JEG3細胞係（人絨毛膜癌細胞係）

JEG-3細胞是一種超三倍體(ti) 、克隆衍生、具有上皮形態的人類細胞係，源自Erwin Turner腫瘤的Woods菌株分離出的六個(ge) 克隆衍生株係之一。

JEG-3細胞的染色體(ti) 特征為(wei) 超三倍體(ti) ，模態染色體(ti) 數目為(wei) 71，發生率為(wei) 34%，多倍體(ti) 發生率為(wei) 2.6%。常見的染色體(ti) 異常包括t(4;11)(p15;q13)、i(13q)、t(10p15q)、del(18)(q21)及其他標記物。同時見到在一顆N14和兩(liang) 顆N22中可以看到巨大的衛星。N2、N5和N9有4個(ge) 副本，N7、N13、N18、N21和X有一個(ge) 副本。通過Q帶檢查檢測到單個(ge) Y染色體(ti) 。

JEG3細胞係特性

• JEG-3細胞能夠在裸鼠身上形成惡性腫瘤，模擬絨毛膜癌的病理特征。
  

• JEG3細胞係表達人絨毛膜促性腺激素（hCG）、胎盤催乳素（絨毛膜體(ti) 乳營養(yang) 素）和黃體(ti) 酮。

• 同工酶分析顯示AK-1、ES-D、G6PD、GLO-I、PGM1和PGM3的特定異構型。

• JEG-3細胞能夠將類固醇前體(ti) 轉化為(wei) 雌酮和雌二醇。

• 基因表達：人絨毛膜促性腺激素；人絨毛膜體(ti) 乳營養(yang) 素（胎盤催乳素）；黃體(ti) 酮
  

JEG3細胞係參數表

JEG3人絨毛膜癌細胞係培養教程

細胞複蘇

• 將含有1 mL JEG-3細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水麵要低於(yu) 凍存管蓋部）搖晃解凍，時間控製在1-2分鍾內(nei) 。
  

• 解凍後迅速將JEG-3細胞懸液移入事先準備好的含有4 mL培養(yang) 基的15 mL離心管中，輕輕混合均勻。

• 在1000 rpm條件下離心4分鍾。

• 棄去上清液，加入1 mL培養(yang) 基輕輕吹勻。

• 將所有JEG-3細胞懸液加入含有5 mL培養(yang) 基的培養(yang) 瓶中，或將JEG-3細胞懸液加入10 cm培養(yang) 皿中，加入約8 mL培養(yang) 基，培養(yang) 過夜。

• 第二天更換培養(yang) 基並檢查細胞密度。

細胞傳代

• 當JEG-3細胞密度達到80%-90%時，棄去培養(yang) 上清液。
  

• 用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗JEG-3細胞1-2次。

• 加入2 mL消化液（0.25% Trypsin-0.53 mM EDTA）於(yu) 培養(yang) 瓶中，使消化液浸潤所有JEG-3細胞，將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-3分鍾（視細胞情況而定）。

• 在顯微鏡下觀察JEG-3細胞消化情況，若細胞大部分變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養(yang) 瓶後加3 mL完全培養(yang) 基終止消化。

• 輕輕打勻後將JEG-3細胞懸液移入無菌離心管中，在1000 rpm條件下離心5分鍾，棄去上清液。
  

• 加入1-2 mL培養(yang) 基輕輕吹勻。

• 將JEG-3細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含有8 mL培養(yang) 基的培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿中。
  

• 放入培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。

細胞凍存

• 當JEG-3細胞生長狀態良好時，收集JEG-3細胞及細胞培養(yang) 液，裝入無菌離心管中。
  

• 在1000 rpm條件下離心4分鍾，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行JEG-3細胞計數。

• 根據JEG-3細胞數量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度達到5×10^6~1×10^7 cells/mL，輕輕混勻。
  

• 每支凍存管加入1 mL JEG-3細胞懸液，做好標識。

• 將凍存管放入-80℃冰箱預凍24小時後，轉入液氮儲(chu) 存。
  

• 記錄凍存管位置以便下次取用。