
95-D細胞源自一名65歲中國男性肺巨細胞癌患者的腹水轉移病灶細胞。與(yu) CVCL_WW01 (PLA-801A)、CVCL_7109 (PLA-801C)、CVCL_WW02 (PLA-801E)同屬於(yu) 母係CVCL_7108 (PLA-801)衍生。95-D細胞為(wei) 人肺巨細胞癌高轉移株,具有高表達的端粒酶活性。95-D細胞被廣泛應用於(yu) 肺癌的基礎和臨(lin) 床研究。
95-D細胞特性
來自65歲中國男性肺巨細胞癌患者的腹水轉移病灶細胞。
與(yu) CVCL_WW01 (PLA-801A)、CVCL_7109 (PLA-801C)、CVCL_WW02 (PLA-801E)都是來自母係CVCL_7108 (PLA-801)衍生。
是人肺巨細胞癌高轉移株。
具有高表達的端粒酶活性。
用於(yu) 肺癌的基礎和臨(lin) 床研究。
95-D細胞參數表
細胞名稱 | 95-d細胞(人高轉移肺癌細胞係) |
細胞別稱 | 95d;PLA801D; PLA801-95D; 95D; 95-D; 801-D |
細胞衍生 | 衍生自CVCL_7108 (PLA-801),與CVCL_WW01 (PLA-801A)、CVCL_7109 (PLA-801C)、CVCL_WW02 (PLA-801E)相同 |
種屬 | 人 |
組織來源 | 來自65歲中國男性肺巨細胞癌患者的腹水轉移病灶細胞 |
腫瘤類型 | 肺巨細胞癌 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
生長特性 | 貼壁生長 |
特征特性 | 高轉移性;高表達的端粒酶活性 |
使用領域 | 用於肺癌的基礎和臨床研究 |
生物安全等級 | BSL-1 |
培養基 | RPMI-1640+10% FBS+1% P/S 或 RPMI-1640+10% FBS |
凍存液 | 55%基礎培養基+40%FBS+5%DMSO 或 90%FBS+10%DMSO;液氮 |
培養條件 | 氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ |
推薦傳代比例 | 1:2至1:6,每周2次 |
推薦換液頻率 | 2-3次/周 |
puro藥篩濃度 | 1.0ug/ml,培養過程中建議使用0.5ug/ml |
細胞代數 | 10代以內 |
細胞簡介 | 95-D細胞是來自一名65歲中國男性肺巨細胞癌患者的腹水轉移病灶細胞,為人肺巨細胞癌高轉移株,可用於肺癌的基礎和臨床研究。 |
質量控製 | 澄清度:澄清;PH:7.3±0.2;內毒素含量:≤10 EU/mL;無菌檢測:細菌陰性,真菌陰性,支原體陰性;細胞形態:正常。 |
應用 | 僅供科研使用 |
培養教程
95-d人高轉移肺癌細胞係培養
細胞解凍
從(cong) 液氮中取出含95-D細胞的凍存管,迅速在37°C水浴中搖晃解凍。
解凍後將細胞懸液加入4-6mL完全培養(yang) 基中,離心去除上清液,重懸95-D細胞。
加入6-8mL完全培養(yang) 基的培養(yang) 瓶中,37°C培養(yang) 過夜。
細胞傳代操作
棄去培養(yang) 上清,用PBS潤洗細胞1-2次。
加入0.25%胰酶-0.53mM EDTA消化1-2分鍾,觀察細胞消化情況。
細胞大部分變圓並脫落後,加入含10%FBS的培養(yang) 基終止消化。
離心去除上清,補充新的培養(yang) 基,按1:2的比例分到新培養(yang) 瓶中。
傳(chuan) 代比例:1:2至1:6,每周2次。
建議95-D細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代。
細胞凍存
凍存液: 90%完全培養(yang) 基 + 10% DMSO
凍存條件: 4°C 10分鍾,-20°C 2小時,過夜-80°C,後轉液氮保存。
注意事項
所有操作需在二級生物安全櫃內(nei) 進行,使用防護手套、衣服和麵罩。
解凍後的95-D細胞應盡快傳(chuan) 代或凍存,不可超過3代。
細胞傳(chuan) 代過程中應注意細胞消化程度,避免消化過度導致細胞損傷(shang) 。
細胞存活率較低時,可嚐試調整培養(yang) 條件或傳(chuan) 代比例以提高存活率。
接收到95-D細胞後,應及時確認細胞狀態並拍照留存,以備後續參考。
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參考文獻
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