小鼠胎盤絨毛膜滋養(yang) 層細胞（kaiyun网站安全）

小鼠胎盤絨毛膜滋養(yang) 層細胞主要來源於(yu) 妊娠小鼠的胎盤組織，胎盤是一個(ge) 在胚胎和母體(ti) 之間起著至關(guan) 重要作用的器官。它通過胚胎的胚膜和母體(ti) 子宮內(nei) 膜共同發育而成，承擔著物質交換、激素分泌和胎兒(er) 保護等多種功能。胎盤的結構複雜，包括羊膜、絨毛膜以及蛻膜等部分，其中絨毛膜是胎盤的核心組成部分。絨毛膜通過滋養(yang) 層細胞的作用與(yu) 母體(ti) 的子宮內(nei) 膜建立了緊密的聯係，形成了胎兒(er) 與(yu) 母體(ti) 之間的物質和氣體(ti) 交換通道。

絨毛膜由兩(liang) 層主要細胞構成：合體(ti) 滋養(yang) 細胞和細胞滋養(yang) 細胞。合體(ti) 滋養(yang) 細胞位於(yu) 絨毛膜的外層，具有侵入母體(ti) 子宮壁的功能，幫助形成血管網絡，這對於(yu) 母胎之間的營養(yang) 物質交換至關(guan) 重要。細胞滋養(yang) 細胞位於(yu) 合體(ti) 滋養(yang) 細胞內(nei) 層，主要發揮支持、保護以及免疫調節等作用。

小鼠胎盤絨毛膜滋養(yang) 層細胞的提取通常通過從(cong) 妊娠小鼠的胎盤組織中分離獲得。常用的方法是將胎盤組織經胰蛋白酶、DNA酶等消化液處理，分離出滋養(yang) 層細胞並在體(ti) 外進行培養(yang) ，是研究胎盤生理、胚胎發育及免疫反應的重要工具。

小鼠胎盤絨毛膜滋養層細胞特性特征

• 標記物表達：絨毛膜滋養(yang) 層細胞的分子特征包括細胞角蛋白7（Cytokeratin-7, CK7）的陽性表達。

• 激素分泌：滋養(yang) 層細胞能夠分泌多種激素，如人絨毛膜促性腺激素（hCG）、孕酮和雌激素等，這些激素在妊娠期間對維持妊娠至關(guan) 重要。

• 基因表達：小鼠胎盤絨毛膜滋養(yang) 層細胞的基因表達譜顯示出與(yu) 妊娠相關(guan) 的多種基因，包括那些參與(yu) 細胞增殖、分化和免疫調節的基因。例如，研究表明這些細胞中表達有與(yu) 血管生成相關(guan) 的基因，這對於(yu) 形成胎盤內(nei) 的血管網絡至關(guan) 重要。

• 功能調節：滋養(yang) 層細胞在妊娠過程中通過調節自身的基因表達來適應母體(ti) 環境，確保胎兒(er) 獲得足夠的營養(yang) 和氧氣，同時防止母體(ti) 免疫係統對胎兒(er) 的攻擊。

原代小鼠胎盤絨毛膜滋養層細胞參數表

小鼠胎盤絨毛膜滋養層細胞（kaiyun网站安全）培養教程

細胞培養步驟

• 清潔與(yu) 消毒：用75%酒精擦拭培養(yang) 瓶外表，確保培養(yang) 器具無菌。
  

• 培養(yang) 箱預熱：將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃、5% CO₂飽和濕度培養(yang) 箱中靜置30分鍾，以提供適宜的小鼠胎盤絨毛膜滋養(yang) 層細胞生長環境。

初始細胞複蘇

• 從(cong) 液氮中取出小鼠胎盤絨毛膜滋養(yang) 層細胞後，迅速轉移至37℃水浴中解凍約1-2分鍾。

• 解凍後，將細胞懸液轉移至離心管中，加入10 mL預熱的完全培養(yang) 基，離心（1000 rpm，5分鍾）去除冷凍液。

• 將重懸的細胞接種於(yu) T25培養(yang) 瓶中，補充完全培養(yang) 基至5 mL，置於(yu) 培養(yang) 箱內(nei) 培養(yang) 。

傳代操作

• 吸出舊培養(yang) 基，用PBS緩衝(chong) 液輕柔清洗1次，去除代謝廢物。
  

• 加入1 mL 0.25%胰蛋白酶均勻覆蓋細胞表麵。
  

• 靜置30秒後吸除多餘(yu) 消化液，置於(yu) 37℃水浴中消化1-3分鍾。

• 在顯微鏡下觀察小鼠胎盤絨毛膜滋養(yang) 層細胞形態，當細胞呈圓形並開始脫落時，立即加入3倍體(ti) 積的完全培養(yang) 基終止消化。

• 吸取消化後的細胞懸液，用吸管輕輕吹打分散細胞。
  

• 按1:2或1:3的比例接種到新培養(yang) 瓶，補充至5 mL完全培養(yang) 基後，將培養(yang) 瓶放回培養(yang) 箱。

細胞狀態監控

• 形態觀察：合體(ti) 滋養(yang) 細胞：較大且多核，緊密貼壁。

• 細胞滋養(yang) 細胞：單核，梭形或多角形，呈分散貼壁狀態。

• 汙染檢測：顯微鏡下定期觀察小鼠胎盤絨毛膜滋養(yang) 層細胞形態，確認無汙染或形態異常。

注意事項

• 在小鼠胎盤絨毛膜滋養(yang) 層細胞培養(yang) 全過程中需嚴(yan) 格保持無菌環境，避免細菌、真菌等外源性汙染。

• 胰蛋白酶消化時間需適當，過度消化可能導致細胞損傷(shang) 。

• 剛接種的細胞需靜置，避免過多操作影響貼壁效率。