸HGF1細胞，並充分混勻。

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• 轉移至新培養(yang) 瓶：將重懸後的HGF1細胞轉移至新T25或T75培養(yang) 瓶中，根據實驗需求調整HGF1細胞密度（通常為(wei) 1×10^4至1×10^5細胞/mL），並將培養(yang) 瓶放入37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。

注意事項

• 無菌操作：在HGF1細胞複蘇、傳(chuan) 代等操作過程中，必須嚴(yan) 格遵守無菌技術，以防止HGF1細胞汙染。

• 定期監控：定期觀察HGF1細胞的生長狀態，及時傳(chuan) 代，避免HGF1細胞過度匯合，影響實驗結果。

• HGF1細胞健康：在進行實驗之前，確保HGF1細胞處於(yu) 良好的狀態，具有高細胞活力，確保實驗的可重複性和可靠性。