
AV3人宮頸癌細胞最初被認為(wei) 來源於(yu) 正常羊膜,但隨後根據同工酶分析、HeLa標記染色體(ti) 和DNA指紋,發現是通過HeLa細胞汙染建立的。
AV3細胞通過免疫過氧化物酶染色,細胞對角蛋白呈陽性。
基因表達:免疫過氧化物酶染色角蛋白陽性
同工酶:G6PD,A
注:該係的細胞含有HeLa標記染色體(ti) ,並通過HeLa汙染來源
AV3人宮頸癌細胞參數表
名稱 | AV3人宮頸癌細胞(經STR鑒定) |
別稱 | AV3;人宮頸癌細胞 |
種屬來源 | 人 |
組織來源 | 宮頸 |
細胞類型 | 宮頸癌細胞 |
細胞形態 | 上皮細胞樣,貼壁生長 |
細胞起源 | 最初認為來自正常羊膜,後確認是HeLa細胞汙染 |
HeLa汙染證據 | 同工酶分析、HeLa標記染色體、DNA指紋 |
基因表達 | 免疫過氧化物酶染色角蛋白陽性 |
同工酶 | G6PD型A |
汙染檢測 | 支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性 |
傳代方法 | 1:3~1:6 |
傳代情況 | P23 |
細胞代數 | 10代以內 |
培養基 | 90% MEM + 10% FBS |
培養條件 | 氣相:95%空氣 + 5%二氧化碳;溫度:37°C;濕度:70%-80% |
凍存條件 | 無血清凍存液,液氮儲存 |
免疫過氧化物酶染色 | 細胞對角蛋白呈陽性 |
細胞特性 | 含有HeLa標記染色體,通過HeLa汙染來源 |
生物安全等級 | 1 |
凍存液 | 90%血清,10%DMSO,現用現配 |
供應限製 | 僅供科學研究使用 |
培養教程
AV3人宮頸癌細胞培養
細胞複蘇
從(cong) 液氮罐中取出凍存管,迅速在37°C水浴中解凍。
用70%乙醇消毒凍存管外部後,在無菌條件下打開。
將細胞懸液轉移到15mL離心管中,加入5mL預熱的培養(yang) 基,混勻。
以800rpm離心5分鍾,棄上清,重懸於(yu) 5mL培養(yang) 基中,轉移至T25培養(yang) 瓶中。
將培養(yang) 瓶置於(yu) 37°C,5% CO2培養(yang) 箱中,24小時後更換新鮮培養(yang) 基。
細胞傳代
當細胞達到70%-80%匯合時,去除舊培養(yang) 基,用PBS衝(chong) 洗細胞一次。
加入2mL胰蛋白酶-EDTA,37°C孵育2-5分鍾,觀察細胞脫離。
加入培養(yang) 基中和胰蛋白酶,吹打細胞懸液。
將細胞懸液轉移至15mL離心管,以800rpm離心5分鍾,棄上清。
按1:3~1:6比例重懸細胞,轉移至新的T25培養(yang) 瓶中。
將新培養(yang) 瓶置於(yu) 37°C,5% CO2培養(yang) 箱中。
細胞凍存
按傳(chuan) 代步驟收集細胞。
重懸於(yu) 預冷凍存液中,濃度為(wei) 1x10^6 cells/mL。
分裝至凍存管,每管1mL。
將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中,放入-80°C冰箱過夜。
次日轉移至液氮罐中長期保存。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 9,10 |
D2S1338 | 17 |
D3S1358 | 15,18 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 12 |
D8S1179 | 12,13 |
D13S317 | 13.3 (ATCC=CCL-21) |
14 (ECACC=88102402; IZSLER=BS CL 3) | |
D16S539 | 9,10 |
D18S51 | 15,16 |
D19S433 | 13,14 |
D21S11 | 27,28 |
FGA | 18,21 |
Penta D | 8,15 |
Penta E | 7,17 |
TH01 | 7 |
TPOX | 8,12 |
vWA | 16,18 |
vWA | 16,17 |