JAR細胞係（人胎盤絨毛癌細胞）

JAR細胞是源自一名24歲女性胎盤（男性胎兒(er) ）滋養(yang) 層腫瘤的細胞係。

JAR細胞是假三倍體(ti) 狀態，染色體(ti) 數通常為(wei) 68，出現在24%的細胞中；但也有色體(ti) 數為(wei) 69（22%）和70（18%）的細胞。其核型異常複雜，大多數細胞具有20到25條標記染色體(ti) （>染色體(ti) 總含量的30%），其中許多顯示複雜的結構重排。
這些標記的染色體(ti) 片段的來源往往難以識別。在常見的標記物中有8p+、11p、大的中心[？t（3qter-3q12:：？-C-？：3q12-3qter）]der（？13）t（1；？13）（p13；？q14）和許多其他標記物。隻有一條正常的X染色體(ti) 。未發現正常N3和N13。

JAR細胞係特性

• JAR 細胞生長形態為(wei) 上皮細胞樣，以貼壁方式生長。
  

• JAR細胞表達雌激素、孕激素、人絨毛膜促性腺激素和人絨毛膜體(ti) 乳營養(yang) 素（胎盤催乳素）。

• JAR細胞經重新培養(yang) 後，hCG 平均產(chan) 量為(wei) 22.5 ng/mL。

• 同工酶:AK-1，1；ES-D，2；G6PD，B；GLO-I，1；PGM1, 1-2；PGM3，1-2。

JAR細胞係參數表

JAR人胎盤絨毛癌細胞係培養教程

細胞複蘇

• 將含有1 mL JAR細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水麵要低於(yu) 凍存管蓋部）搖晃解凍。

• 將解凍後的JAR細胞懸液移入事先準備好的含有4 mL培養(yang) 基的15 mL離心管中混合均勻。

• 以1000 rpm條件離心4分鍾，棄去上清液。

• 加入1 mL培養(yang) 基吹勻，然後將所有JAR細胞懸液移入含有5 mL培養(yang) 基的培養(yang) 瓶中培養(yang) 過夜。

• 第二天換液並檢查JAR細胞密度。

細胞傳代

• 當JAR細胞密度達80%-90%時，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。

• 吸走培養(yang) 基，加入3-5 mL PBS後輕輕晃動培養(yang) 瓶潤洗JAR細胞。

• 吸幹PBS後加入1 mL 0.25%胰酶-0.53 mM EDTA，輕輕搖晃培養(yang) 瓶使胰酶覆蓋JAR細胞表麵，將培養(yang) 瓶放入37℃培養(yang) 箱中消化。

• 當JAR細胞間隙變大但未脫落，可輕輕吹下時即刻終止消化，避免JAR細胞完全脫落。

• 加入6-8 mL完全培養(yang) 基終止消化，輕輕吹下JAR細胞並混勻。

• 以1000 rpm條件離心3分鍾，棄去上清，再用新鮮培養(yang) 基重懸JAR細胞。

• 將JAR細胞懸液按1:3至1:4的比例分到新的培養(yang) 瓶中繼續培養(yang) 。

細胞凍存

• 待JAR細胞生長狀態良好時進行細胞凍存。

• 吸走培養(yang) 基，加入PBS潤洗JAR細胞。

• 加入0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化JAR細胞並收集到離心管中。

• 以1000 rpm條件離心4分鍾，棄去上清，用培養(yang) 基重懸JAR細胞並計數。

• 根據JAR細胞數量加入適量的血清和DMSO（終濃度為(wei) 10%），輕輕混勻。

• 每支凍存管凍存1 mL JAR細胞懸液（密度為(wei) 1-2 x 10^6 cells/mL），做好標識。

• 將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，放入-80℃冰箱，至少2小時後轉移到液氮中保存。

注意事項

• JAR細胞對消化較為(wei) 敏感，消化過度會(hui) 嚴(yan) 重影響JAR細胞狀態，可能導致傳(chuan) 代後JAR細胞死亡或不生長。

• JAR細胞消化到細胞間隙變大但未完全脫落時，即可輕輕吹打細胞終止消化。

• 混勻JAR細胞時應盡量輕柔，避免產(chan) 生大量氣泡。

• 培養(yang) 過程中應定期檢查JAR細胞狀態和密度，及時進行傳(chuan) 代和換液。