
AC16細胞(人心肌細胞)
- 來源:心肌;心室;雜交細胞
- 細胞特征:貼壁細胞 , 成纖維細胞、上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:AC16細胞能夠表達心髒特異性標記物,如: β-肌球蛋白重鏈(βMHC) 連接蛋白43(CX-43)
AC16細胞係是通過將成年人心室心肌組織的kaiyun网站安全與(yu) SV40轉化的尿苷營養(yang) 缺陷型人成纖維細胞融合得到。為(wei) 了確保細胞係的純度,融合後的細胞在無尿苷培養(yang) 基中培養(yang) ,以去除未融合的成纖維細胞,並對存活的融合細胞進行亞(ya) 克隆篩選。AC16細胞在培養(yang) 過程中,可以通過調控培養(yang) 條件和抑製SV40大T抗原的表達,來調控其增殖和分化。
AC16細胞特性
基因表達:AC16細胞能夠表達心髒特異性標記物,包括β-肌球蛋白重鏈(βMHC)和連接蛋白43(CX-43)。
SV40大T抗原:細胞含有SV40大T抗原(T-Ag),與(yu) 永生化相關(guan) 。沉默SV40 T-Ag的表達可調控AC16細胞的增殖和分化。
線粒體(ti) DNA:AC16細胞係不含線粒體(ti) DNA。
AC16細胞參數表
細胞名稱 | AC16細胞(人心肌細胞) |
細胞別稱 | AC-16; |
來源 | 成人心室心肌組織的kaiyun网站安全與SV40轉化的人成纖維細胞融合 |
細胞形態 | 成纖維細胞、上皮細胞樣 |
細胞類型 | 雜交細胞 |
生長特性 | 貼壁細胞 |
收錄 | ATCC |
生物安全等級 | 2 |
致瘤性 | 否 |
培養基 | DMEM + 10% FBS + 1% P/S |
培養環境 | 37°C,5% CO₂,飽和濕度 |
換液周期 | 每2-3天更換一次 |
傳代比例 | 1:2-1:4(根據細胞生長速度及密度決定) |
凍存液配方 | 92% FBS + 8% DMSO |
凍存規格 | 200-300萬/ml,1ml每管 |
SV40大T抗原 | 存在,影響細胞的永生化 |
心髒特異性標記物 | β-肌球蛋白重鏈(βMHC)、連接蛋白43(CX-43) |
線粒體DNA | 不含 |
研究用途 | 心髒正常發育及病理狀態下的基因表達和功能研究 |
適用領域 | 心髒生物學、藥物篩選、疾病模型研究 |
培養教程
AC16人心肌細胞培養教程
傳代步驟
傳(chuan) 代比例:根據AC16細胞的生長狀態和密度,建議以1:2至1:4的比例進行傳(chuan) 代。
吸除原有的AC16細胞培養(yang) 基。
用3-4 ml的常溫PBS輕輕衝(chong) 洗細胞層10-20秒,然後吸走PBS。
加入1 ml胰酶,輕輕晃動培養(yang) 瓶,使胰酶均勻覆蓋AC16細胞層。
將培養(yang) 瓶放入37°C培養(yang) 箱,監控AC16細胞的消化進度。當細胞間隙變大但尚未完全脫落時,加入2-3 ml完全培養(yang) 基終止消化。
將細胞懸液輕輕混勻,900 rpm離心3-5分鍾,棄去上清。
重新懸浮AC16細胞於(yu) 新鮮培養(yang) 基中,然後均勻分配至新的培養(yang) 瓶中。
補足培養(yang) 基後,將培養(yang) 瓶放回培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。
細胞凍存
凍存細胞密度:200-300萬(wan) AC16細胞/ml,每管1 ml。
消化AC16細胞並離心後,棄去上清,加入預先配製好的凍存液,輕輕重懸細胞。
將AC16細胞懸液迅速移入標記好的凍存管中。
將凍存管放入程序降溫盒中,置於(yu) -80°C冰箱過夜,第二天轉移至液氮罐中長期保存。
如果沒有程序降溫盒,可以將凍存管先放入泡沫盒中,在4°C環境下靜置5-10分鍾後,再放入-80°C冰箱。
注意事項
胰酶消化AC16細胞的時間因細胞狀態而異,需密切觀察並嚴(yan) 格控製消化時間。
在吹打AC16細胞時要輕柔,避免產(chan) 生氣泡,防止影響細胞狀態和活性。
相關資料
STR鑒定及相關
參考文獻
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