mcfs細胞（原代小鼠心肌成纖維細胞）

原代小鼠心肌成纖維細胞（Mouse Cardiac Fibroblasts, MCFs）是心髒非心肌細胞的主要構成部分，約占心髒細胞總數的60%-70%，主要來源於(yu) 健康小鼠的心髒組織，尤其是心室區域。

小鼠心肌成纖維細胞通過無菌條件下的組織消化和差速貼壁法，可分離獲得高純度的成纖維細胞。剛分離的細胞多呈圓形，懸浮於(yu) 培養(yang) 基中，貼壁後逐漸伸展為(wei) 紡錘形或星形。它們(men) 形態規則，核呈卵圓形，核仁清晰，細胞質弱堿性，增殖能力強，在體(ti) 外培養(yang) 中5-7天即可達融合狀態，並形成交叉重疊的網狀結構。小鼠心肌成纖維細胞廣泛應用於(yu) 心血管疾病的研究，尤其是在探索心髒纖維化機製、心肌損傷(shang) 修複和藥物篩選等方麵，是研究心髒病理生理的重要模型和實驗工具。

mcfs小鼠心肌成纖維細胞特性特征

• 結構支持：小鼠心肌成纖維細胞為(wei) 心肌細胞提供結構支持，並形成細胞外基質，促進心髒的正常功能。

• 修複與(yu) 再生：在心髒損傷(shang) 時，小鼠心肌成纖維細胞能夠產(chan) 生旁分泌生長因子，促進心肌細胞的修複和再生。

• 轉化能力：在病理狀態下（如心髒壓力負荷），小鼠心肌成纖維細胞可以轉化為(wei) 肌成纖維細胞，參與(yu) 心髒的纖維化過程。

• 標誌物表達：Vimentin、Collagen I、α-SMA（平滑肌α-肌動蛋白）。

• 生長因子相關(guan) 基因：如TGF-β、FGF等，這些基因在心髒損傷(shang) 和修複過程中發揮重要作用。
  

• 膠原合成相關(guan) 基因：如COL1A1和COL3A1，這些基因編碼合成膠原蛋白所需的蛋白質。

• TGF-β信號通路：在心肌成纖維細胞的增殖、遷移及轉化過程中起關(guan) 鍵作用，與(yu) 心髒纖維化密切相關(guan) 。
  

• Wnt/β-catenin信號通路：調控成纖維細胞的增殖和分化，在心髒壓力負荷下顯著上調

mcfs細胞參數表

原代小鼠心肌成纖維細胞mcfs細胞培養教程

 細胞培養接種

• 將MCFs細胞懸液鋪板於(yu) 10cm無菌培養(yang) 皿中，放置於(yu) 37°C、5% CO₂培養(yang) 箱中靜置培養(yang) 。

• 培養(yang) 90分鍾後，用移液器輕輕吹打，促進未貼壁細胞脫離，並優(you) 化MCFs細胞的貼壁生長。

• 更換培養(yang) 基：初次培養(yang) 24小時後更換培養(yang) 基，以去除未附著的細胞和碎片。之後每2-3天更換一次培養(yang) 基，確保MCFs細胞健康生長。

傳代培養

• 傳(chuan) 代條件：當MCFs細胞密度達到80%-90%融合時，進行傳(chuan) 代操作。

• 用PBS洗滌細胞兩(liang) 次後，加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，消化約45-60秒，觀察MCFs細胞開始收縮後終止消化。
  

• 加入新鮮培養(yang) 基，輕輕吹打使細胞脫落並均勻分散。

• 離心重懸：用1000rpm離心3分鍾，棄去上清液後以培養(yang) 基重懸MCFs細胞，按比例接種於(yu) 新的培養(yang) 皿中。

凍存與複蘇

• 凍存：將MCFs細胞懸液與(yu) 90%培養(yang) 基和10%DMSO混合，逐步降溫至-80°C後轉入液氮中長期保存。

• 複蘇：將凍存的MCFs細胞快速解凍於(yu) 37°C水浴中，離心去除DMSO後，按上述方法接種培養(yang) 。

注意事項

• 操作需在無菌環境下進行，避免MCFs細胞汙染。

• 定期觀察MCFs細胞生長狀態，及時更換培養(yang) 基以維持活性。

• 建議傳(chuan) 代次數控製在5代以內(nei) ，以保證實驗中MCFs細胞的穩定性和生物學特性。