calu-1細胞（人肺癌細胞）

Calu-1人肺癌細胞是一種表現出上皮形態的細胞係，從(cong) 一名47歲的患有表皮樣癌的白人男性患者的肺中分離。Calu-1細胞主要用於(yu) 癌症研究、毒理學。

Calu-1細胞染色體(ti) 數目為(wei) 亞(ya) 三倍體(ti) ，模態染色體(ti) 數目為(wei) 62，存在7個(ge) 頻繁出現的標記物，包括M1（每個(ge) 細胞兩(liang) 個(ge) 拷貝），M6和M7在大多數細胞中發現；M2和M3、M4和M5分別互斥存在，即每個(ge) 細胞中僅(jin) 有M2或M3中的一個(ge) 以及M4或M5中的一個(ge) 。

Calu-1細胞係來源於(yu) 男性，但通過QM帶檢查未檢測到Y染色體(ti) 。
Calu-1細胞具有致瘤性，在裸鼠身上形成表皮樣癌，在類固醇治療的倉(cang) 鼠中形成轉移。
Calu-1細胞表現出血型A和Rh+抗原表達，並具有HLA A10、A11、B15、Bw35的抗原譜。同工酶分析顯示其具有AK-1，1；ES-D，1；G6PD，B；GLO-I，1-2；Me-2，1-2；PGM1, 1-2；PGM3，1的同工酶譜。

Calu-1細胞具有眾(zhong) 多微絨毛、顯著的粗麵內(nei) 質網（RER）、溶酶體(ti) 和脂包含體(ti) ，且不含有病毒顆粒。Calu-1細胞含有ras（H-ras和K-ras）癌基因。

calu-1細胞特性

• Calu-1細胞源自一名47歲白人男性患者的肺鱗癌胸腔積液轉移病灶。
  

• 上皮形態：表現出上皮細胞樣的形態。
  

• 超微結構特征：包括大量微絨毛、突出的粗麵內(nei) 質網 (RER)、溶酶體(ti) 、脂質內(nei) 含物，無病毒顆粒。

• 分子特征：含有ras（H-ras）癌基因。

• 生物學特性：級性：亞(ya) 三倍體(ti) ，模態染色體(ti) 數目為(wei) 62。

• 染色體(ti) 變異：2S組分出現率為(wei) 14.2%，7個(ge) 標記物頻繁出現。

• 致瘤性：在裸鼠中能夠形成表皮樣癌。
  

• 轉移性：在類固醇治療的倉(cang) 鼠中能形成轉移。

• 抗原表達：血型A；Rh+；HLA A10、A11、B15、Bw35。
  

calu-1細胞參數表

calu-1人肺癌細胞培養

傳代步驟

• 細胞密度：當Calu-1細胞密度達到80%-90%時即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。

• 棄去培養(yang) 上清：用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗Calu-1細胞1-2次。

• 消化細胞：加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu) 培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾，然後在顯微鏡下觀察Calu-1細胞消化情況。若Calu-1細胞大部分變圓並脫落，迅速取回操作台，輕敲幾下培養(yang) 瓶後加少量培養(yang) 基終止消化。

• 離心處理：按6-8ml/瓶補加培養(yang) 基，輕輕打勻後吸出，在1000RPM條件下離心4分鍾，棄去上清液，補加1-2mL培養(yang) 液後吹勻。

• 傳(chuan) 代：收到Calu-1細胞後首次傳(chuan) 代推薦將細胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養(yang) 基的新皿中或者瓶中，建議凍存一支備用，後續傳(chuan) 代根據實際情況按1:2到1:4的比例進行。

凍存步驟

• 準備細胞：Calu-1細胞凍存時，棄去培養(yang) 基後，用PBS清洗一遍後加入1ml胰酶，待Calu-1細胞變圓脫落後，加入1ml含血清的培養(yang) 基終止消化。可使用血球計數板計數。

• 離心處理：4分鍾1000rpm離心去掉上清。加1ml血清重懸Calu-1細胞，根據細胞數量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為(wei) 5%，細胞密度不低於(yu) 1x10^6/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液，注意凍存管做好標識。

• 凍存：將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，放入-80℃冰箱，至少2小時後轉入液氮罐儲(chu) 存。記錄凍存管位置以便下次取用。