HeLa-S3細胞係（人宮頸癌細胞係）

HeLa S3細胞是從(cong) HeLa細胞係克隆衍生出的人宮頸癌細胞。helas3細胞克隆在哺乳動物細胞的克隆分析中對研究染色體(ti) 變異、細胞營養(yang) 需求和斑塊形成能力非常有用。helas3細胞是轉染實驗的理想宿主。helas3細胞含有人乳頭瘤病毒18型（HPV-18）序列。HeLa S3 細胞係於(yu) 1955年由 Puck TT、Marcus PI 和 Cieciura SJ 從(cong) 宮頸癌組織中建立。

HeLa S3 細胞中均存在中等大小的穩心標記物，其標記包括一個(ge) M1 拷貝，一個(ge) M2 拷貝，兩(liang) 個(ge) M3 拷貝和一個(ge) M4 拷貝。helas3細胞係存在一定的細胞遺傳(chuan) 不穩定性。

HeLa-S3細胞係特性特征

• 病毒序列：含有人乳頭瘤病毒18型（HPV-18）序列.

• 角蛋白表達：通過免疫過氧化物酶染色，細胞角蛋白呈陽性.
  

• 同工酶表達：G6PD 和 A

• 轉染宿主：helas3細胞適合作為(wei) 轉染宿主
  

• 研究應用：用於(yu) 染色體(ti) 變異研究、細胞營養(yang) 研究、斑塊形成能力相關(guan) 的哺乳動物細胞群克隆分析.

• helas3細胞對以下病毒具有易感性：水皰性口炎病毒（格拉斯哥株和奧賽株）、腦心肌炎病毒、人腺病毒5型

HeLa-S3細胞係參數表

HeLa-S3人宮頸癌細胞係培養教程

HeLa S3 細胞複蘇

• 將凍存的 HeLa S3 細胞從(cong) 液氮中取出，在37°C水浴中快速解凍。

• 將 HeLa S3 細胞懸液轉移到含有預熱培養(yang) 基的T25培養(yang) 瓶中。

• 將培養(yang) 瓶置於(yu) 37°C、5% CO2的培養(yang) 箱中靜置培養(yang) 2-4小時，讓 HeLa S3 細胞貼壁。

HeLa S3 細胞常規培養

• 培養(yang) 基：DMEM或F12K，添加5-10%胎牛血清和1%雙抗。

• 培養(yang) 條件：37°C，5% CO2，70-80%濕度。

• 每2-3天更換 HeLa S3 細胞的培養(yang) 基。
  

• 定期觀察 HeLa S3 細胞狀態，確保細胞健康和適當的密度。

HeLa S3 細胞傳代

• 當 HeLa S3 細胞密度達到80-100%時進行傳(chuan) 代。
  

• 用PBS清洗 HeLa S3 細胞，然後加入胰酶消化細胞。

• 收集消化後的 HeLa S3 細胞，900rpm離心5分鍾。

• 按1:2至1:5的比例傳(chuan) 代到新的培養(yang) 瓶中，繼續培養(yang) HeLa S3 細胞。

HeLa S3 細胞懸浮培養馴化（如需要）

• 將貼壁培養(yang) 的 HeLa S3 細胞消化後，用EX-Cell®293培養(yang) 基重懸。
  

• 轉入125ml搖瓶中，初始密度約5×10^5 HeLa S3 cells/ml。

• 培養(yang) 條件：37°C，5% CO2，110rpm振蕩培養(yang) 。

• 每3天傳(chuan) 代一次，維持 HeLa S3 細胞密度在4×10^6 cells/ml左右。

HeLa S3 細胞懸浮培養擴大

• 培養(yang) 基：VirusPro®CD HeLa 和 EX-Cell®293 1:1組合。

• 將 HeLa S3 細胞懸浮培養(yang) 擴大至50L一次性生物反應器。
  

• 接種密度約為(wei) 1.0×10^6 HeLa S3 cells/ml。

HeLa S3 細胞病毒擴增（如適用）

• 最佳接毒密度：3-4×10^6 HeLa S3 cells/ml。
  

• 最佳MOI：0.02-0.1 pfu/HeLa S3 cell。

HeLa S3 細胞凍存

• 收集對數生長期的 HeLa S3 細胞。
  

• 使用90%血清和10% DMSO的凍存液。

• HeLa S3 細胞密度調整至5×10^6至1×10^7 HeLa S3 cells/ml。

• 將 HeLa S3 細胞懸液分裝到凍存管中，每管1ml。

• 放入-80°C冰箱24小時後轉入液氮長期保存 HeLa S3 細胞。

HeLa S3 細胞培養注意事項

• 定期檢查 HeLa S3 細胞形態和生長狀況：

• 使用倒置顯微鏡觀察 HeLa S3 細胞形態和密度，確保健康狀態。

• 健康的 HeLa S3 細胞應呈上皮樣，貼壁良好，形態均一。

  
  

• 避免 HeLa S3 細胞過度生長或密度過高：

• 及時傳(chuan) 代 HeLa S3 細胞，保持細胞在適當的密度範圍內(nei) 。

• 傳(chuan) 代比例一般為(wei) 1:2至1:5。

  
  

• 無菌操作，預防 HeLa S3 細胞汙染：

• 確保所有操作在無菌環境下進行。

• 定期檢查培養(yang) 基和 HeLa S3 細胞狀態，及時發現和處理汙染。

  
  

• HeLa S3 細胞鑒定：

• 定期進行 HeLa S3 細胞鑒定，確保細胞特性穩定。

• HeLa S3 細胞應顯示角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性，含有 HPV-18 序列。

HeLa S3 細胞常見問題

• 汙染問題：定期檢查 HeLa S3 細胞培養(yang) 基和細胞狀態，及時發現和處理汙染。

• 細胞過度生長：HeLa S3 細胞密度過高會(hui) 影響細胞健康，需及時傳(chuan) 代。

• 培養(yang) 基更換：HeLa S3 細胞培養(yang) 基營養(yang) 耗盡時需及時更換，通常每2-3天更換一次。

• 細胞貼壁不良：複蘇後 HeLa S3 細胞可能貼壁不良，需靜置培養(yang) 2-4小時以穩定細胞狀態。

• 懸浮培養(yang) 馴化：從(cong) 貼壁生長轉換為(wei) 懸浮生長時，需逐步適應，避免 HeLa S3 細胞應激。