ncih446細胞（人小細胞肺癌細胞）

NCI-H446細胞株是從(cong) 一位61歲白人男性小細胞肺癌患者的胸腔積液（胸水）中分離得到的人類腫瘤細胞係。
NCI-H446細胞的原始形態並不完全具有典型的小細胞肺癌特征，被認為(wei) 是小細胞肺癌的生化和形態學變種。

NCI-H446細胞係這是一種超三倍體(ti) 人類細胞係。模式染色體(ti) 數目為(wei) 74，發生率為(wei) 22%，多倍體(ti) 為(wei) 2.5%。大多數細胞共有超過25個(ge) 標記，包括inv（1）（p32q21）、der（1）t（1:4）（q42；q11）、i（5q）、t（2p13q）和der（19）t（7；HSR；19）（q11；HSR，p13.3）。結構正常的N1和N13缺失，正常的N4、N5和N10大多為(wei) 每個(ge) 細胞的單拷貝。每個(ge) 細胞有兩(liang) 對X/Y。

NCI-H446細胞具有以下特性和特征

• 分子特征：表達神經元特有的烯醇酶、表達腦型肌酸激酶同工酶、左旋多巴脫羧酶、蠶素、抗利尿激素、催產(chan) 素和胃泌激素釋放肽的表達未達到可檢測水平

• 基因特征：C-myc基因顯著擴增：DNA序列擴增約20倍；C-myc RNA表達：比正常細胞增加15倍；

• 生長特性：半貼壁半懸浮生長、形態類似上皮細胞；

• 致瘤性：在裸鼠中可形成移植性腫瘤，但腫瘤組織學特征與(yu) 典型小細胞肺癌不同

• 生化特性：被認為(wei) 是小細胞肺癌的生化和形態學變種

• 培養(yang) 特性：對培養(yang) 條件敏感，特別是對溫度和CO2濃度的變化；貼壁時間較長，處理後24小時內(nei) 盡量不要移動

• 形態特征：原始形態並不完全具有典型的小細胞肺癌特征

• 轉移特性：顯示胸腔積液轉移性

ncih446細胞參數表

ncih446人小細胞肺癌細胞培養教程

細胞複蘇

• 從(cong) 液氮中取出NCI-H446細胞的凍存管，迅速置於(yu) 37°C水浴中解凍。

• 解凍後，將NCI-H446細胞懸液轉移到預熱的完全培養(yang) 基中。

• 以1000 rpm離心5分鍾，棄上清。

• 用新鮮完全培養(yang) 基重懸NCI-H446細胞，轉移到T25培養(yang) 瓶中。

• 置於(yu) 37°C、5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) 。

細胞傳代

• 當NCI-H446細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代。

• 收集NCI-H446細胞的懸浮部分到離心管中，輕輕潤洗貼壁NCI-H446細胞1-2次。

• 使用0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA消化貼壁NCI-H446細胞（T25瓶用1-2 mL），37°C消化1-2分鍾。

• 加入3-4 mL含10% FBS的培養(yang) 基終止消化。

• 以1:2到1:9的比例分裝到新培養(yang) 瓶中。

特別注意事項

• NCI-H446細胞貼壁時間較長，處理後24小時內(nei) 盡量不要移動培養(yang) 瓶。

• NCI-H446細胞對溫度和CO2濃度變化敏感，條件不適宜可能導致細胞脫落或貼壁緩慢。

• 培養(yang) 基pH應保持在7.2-7.4。

細胞凍存

• 使用完全培養(yang) 基+5% DMSO作為(wei) NCI-H446細胞的凍存介質。

• 緩慢降溫後存放於(yu) 液氮中長期保存。

質量控製

• 定期進行NCI-H446細胞的支原體(ti) 檢測。

• 建議進行STR分析以確認NCI-H446細胞的身份。