
HEM15a細胞(人永生化子宮內(nei) 膜異位細胞-內(nei) 膜間質細胞) (暫不提供)
- 來源:子宮
- 細胞特征:貼壁細胞 ,梭形
- 培養(yang) 基:DMEM/F12+10% FBS+1% P/S
- 其他:hEM15A細胞表達雌激素受體(ti) (ER)和孕激素受體(ti) (PR)
hEM15A細胞係是從(cong) 一位33歲女性子宮內(nei) 膜異位症患者的在位內(nei) 膜間質細胞中提取並經過永生化處理後建立。HEM15a細胞能夠在體(ti) 外長期增殖,具有穩定的生長特性。hEM15A細胞保留了子宮內(nei) 膜間質細胞的特征,適用於(yu) 研究子宮內(nei) 膜異位症的病理機製及其相關(guan) 治療方法。HEM15a細胞為(wei) 深入理解子宮內(nei) 膜異位症的生物學特性、發病機製以及開發潛在治療策略提供了關(guan) 鍵的研究工具。
HEM15a內膜間質細胞特性特征
激素受體(ti) 表達:hEM15A細胞表達雌激素受體(ti) (ER)和孕激素受體(ti) (PR),對性激素的反應能力。
基因組穩定性:hEM15A細胞在多代傳(chuan) 代中保持了較高的基因組穩定性,適合長期實驗使用。
轉錄組特征:研究表明,HEM15a細胞係可能表達與(yu) 子宮內(nei) 膜異位症相關(guan) 的多種基因,包括炎症因子和生長因子,這些基因參與(yu) 調控細胞增殖、遷移及凋亡等過程。
疾病模型:HEM15a細胞為(wei) 研究子宮內(nei) 膜異位症的病理機製提供了重要的實驗模型,有助於(yu) 探索其發病機製及相關(guan) 信號通路。
藥物篩選:HEM15a細胞可用於(yu) 評估新藥物對子宮內(nei) 膜異位症的治療效果,為(wei) 臨(lin) 床治療提供潛在的新策略
HEM15a人永生化子宮內膜異位細胞參數表
細胞名稱 | HEM15a細胞(人子宮內膜異位症患者在位內膜間質細胞) |
細胞別稱 | hEM 15A;hEM15A |
組織來源 | 人子宮 |
疾病特征 | 子宮內膜異位症 |
細胞形態 | 梭形 |
生長特性 | 貼壁生長 |
細胞代數 | 10代以內 |
傳代比例 | 1:2至1:6,每周2-3次 |
傳代密度 | 細胞密度達80%-90%時進行傳代 |
傳代方法 | 使用不含鈣、鎂的PBS潤洗後加消化液進行消化 |
培養基 | DMEM/F12 + 10%-15% FBS + 1% 雙抗(PS) |
培養條件 | 溫度:37℃;氣相:95%空氣 + 5%二氧化碳 |
倍增時間 | 每周2至3次 |
凍存條件 | 90%完全培養基 + 10% DMSO,液氮儲存 |
支原體檢測 | 陰性 |
細菌真菌檢測 | 陰性 |
病原體檢測 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎均為陰性 |
使用權限 | 僅限於科學研究,不可用於動物或人類疾病的治療產品 |
安全性說明 | 所有腫瘤和病毒轉染的細胞視為有潛在生物危害性,需在二級生物安全台內操作。 |
保藏機構 | CCTCC; GDC0601,GeneCopoeia; SL430 |
培養教程
HEM15a人永生化子宮內膜異位細胞內膜間質細胞培養教程
細胞複蘇
確認hEM15A細胞的凍存管標識,並準備好培養(yang) 基,推薦使用DMEM/F12培養(yang) 基,加入10%胎牛血清(FBS)和1%雙抗(青黴素和鏈黴素)。
將hEM15A細胞凍存管置於(yu) 37℃水浴中快速搖晃解凍,直到細胞完全融化(約1-2分鍾)。隨後,將4 mL預先準備好的培養(yang) 基加入解凍的hEM15A細胞中,輕輕混合均勻。
在1000 RPM下離心4分鍾,棄去上清液。加入1-2 mL新鮮培養(yang) 基,輕輕吹勻,使hEM15A細胞重懸。
將hEM15A細胞懸液轉移到T25培養(yang) 瓶中,或加入10 cm培養(yang) 皿中(約8 mL培養(yang) 基),然後放入37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中,過夜培養(yang) 。
次日檢查hEM15A細胞的生長狀態和密度,確保細胞適合繼續培養(yang) 。
細胞傳代
當hEM15A細胞的密度達到80%-90%時,可以進行傳(chuan) 代。準備新的培養(yang) 瓶和培養(yang) 基。
棄去舊培養(yang) 基,使用不含鈣、鎂的PBS衝(chong) 洗hEM15A細胞1-2次。加入1 mL消化液(0.25%胰蛋白酶和0.53 mM EDTA),置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾。在顯微鏡下觀察,若大部分hEM15A細胞變圓並脫落,立即輕敲幾下培養(yang) 瓶,加2-3 mL完全培養(yang) 基以終止消化。
將消化後的hEM15A細胞懸液轉移至無菌離心管中,以1000 RPM離心5分鍾,棄去上清液,補加適量的新鮮培養(yang) 基(1-2 mL),輕輕吹勻。
將hEM15A細胞懸液按1:2至1:6的比例分裝到新的培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿中,每個(ge) 瓶中加入8 mL培養(yang) 基,隨後放回37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。
細胞凍存
配製凍存液,采用90%胎牛血清和10% DMSO的混合液(現用現配)。
當hEM15A細胞生長良好時,棄去培養(yang) 基,使用PBS衝(chong) 洗細胞後加入胰酶進行消化。消化後終止反應並離心收集hEM15A細胞。
用凍存液重懸hEM15A細胞,確保混合均勻。按每個(ge) 凍存管大於(yu) 1×10^6個(ge) 細胞的標準分配至凍存管中,並做好標識。
將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中(-80℃冰箱中至少2小時),隨後轉移至液氮中儲(chu) 存。
相關資料
STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10,11 |
D2S1338 | 19,25 |
D3S1358 | 16,17 |
D5S818 | 10,11 |
D6S1043 | 14,18 |
D7S820 | 11,12 |
D8S1179 | 10,13 |
D12S391 | 21,22 |
D13S317 | 8 |
D16S539 | 10,12 |
D18S51 | 15,17 |
D19S433 | 13 |
D21S11 | 29,32.2 |
FGA | 22,23 |
Penta E | 14,16 |
TH01 | 9 |
TPOX | 8,11 |
vWA | 14,18 |