小鼠胎盤間充質幹細胞（kaiyun网站安全）

小鼠胎盤間充質幹細胞（mPMSCs）主要分離自胎盤組織，胎盤是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜與(yu) 母體(ti) 子宮內(nei) 膜共同形成的臨(lin) 時器官。胎盤由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構成，其主要功能是通過母體(ti) 為(wei) 胎兒(er) 提供營養(yang) 和進行物質交換，同時隔離母子血液循環係統，確保胎兒(er) 的獨立性。胎盤也是重要的內(nei) 分泌器官，能夠分泌多種維持妊娠的激素。

胎盤間充質幹細胞（mesenchymal stem cells, MSCs）是一種多潛能幹細胞，具有自我更新和多向分化的能力。其在胚胎發育中起源於(yu) 中胚層，並在組織損傷(shang) 修複過程中，響應損傷(shang) 信號遷移到受損部位，進行局部增殖和分化以參與(yu) 組織再生。胎盤間充質幹細胞的分離和擴增相對簡單，具備高效的體(ti) 外增殖能力，並能夠保持多能性，是應用廣泛的組織修複種子細胞。

小鼠胎盤間充質幹細胞特性特征

• 胎盤間充質幹細胞是一種多能幹細胞，能夠在適當條件下分化為(wei) 多種功能性細胞，如成骨細胞、成脂肪細胞和軟骨細胞等。

• 自我複製能力:具有良好的自我複製能力，可以在體(ti) 外進行多代傳(chuan) 代而不喪(sang) 失幹細胞特性。

• 高增殖能力:胎盤間充質幹細胞的體(ti) 外倍增能力強，能夠在短時間內(nei) 大量擴增，通常可以在傳(chuan) 代過程中保持活力和功能。

• 相較於(yu) 其他來源的幹細胞，胎盤間充質幹細胞的獲取更為(wei) 方便，且細胞數量豐(feng) 富，易於(yu) 分離、培養(yang) 和純化。
  

• 免疫調節特性:小鼠胎盤間充質幹細胞展現出顯著的免疫調節能力，能夠抑製T細胞和B細胞的活性，對自身免疫性疾病和炎症反應具有潛在的治療作用。

• 小鼠胎盤間充質幹細胞通常表達一係列特定的表麵標誌物，如CD29、CD44等，而不表達造血幹細胞標誌物如CD45。

• 基因表達: 在分化過程中，小鼠胎盤間充質幹細胞會(hui) 激活與(yu) 多向分化相關(guan) 的基因，如Oct4、Sox2、Nanog等，這些基因在維持幹細胞特性和促進分化過程中起重要作用。

• 信號通路:小鼠胎盤間充質幹細胞在響應組織損傷(shang) 時，會(hui) 通過不同的信號通路（如Wnt、Notch、TGF-β等）調節其遷移和分化。

小鼠胎盤間充質幹細胞參數表

原代小鼠胎盤間充質幹細胞（mPMSCs細胞）培養教程

複蘇步驟

• 解凍細胞：從(cong) 液氮罐中迅速取出凍存的mPMSCs細胞凍存管，立即放入37°C水浴中，輕輕搖動，使細胞在1-2分鍾內(nei) 完全融化。

• 稀釋並離心：解凍後的mPMSCs細胞懸液轉移至含5 mL完全培養(yang) 基的離心管中，輕輕混勻，隨後以300 g離心5分鍾，去除DMSO上清液。

• 重懸與(yu) 接種：用適量新鮮培養(yang) 基重懸mPMSCs細胞，並將細胞懸液接種到培養(yang) 皿或培養(yang) 瓶中，確保細胞濃度約為(wei) 1×10⁶/mL。

• 培養(yang) 與(yu) 觀察：將接種後的mPMSCs細胞置於(yu) 37°C、5% CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) 。24小時後更換培養(yang) 基，去除非貼壁細胞，同時觀察mPMSCs細胞的貼壁和生長狀態。

傳代步驟

• 細胞狀態評估：當mPMSCs細胞生長至80%-90%匯合時，可以進行傳(chuan) 代。

• PBS洗滌：用PBS溶液輕輕洗滌mPMSCs細胞兩(liang) 次，去除殘留的培養(yang) 基和代謝廢物。

• 胰酶消化：加入適量0.25%胰酶-EDTA溶液，覆蓋mPMSCs細胞層，置於(yu) 37°C孵育5-10分鍾，觀察細胞脫落情況。

• 終止消化並離心：加入兩(liang) 倍體(ti) 積完全培養(yang) 基終止胰酶消化，收集mPMSCs細胞懸液，300 g離心5分鍾，去除上清。

• 重懸與(yu) 接種：用新鮮培養(yang) 基重懸mPMSCs細胞，根據實驗需求按1:2或1:3的比例接種到新的培養(yang) 瓶中。

• 培養(yang) 維護：將培養(yang) 瓶放入培養(yang) 箱中，繼續培養(yang) mPMSCs細胞，定期更換培養(yang) 基（通常每2-3天一次），保持良好生長狀態。

凍存步驟

• 細胞收集與(yu) 處理：選擇生長狀態良好的mPMSCs細胞，進行PBS洗滌後，用完全培養(yang) 基重懸細胞，並以300 g離心5分鍾。

• 製備凍存液：將mPMSCs細胞重懸於(yu) 凍存液中，使細胞密度達到1×10⁶/mL。

• 分裝與(yu) 冷凍：將mPMSCs細胞懸液分裝至凍存管（每管1 mL），使用程序降溫設備或含異丙醇的冷凍盒，在-80°C環境中冷凍過夜，確保降溫速率為(wei) 每分鍾約1°C。

• 長期保存：第二天將凍存的mPMSCs細胞轉移至液氮罐中保存，以確保細胞活性和長期使用。

注意事項

• 在mPMSCs細胞培養(yang) 、複蘇和凍存的全過程中應保持嚴(yan) 格的無菌操作，防止汙染。

• 凍存mPMSCs細胞前，需確保細胞處於(yu) 最佳生長狀態，避免高傳(chuan) 代數細胞的凍存。

• DMSO對mPMSCs細胞有一定毒性，需盡量縮短暴露時間。

• 定期觀察mPMSCs細胞的形態和增殖情況，確保其在實驗中的一致性和可重複性。