
U-CH1細胞(人骶骨脊索瘤細胞) (暫不提供)
- 來源:脊索瘤患者的骶骨
- 細胞特征:可變液泡(長梭形 不規則形狀)貼壁生長,間充質樣
- 培養(yang) 基:IMDM + RPMI-1640 (4:1) + FBS 10% + 1 % L-穀氨酰胺 + P/S 1%
- 其他:U-Ch1細胞過度表達轉錄因子T(Brachyury)
U-Ch1細胞係是由一名56歲白人男性脊索瘤患者的骶骨組織於(yu) 1998年分離,患者在初次手術後4年接受放療,並出現了局部複發。U-Ch1細胞係代表了脊索瘤的生物學特性,展現出典型的間充質樣形態和異質性特征,細胞通常呈長梭形或不規則形狀,並以貼壁方式生長,具有可變的液泡。脊索瘤是一種罕見且生長緩慢的腫瘤,U-Ch1細胞係的建立為(wei) 研究其生物學特性及潛在治療方法提供了重要的實驗平台。
U-CH1細胞特性特征
轉錄因子表達:U-Ch1細胞過度表達轉錄因子T(Brachyury),這是脊索瘤最特異的分子標誌物。Brachyury在脊索瘤的發生和發展中起著重要作用。
U-CH1具有由漿細胞和粘液性細胞間質組成的異質形態
基因特征:U-Ch1細胞係的基因組可能包含與(yu) 脊索瘤相關(guan) 的特定突變或表達模式
U-CH1細胞參數表
細胞名稱 | U-CH1細胞(人骶骨脊索瘤細胞) |
別稱 | UCH-1; UCH1 |
來源 | 56歲白人男性脊索瘤患者的骶骨 |
細胞類型 | 間充質樣細胞 |
細胞規格 | 1×10^6 cells/T25培養瓶或1mL凍存管 |
細胞代數 | 10代以內 |
支原體檢測 | 無 |
培養基 | IMDM與RPMI-1640(4:1) + 10% FBS + 1% L-穀氨酰胺 + 1% P/S |
培養環境 | 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ |
培養頻率 | 每周2-3次 |
倍增時間 | 超過一周 |
傳代比例 | 1:2至1:3 |
細胞形態 | 長梭形或不規則形狀,具有可變液泡 |
生長方式 | 貼壁生長 |
特異性標誌物 | 轉錄因子T(Brachyury) |
DNA含量 | 接近四倍體(約75-100個染色體) |
p53狀態 | 存在突變,C > G替換 |
凍存條件 | 90%胎牛血清 + 10%DMSO |
凍存液準備 | 使用新鮮配製的凍存液進行細胞凍存 |
培養箱濕度 | 70%-80% |
培養教程
U-CH1人骶骨脊索瘤細胞培養教程
收貨處理
檢查狀態:收到U-CH1細胞後,首先檢查培養(yang) 瓶是否完整,確認無破損、漏液或渾濁現象。如有異常情況,請及時聯係供應商。
消毒:使用75%酒精對U-CH1細胞的培養(yang) 瓶外壁進行消毒,並將其放置在37℃的培養(yang) 箱中靜置4小時,以確保安全。
觀察生長狀態:在顯微鏡下觀察U-CH1細胞的生長狀態,必要時拍照記錄,便於(yu) 後續分析。
初次培養
換液:當U-CH1細胞密度低於(yu) 80%時,應更換培養(yang) 基,並保持細胞瓶透氣(請勿重複使用舊培養(yang) 基)。
培養(yang) 條件:將U-CH1細胞置於(yu) 37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中,保持適宜的生長環境。
傳代步驟
傳(chuan) 代時機:當U-CH1細胞密度達到80%-90%時,進行傳(chuan) 代操作。
洗滌:棄去培養(yang) 上清,用無鈣、鎂的PBS洗滌U-CH1細胞1-2次,以去除殘餘(yu) 培養(yang) 基。
加入1 mL消化液(0.25%胰蛋白酶和0.53 mM EDTA),確保所有U-CH1細胞均被浸潤。
將培養(yang) 瓶放入37℃的培養(yang) 箱中消化約1-3分鍾,觀察細胞是否大部分變圓並脫落。
終止消化:加入適量的新鮮完全培養(yang) 基以終止消化,並輕輕吹打使U-CH1細胞從(cong) 瓶壁上脫落。
將U-CH1細胞懸液轉移至離心管中,以1000 rpm離心4分鍾,棄去上清液。
補加1-2 mL新鮮培養(yang) 基,輕輕吹勻細胞懸液。
分配到新瓶:將U-CH1細胞懸液以1:2的比例分配到新培養(yang) 皿或瓶中,添加8 mL培養(yang) 基,繼續置於(yu) 培養(yang) 箱中培養(yang) 。
凍存與複蘇
凍存步驟:使用無血清凍存液,將U-CH1細胞懸液分裝至凍存管中,迅速放入液氮中儲(chu) 存。
複蘇步驟:
將凍存管置於(yu) 37℃的水浴中來回晃動,迅速解凍(確保凍存管口在水麵之上)。
解凍後立即加入完全培養(yang) 基以中和凍存液。
相關資料
STR鑒定及相關
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 10,11 |
D1S1656 | 16,16.3 |
D2S441 | 12,14 |
D2S1338 | 17,18 |
D3S1358 | 15 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 9,12 |
D8S1179 | 10,15 |
D10S1248 | 15 |
D12S391 | 17,22 |
D13S317 | 11,13 |
D16S539 | 12,13 |
D18S51 | 15 |
D19S433 | 14 |
D21S11 | 28,29 |
D22S1045 | 16 |
FGA | 20,21 |
Penta D | 11 |
Penta E | 7,10 |
TH01 | 7 |
TPOX | 8,11 |
vWA | 17 |
參考文獻
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