
SiHa細胞是從(cong) 日本一名55歲女性患者的宮頸鱗狀細胞癌組織中建立起來的。
Siha細胞取自外科手術切除的原位組織樣品,並在其電鏡下觀察到典型的橋粒和細胞質中豐(feng) 富的張力絲(si) 。
SiHa細胞形態上呈上皮細胞樣,生長特性為(wei) 貼壁生長,SiHa細胞中整合了HPV16基因組,每個(ge) 細胞中含有1~2個(ge) 拷貝,SiHa細胞具備獨特的遺傳(chuan) 特性和豐(feng) 富的細胞學特征。
SiHa細胞是一種超三倍體(ti) 人類細胞係,模式染色體(ti) 數為(wei) 71,存在於(yu) 24%的細胞中。大多數細胞的染色體(ti) 數量分布在69到72之間。多倍體(ti) 細胞占7.6%,共有15條或更多的標記染色體(ti) 。其中有dup(2)(q22q31)和del(2))(q31),它們(men) 可能是由兩(liang) 個(ge) N2之間的平衡易位引起的。具有兩(liang) 個(ge) del(2)拷貝。M2是一個(ge) A3大小的肢端著絲(si) 粒。M13是一個(ge) 微小的亞(ya) 中心,每個(ge) 細胞有1-3個(ge) 拷貝。M2和M13的起源尚未確定。正常的X染色體(ti) 有兩(liang) 個(ge) 拷貝。N2不存在,可能被dup(2)和del(2)取代。
SiHa人子宮頸鱗癌細胞表達的基因是p53+和pRB+。siha細胞係是一種合適的轉染宿主。
SiHa細胞有致瘤性,在裸鼠身上;形成低分化表皮樣癌(III級)
SiHa人子宮頸鱗癌細胞參數表
細胞名稱 | SiHa人子宮頸鱗癌細胞 |
細胞別稱 | Siha; SIHA |
種屬來源 | 人 |
年齡性別 | 女;55歲 |
組織來源 | 子宮頸鱗癌 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
生長特性 | 貼壁生長 |
生物安全等級 | 2 [Cells contain human papilloma virus] |
致瘤性 | Yes, in nude mice; forms poorly differentiated epidermoid carcinoma (grade III). |
培養基 | 89%MEM+10%FBS+1%PS |
培養條件 | 氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃倍增時間~50-60 hours |
凍存條件 | 凍存液,液氮儲存 |
傳代方法 | 1:2至1:3,每周2次。 |
細胞數量 | 1×106cells/T25培養瓶或者1mL凍存管包裝 |
基因表達情況 | Oncogenes: p53+; pRB+ |
表達同工酶 | AK-1、ES-D、G6PD、GLO-I、Me-2、PGM1和PGM3 |
HPV-16情況 | HPV-16陽性,每個細胞整合了1到2個病毒基因組拷貝,含有92%的細胞表達上皮細胞粘附分子(epCAM) |
其他特征 | SiHa為(wei) 上皮細胞樣,貼壁生長,染色體(ti) 為(wei) 超三倍體(ti) 核型,平均染色體(ti) 數目在69~72之間。 電鏡下可以看到細胞間典型的橋粒和細胞質中大量的張力絲(si) 。 Siha細胞在裸鼠體(ti) 內(nei) 可成瘤,並形成低分化的鱗狀細胞癌(III級)。 |
應用 | 癌症研究、藥物測試、傳染病研究、細胞培養、轉染宿主等 |
SiHa細胞應用
癌症研究: SiHa細胞被用於(yu) 研究宮頸癌的發生發展和分子機製。其能夠在裸鼠體(ti) 內(nei) 形成低分化的表皮樣癌。
藥物測試: SiHa細胞可用於(yu) 測試抗癌藥物的有效性和毒性。
傳(chuan) 染病研究: SiHa細胞中含有HPV16基因組,可用於(yu) 研究人乳頭狀瘤病毒(HPV)感染和相關(guan) 疾病的機製。
細胞培養(yang) 研究: SiHa細胞是一種貼壁生長的細胞,適合用於(yu) 3D細胞培養(yang) 。
培養教程
SiHa細胞培養(yang) 方法
材料:
SiHa細胞培養(yang) 物
培養(yang) 基 (Minimum Essential Medium (MEM))
胎牛血清 (FBS)
抗生素/抗菌素 (Penicillin-Streptomycin)
0.25% Trypsin-EDTA 溶液
離心管
細胞培養(yang) 器具:細胞培養(yang) 箱、無菌培養(yang) 室、移液器、吸管等
培養(yang) 步驟:
培養(yang) 基製備:
將MEM培養(yang) 基加入10%的FBS和1%的抗生素/抗菌素,混合均勻製備完全培養(yang) 基。
細胞解凍:
從(cong) 液氮罐中取出SiHa細胞凍存管,迅速放入37℃的水浴中使其解凍。
解凍後將細胞轉移到離心管中,用完全培養(yang) 基緩慢稀釋,避免細胞受到過度冷凍傷(shang) 害。
細胞傳(chuan) 代:
當SiHa細胞生長至80-90%的密度時,進行傳(chuan) 代。將細胞培養(yang) 物放置在無菌操作條件下。
用PBS洗滌細胞,加入0.25% Trypsin-EDTA溶液,放置數分鍾使細胞脫落。
加入培養(yang) 基停止酶解作用,將細胞懸液離心重懸後轉移至新的培養(yang) 瓶中。
細胞培養(yang) :
將細胞懸液轉移至細胞培養(yang) 瓶中,確保培養(yang) 基充分覆蓋細胞。
將培養(yang) 瓶放入37℃、5% CO2的細胞培養(yang) 箱中培養(yang) 。
每隔2-3天更換培養(yang) 基,保持細胞的健康生長。
細胞凍存:
當細胞密度達到所需數量時,可以進行凍存。
將細胞用55% 培養(yang) 基+40%FBS+5%DMSO 的凍存液混合均勻,分裝至凍存管中。
快速冷卻並將凍存管存放在液氮罐中。
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STR鑒定及相關
STR點位信息
Amelogenin | X |
CSF1PO | 12 |
D2S1338 | 24 |
D3S1358 | 16,17 |
D5S818 | 9 |
D7S820 | 10 |
D8S1179 | 13,16 |
D13S317 | 11 |
D16S539 | 8,12 (PubMed=29156801) |
12 (AddexBio; ATCC; CCRID; Cosmic-CLP; KCLB; PubMed=25877200) | |
D18S51 | 15 |
D19S433 | 14.2 |
D21S11 | 29,31 |
FGA | 21 |
Penta D | 9,12 |
Penta E | 10,12 |
TH01 | 6,9 |
TPOX | 8 (AddexBio; ATCC; CCRID; Cosmic-CLP; KCLB; PubMed=25877200) |
8,9 (PubMed=29156801) | |
vWA | 14,17 |
參考文獻
- 《南華大學》 2021年
- 摘要:探究脂肪鈣粘蛋白1(FAT1)與宮頸鱗癌患者的臨床病理特征及預後的相關性。研究FAT1對宮...
- 《廣西醫科大學》 2018年
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