
HTR8-SVneo細胞(人絨毛膜滋養(yang) 層細胞)
- 來源:胎盤;滋養(yang) 層細胞;6-12孕周;SV40轉化
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:抗原表達:細胞角蛋白-7+;胰島素樣生長因子II+;NDOG-5(胎盤堿性磷酸酶(PLAP)抗體(ti) )+;增殖細胞核抗原(PCNA)+;人白細胞抗原骨架抗原(W6/32)+;整合素亞(ya) 基α1、α3、α5、αv和β1+
HTR8-SVneo是一種人絨毛膜外滋養(yang) 層細胞係,於(yu) 1992年從(cong) 6至12周孕齡的胎盤組織中分離,並通過轉染表達猿猴病毒40(SV40)大T抗原的基因獲得了永生化特性。HTR8-SVneo細胞係在研究胎盤生物學和滋養(yang) 層功能方麵具有重要的應用價(jia) 值,被廣泛用於(yu) 妊娠相關(guan) 疾病及其機製的研究。HTR8-SVneo細胞係由ATCC等權威機構提供,確保了其身份的準確性和活性,是研究滋養(yang) 層生物學的理想模型。
HTR8-SVneo細胞特性特征
HTR8-SVneo細胞表達多種特定標誌物:胰島素樣生長因子(IGF)-II、NDOG-5(胎盤堿性磷酸酶抗體(ti) )、增殖細胞核抗原(PCNA)、人白細胞抗原框架抗原(W6/32)、整合素亞(ya) 基α1、α3、α5、αv和β1,以及αvβ3/β5玻連蛋白受體(ti)
陰性標記:HTR8-SVneo細胞角蛋白-7、PLAP抗體(ti) (NDOG-5)、PCNA、W6/32等抗原表達上呈陽性;對於(yu) 噬菌體(ti) 標記63/D3、內(nei) 皮細胞標記因子VIII、α6和β4整合素亞(ya) 基標記呈陰性。
基因特征:HTR-8/SVneo細胞係的基因組中包含與(yu) 滋養(yang) 層細胞功能相關(guan) 的基因,能夠在體(ti) 外模擬胎盤滋養(yang) 層細胞的生物學特性。這些基因的表達使得細胞在侵襲和遷移方麵表現出與(yu) 體(ti) 內(nei) 滋養(yang) 細胞相似的行為(wei) 。
HTR8-SVneo細胞具有致瘤性,但在軟瓊脂中的致瘤性測試結果表明,該細胞係不表現出顯著的致瘤性
注意:HTR8-SVneo細胞係已被證明含有上皮和間質樣細胞群。
HTR8-SVneo細胞參數表
細胞名稱 | HTR8-SVneo細胞(人絨毛膜滋養層細胞) |
別稱 | HTR-8/SVneo; HTR-8/SV-neo; HTR8/SVneo; HTR8svn |
來源 | 人類妊娠6至12周胎盤絨毛外植體 |
細胞形態 | 上皮細胞和間充質樣細胞群,貼壁生長 |
培養基 | RPMI 1640或1640培養基,含5%胎牛血清(FBS)+10% FBS,1%青黴素/鏈黴素(P/S) |
培養條件 | 37℃,5% CO₂ |
傳代比例 | 1:2至1:4 |
細胞密度 | 傳代時細胞融合度70%-80%時進行傳代 |
凍存方式 | 1mL凍存管包裝,幹冰運輸 |
檢測方法 | MTT法檢測細胞增殖,Transwell小室檢測細胞侵襲能力 |
抗原標記 | IGF-II、NDOG-5、PCNA、W6/32、整合素亞基(α1、α3、α5、αv、β1) |
陰性標記 | 噬菌體標記63/D3、內皮細胞標記因子VIII、α6和β4整合素亞基 |
細胞生長曲線 | 通過MTT法在24、48、72小時後檢測細胞增殖情況 |
細胞侵襲實驗 | 使用Transwell小室,Matrigel基質膠處理 |
用途 | 研究滋養層和胎盤生物學,妊娠相關疾病的機製研究 |
致瘤性 | 是;否(在軟瓊脂和裸小鼠中測試未顯示出腫瘤形成能力) |
培養教程
HTR8-SVneo人絨毛膜滋養層細胞培養教程
傳代方法
當HTR8-SVneo細胞的融合度達到70%-80%時,應進行傳(chuan) 代,以防止細胞過度融合。傳(chuan) 代步驟如下:
棄去培養(yang) HTR8-SVneo細胞的舊培養(yang) 基,使用PBS緩衝(chong) 液洗滌兩(liang) 次。
加入0.25%胰酶-EDTA溶液消化HTR8-SVneo細胞,37℃孵育2-3分鍾。
當HTR8-SVneo細胞開始脫落時,加入含有血清的培養(yang) 基終止消化,並輕柔吹打形成單細胞懸液。
將HTR8-SVneo細胞按1:2至1:4的比例接種到新的培養(yang) 瓶中繼續培養(yang) 。
凍存方法
為(wei) 了長期保存HTR8-SVneo細胞,建議按照以下步驟進行凍存:
在HTR8-SVneo細胞處於(yu) 對數生長期時,收集細胞並用PBS洗滌兩(liang) 次。
將HTR8-SVneo細胞重懸於(yu) 含90% FBS和10% DMSO的凍存液中,細胞密度調整為(wei) 1×10^6至1×10^7 cells/mL。
將HTR8-SVneo細胞懸液分裝到凍存管中,並放置於(yu) -80℃冰箱中過夜。
次日將HTR8-SVneo細胞凍存管轉移至液氮罐中長期保存。
複蘇方法
HTR8-SVneo細胞複蘇時需要快速且謹慎,以減少細胞損傷(shang) :
從(cong) 液氮中取出HTR8-SVneo細胞凍存管,立即在37℃水浴中快速複蘇。
將HTR8-SVneo細胞懸液轉移至含培養(yang) 基的離心管中,緩慢加入培養(yang) 基以稀釋DMSO。
以1000 rpm離心5分鍾,棄去上清後,加入預溫的完全培養(yang) 基重懸HTR8-SVneo細胞。
將複蘇後的HTR8-SVneo細胞接種到培養(yang) 瓶中,置於(yu) 37℃的培養(yang) 箱中培養(yang) 。
注意事項
在HTR8-SVneo細胞的培養(yang) 過程中,應注意以下事項:
定期檢查HTR8-SVneo細胞是否存在細菌、酵母或支原體(ti) 的汙染。
在消化和傳(chuan) 代HTR8-SVneo細胞時,應避免過度消化和機械損傷(shang) ,以防止細胞受損。
凍存前確保HTR8-SVneo細胞處於(yu) 對數生長期,且細胞密度適中,以保證複蘇後HTR8-SVneo細胞的活性。
相關資料
STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 12 |
D1S1656 | 16,17.3 |
D2S441 | 11 |
D2S1338 | 23,24 |
D3S1358 | 16 |
D5S818 | 12 |
D7S820 | 12 |
D8S1179 | 13,15 |
D10S1248 | 16 |
D12S391 | 19 |
D13S317 | 9,12 |
D16S539 | 13 |
D18S51 | 13 |
D19S433 | 14,15 |
D21S11 | 29,30 |
D22S1045 | 15 |
FGA | 21,23 |
Penta D | 9,12 |
Penta E | 7,13 |
SE33 | 25.2,27.2 |
TH01 | 6,9.3 |
TPOX | 8 |
vWA | 13,18 (ATCC=CRL-3271) |
18 (PubMed=33810901) |
參考文獻
上一篇:nccit細胞(人畸胎癌細胞)
下一篇:沒有了