
NCI-H23細胞係源自一名51歲的黑人男性非小細胞肺癌患者的肺部腺癌組織。NCI-H23細胞係在患者接受治療之前獲得,保留了原發性腫瘤的特征。
NCI-H23細胞特征、特性
NCI-H23細胞是一種人非小細胞肺癌細胞,具體(ti) 為(wei) 腺癌亞(ya) 型。
NCI-H23細胞貼壁生長,形態呈上皮細胞樣
基因表達涉及C-myc、L-myc、v-src、v-abl、v-erb B、c-raf 1、Ha-ras、Ki-ras和N-ras RNAs。
免疫組化特征包括角蛋白5、8、18的陽性表達,波形蛋白的陽性。
NCI-H23細胞攜帶K-ras基因的第12號密碼子突變,p53基因在246位密碼子處有突變(ATC→ATG)
蛋白表達:表達PDGF(血小板衍生生長因子)A鏈和B鏈的mRNA、表達TGFα(轉化生長因子α)、TGFβ和EGFR(表皮生長因子受體(ti) )
NCI-H23細胞在軟瓊脂中形成克隆的效率約為(wei) 9.7%
左旋多巴脫氫酶(L-dopa decarboxylase)呈陰性、神經絲(si) 蛋白呈陰性
NCI-H23細胞參數表
細胞名稱 | NCI-H23細胞(人非小細胞肺癌細胞) |
細胞別名 | NCI-H23 / H23 / CRL-5800 |
細胞類型 | 人非小細胞肺癌細胞(腺癌) |
來源/組織 | 51歲黑人男性肺癌患者,肺部腫瘤組織(治療前) |
ATCC編號 | CRL-5800 |
建立年份 | 約1980年代 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
生長特性 | 貼壁生長 |
培養基/血清/抗生素 | RPMI 1640 / 10% FBS / 1% 青黴素-鏈黴素 |
培養環境 | 37℃ / 5% CO2 / 飽和濕度 |
傳代比例 | 1:2 至 1:3 |
傳代頻率 | 約每周3次 |
換液周期 | 3-4天 |
細胞密度 | 保持在70-80%匯合度 |
細胞消化 | 0.25% 胰蛋白酶-EDTA,37℃ 5分鍾 |
物種 | 人(Homo sapiens) |
基因突變 | K-ras(第12密碼子), p53(246位密碼子,ATC→ATG) |
軟瓊脂克隆效率 | 9.70% |
群體倍增時間 | 約30-40小時(需驗證) |
致瘤性 | 在免疫缺陷小鼠中可形成腫瘤 |
研究用途 | 藥物篩選、信號通路研究、基因功能研究、腫瘤微環境研究 |
溫度/凍存介質 | -80℃(短期)或液氮(長期)/ 90%完全培養基+10% DMSO |
生物安全等級 | BSL-1 |
培養教程
NCI-H23人非小細胞肺癌細胞培養教程
NCI-H23細胞複蘇
將凍存細胞從(cong) 液氮中快速取出,放置於(yu) 37℃水浴中解凍。
解凍後立即將細胞懸液轉移至含有15mL預熱完全培養(yang) 基的50mL離心管中。
以800rpm離心5分鍾,棄去上清液。
加入5mL新鮮完全培養(yang) 基重懸細胞。
將細胞懸液轉移至25cm²培養(yang) 瓶中,置於(yu) 37℃、5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) 。
NCI-H23細胞日常培養
培養(yang) 溫度:37℃,CO2濃度:5%,濕度:飽和濕度。
每3-4天更換一次培養(yang) 基,保持細胞密度在70-80%的匯合度。
NCI-H23細胞傳代
當細胞密度達到80-90%時進行傳(chuan) 代。
棄去舊培養(yang) 基,用PBS輕輕清洗細胞1-2次。
加入適量0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,37℃孵育5分鍾。
在顯微鏡下觀察細胞脫落情況。
加入等體(ti) 積完全培養(yang) 基終止消化,以800rpm離心5分鍾。
棄去上清,用新鮮完全培養(yang) 基重懸細胞。
按1:2或1:3的比例將細胞接種到新的培養(yang) 瓶中。
NCI-H23細胞凍存
準備凍存液:90%完全培養(yang) 基 + 10% DMSO。
收集對數生長期的細胞,以800rpm離心5分鍾。
用預冷的凍存液重懸細胞,調整密度至1-2×10⁶/mL。
將細胞懸液分裝到凍存管中,每管1mL。
將凍存管置於(yu) -80℃冰箱中,24小時後轉移到液氮中長期保存。
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STR鑒定及相關
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D3S1358 | 15 |
D5S818 | 12 (PubMed=25877200) |
12,13 (AddexBio=C0016005/4861; ATCC=CRL-5800; Cosmic-CLP=905942; KCLB=90023; PubMed=19372543) | |
D7S820 | 9,10 |
D8S1179 | 15 |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 9,11 (Cosmic-CLP=905942; PubMed=19372543; PubMed=25877200) |
11 (AddexBio=C0016005/4861; ATCC=CRL-5800) | |
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Penta E | 7,17 |
TH01 | 6 |
TPOX | 8,9 |
vWA | 16,17 |
