Hela229細胞（人宮頸癌細胞）

HeLa229細胞是從(cong) 親(qin) 本HeLa細胞係衍生出的宮頸腺癌細胞，最初來源於(yu) 一名叫亨麗(li) 埃塔·拉克斯（Henrietta Lacks）的女性宮頸腫瘤。她於(yu) 1951年在約翰·霍普金斯醫院接受宮頸癌治療時，其腫瘤組織被采樣，成為(wei) 研究界廣泛使用的細胞係之一。值得注意的是，當時的采樣並未征得她的同意。

Hela229細胞特性特征

• 對脊髓灰質炎病毒的抗性：Hela229細胞對脊髓灰質炎病毒具有相對的抵抗力。
  

• 易感病毒：Hela229細胞對人腺病毒7和水皰性口炎病毒表現出易感性。

• 基因表達：通過免疫過氧化物酶染色，Hela229細胞的角蛋白呈陽性，表明其上皮細胞特征。
  

• 同工酶：檢測到G6PD（葡萄糖-6-磷酸脫氫酶）和A同工酶的存在。

• 乳頭瘤病毒DNA：通過PCR技術證實，Hela229細胞係攜帶有乳頭狀瘤病毒的DNA序列

• HeLa229細胞能夠輕鬆適應懸浮培養(yang) 環境
  

Hela229細胞參數表

Hela229人宮頸癌細胞培養教程

HeLa 229細胞複蘇

• 從(cong) 液氮中取出含有1mL HeLa 229細胞懸液的凍存管，迅速放入37°C的水浴中解凍，期間輕輕搖動。

• 解凍後，加入4mL含10%胎牛血清（FBS）的Minimum Essential Medium（MEM）培養(yang) 基，輕輕混合均勻，確保HeLa 229細胞得到充分複蘇。

• 在1000rpm離心4分鍾，棄去上清液，保留HeLa 229細胞。

• 用1-2mL新鮮培養(yang) 基重懸HeLa 229細胞，輕輕吹打均勻後，將細胞加入到培養(yang) 瓶中，並置於(yu) 37°C、5% CO₂的培養(yang) 箱中過夜培養(yang) 。

• 第二天換液並檢查HeLa 229細胞的生長情況和密度。

HeLa 229細胞常規傳代

• 當HeLa 229細胞密度達到80%-90%時，可以進行傳(chuan) 代培養(yang) 。

• 棄去培養(yang) 基，使用無鈣鎂的PBS緩衝(chong) 液衝(chong) 洗HeLa 229細胞1-2次，以去除殘留的培養(yang) 基。

• 加入0.25%胰酶-0.53mM EDTA消化液，置於(yu) 37°C培養(yang) 箱中消化1-2分鍾，觀察HeLa 229細胞是否脫落。

• 當HeLa 229細胞脫落後，加入培養(yang) 基終止消化，輕輕吹打使細胞均勻懸浮。

• 在1000rpm離心4分鍾，棄去上清液。

• 加入1-2mL培養(yang) 基重懸HeLa 229細胞，並按1:2至1:5的比例分種至新的培養(yang) 瓶中，繼續培養(yang) 。

HeLa 229細胞凍存

• 棄去培養(yang) 基，使用PBS緩衝(chong) 液衝(chong) 洗HeLa 229細胞1-2次，去除殘留培養(yang) 基和廢物。

• 加入1mL胰酶消化HeLa 229細胞，待細胞變圓並脫落後，加入2mL完全培養(yang) 基終止消化。

• 在1000rpm離心5分鍾，棄去上清液，保留HeLa 229細胞沉澱。

• 用含8%DMSO和20%FBS的培養(yang) 基重懸HeLa 229細胞。

• 按每1mL分裝HeLa 229細胞至凍存管中，並放入程序降溫盒中，置於(yu) -80°C冰箱2小時以上後轉移至液氮保存。

HeLa 229細胞分離與純化

• 細胞培養(yang) 準備：使用適合HeLa 229細胞的培養(yang) 基，如MEM或RPMI-1640，加入10%胎牛血清（FBS）和1%青黴素-鏈黴素（P/S），在37°C、5% CO₂的條件下培養(yang) HeLa 229細胞。

• HeLa 229細胞傳(chuan) 代：當HeLa 229細胞密度達到80%-90%時，按標準傳(chuan) 代步驟進行細胞消化、重懸並傳(chuan) 代，確保HeLa 229細胞的健康生長。

  
  

• HeLa 229細胞純化方法：

• 密度梯度離心：使用Ficoll或Percoll密度梯度介質分離HeLa 229細胞，獲得均一的細胞群體(ti) 。

• 流式細胞術：通過特定的細胞表麵標誌物，進行HeLa 229細胞的分選和純化。

  
  

• HeLa 229細胞重懸：在新鮮培養(yang) 基中重懸HeLa 229細胞，確保均勻分散，並使用血球計數板測定細胞濃度。