
nccit細胞(人畸胎癌細胞)
- 來源:多能性胚胎癌;畸胎癌
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:生長培養(yang) 基:RPMI-1640+10% FBS+1%P/S
- 其他:表達特征:蛋白表達:角蛋白(Keratin)陰性、波形蛋白(Vimentin)陽性、胎盤堿性磷酸酶(Placental alkaline phosphatase)陽性。
NCCIT人畸胎癌細胞係於(yu) 1985年從(cong) 一名患有多能性胚胎癌的亞(ya) 洲成年男性患者的縱隔中分離出來,具有上皮形態。
NCCIT細胞係曾受到支原體(ti) 汙染,但在提交到ATCC細胞庫前已進行了清除。NCCIT細胞主要以貼壁方式生長,而非懸浮或半貼壁。它們(men) 表現出上皮細胞樣的形態。
nccit細胞特性、分子特性、基因特性等
nccit細胞是一種多能性幹細胞,具有分化成多種細胞類型的能力。
nccit細胞細胞可以分化成體(ti) 細胞和胚外組織,顯示出廣泛的分化潛力。
表達特征:蛋白表達:角蛋白(Keratin)陰性、波形蛋白(Vimentin)陽性、胎盤堿性磷酸酶(Placental alkaline phosphatase)陽性。
未分化的NCCIT細胞在特征上介於(yu) 精原細胞癌和胚胎癌之間。
在維甲酸(視黃酸)作用下,NCCIT細胞表現出明顯的分化反應。
由於(yu) 源自畸胎癌,nccit細胞可能表達某些與(yu) 腫瘤發生和進展相關(guan) 的基因。
nccit細胞是致瘤的,在皮下接種107個(ge) 細胞的裸鼠中,腫瘤在21天內(nei) 以100%的頻率(5/5)發展。
nccit細胞參數表
細胞名稱 | nccit細胞(人畸胎癌細胞) |
細胞 別稱 | NCCIT / NCC-IT |
組織來源 | 人 (Homo sapiens) 畸胎癌細胞;縱隔混合型生殖細胞腫瘤 |
細胞類型 | 多能性胚胎癌細胞 |
建立背景 | 1985年 / Shinichi Teshima / 日本東京國立癌症研究所 |
原始患者信息 | 亞洲成年男性 |
形態學特征 | 上皮細胞樣 / 貼壁生長 |
培養基 | RPMI-1640 / 10% 胎牛血清 / 1% (如慶大黴素-兩性黴素B混合溶液) |
培養環境 | 培養溫度37℃ / CO₂ 5% / 空氣 95% |
分子標記 | 角蛋白:陰性 / 波形蛋白:陽性 / 胎盤堿性磷酸酶:陽性 |
分化潛能 | 可分化為體細胞和胚外組織 |
維甲酸反應 | 表現出分化 |
致瘤性 | 具有 |
主要用途 | 癌症研究、幹細胞研究、藥物篩選 |
安全等級 | BSL1(生物安全一級) |
潛在危害 | 低風險,遵循標準預防措施 |
支原體檢測 | 陰性(曾受汙染,已淨化) |
細胞庫來源 / 提供規格 | ATCC(推測)/ 1×10⁶cells/T25培養瓶 或 5×10⁵cells/凍存管 |
特殊處理要求 | 僅限科研用途,不得用於其他目的 |
培養教程
nccit人畸胎癌細胞培養教程
NCCIT細胞複蘇步驟
將凍存的NCCIT細胞從(cong) 液氮中取出,迅速置於(yu) 37℃水浴中融化。
融化後,將NCCIT細胞懸液轉移到含有預熱培養(yang) 基的離心管中。
低速離心(約1000rpm)5分鍾,棄去上清。
用預熱的完全培養(yang) 基重懸NCCIT細胞,轉移到培養(yang) 瓶中。
NCCIT細胞常規培養
NCCIT細胞以貼壁方式生長,呈上皮細胞樣形態。
每2-3天更換一次培養(yang) 基,或當培養(yang) 基顏色變黃時更換。
保持NCCIT細胞在對數生長期,避免過度生長。
NCCIT細胞傳代步驟
當NCCIT細胞融合度達到80%左右時進行傳(chuan) 代。
用PBS輕輕洗滌NCCIT細胞層1-2次。
加入適量胰蛋白酶-EDTA溶液,37℃孵育2-3分鍾。
輕輕拍打培養(yang) 瓶,使NCCIT細胞脫落。
加入含血清的完全培養(yang) 基終止消化。
離心收集NCCIT細胞,按1:3或1:4的比例接種到新的培養(yang) 瓶中。
NCCIT細胞凍存步驟
收集對數生長期的NCCIT細胞。
製備凍存液(90%培養(yang) 基 + 10% DMSO)。
調整NCCIT細胞濃度至1-5×10^6 cells/ml。
將NCCIT細胞懸液分裝到凍存管中。
使用程序降溫儀(yi) 或梯度降溫盒逐步降溫。
最終將NCCIT細胞轉移到液氮中長期保存。
NCCIT細胞培養注意事項
操作前,培養(yang) 基和PBS應在37℃預熱1-2小時。
嚴(yan) 格無菌操作,定期檢查是否有汙染。
避免NCCIT細胞過度生長或密度過低。
定期進行NCCIT細胞特性鑒定,如STR分析,以確保細胞係的真實性。
NCCIT細胞僅(jin) 限於(yu) 科研用途,不得用於(yu) 其他目的。
NCCIT細胞培養基更換周期
通常每2-3天更換一次培養(yang) 基。
如果NCCIT細胞生長較快,可能需要更頻繁地更換培養(yang) 基。
NCCIT細胞觀察要點
定期使用顯微鏡觀察NCCIT細胞形態和生長狀態。
關(guan) 注NCCIT細胞貼壁情況、生長密度和培養(yang) 基顏色變化。
NCCIT細胞在不同培養條件下的表現
標準條件:在37℃、5% CO₂和95%空氣濃度下,NCCIT細胞表現出良好的生長狀態,貼壁生長,呈上皮細胞樣形態。
低血清條件:在低血清條件下,NCCIT細胞可能生長緩慢,分化狀態可能發生變化。
高密度條件:在高密度條件下,NCCIT細胞可能出現過度融合,影響細胞的正常生長和功能。
不同pH值:pH值的變化可能影響NCCIT細胞的代謝和生長狀態,建議保持在7.2-7.4之間。
NCCIT細胞培養時間
傳(chuan) 代周期:通常每2-3天更換一次培養(yang) 基,或當培養(yang) 基顏色變黃時更換。當NCCIT細胞融合度達到80%左右時進行傳(chuan) 代。
實驗周期:根據具體(ti) 實驗需求,培養(yang) 時間可能從(cong) 幾天到幾周不等。例如,藥物篩選實驗可能需要幾天,而分化實驗可能需要更長時間。
相關資料
STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10,12 |
D3S1358 | 16 |
D5S818 | 10,13 |
D7S820 | 10 |
D8S1179 | 10,15 |
D13S317 | 11 |
D16S539 | 9,12 |
D18S51 | 13,14 |
D21S11 | 29,32.2 |
FGA | 22,26 |
Penta D | 10,12 |
Penta E | 5,14 |
TH01 | 7,9 |
TPOX | 8 |
vWA | 14,18 |