
SKNO-1細胞係源自一名22歲急性髓係白血病(AML)男性患者的骨髓樣本,於(yu) 1990年建立。SKNO-1細胞具有t(8;21)染色體(ti) 易位,這一易位通常伴隨RUNX1-RUNX1T1(AML1-ETO)融合基因的表達,是研究AML病理機製的關(guan) 鍵模型之一。SKNO-1細胞係對粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)有依賴性,且其增殖周期為(wei) 48至72小時,表現出較強的增殖能力。形態上,SKNO-1細胞呈圓形或多形性,能夠在懸浮培養(yang) 條件下生長。是研究白血病細胞生物學行為(wei) 的理想工具,尤其是在化療後複發以及特定遺傳(chuan) 異常(如17號染色體(ti) 單體(ti) 缺失)背景下的研究中具有重要意義(yi) 。
SKNO1細胞特性特征
易位特征:SKNO-1具有t(8;21)染色體(ti) 易位,這種易位通常與(yu) 急性髓係白血病相關(guan) ,導致AML1-RUNX1T1(AML1-ETO)融合基因的表達。
基因重排:AML1基因位於(yu) 21號染色體(ti) 上,經過重排後在SKNO-1細胞中表達。
p53基因:SKNO-1細胞中檢測到p53基因的過表達和突變,這可能與(yu) 疾病進展有關(guan) 。
融合轉錄本:SKNO-1細胞中表達AML1-MTG8融合轉錄本,這進一步支持其作為(wei) AML模型的重要性。
培養(yang) 依賴性:SKNO-1細胞依賴於(yu) 粒細胞-巨噬細胞刺激因子(GM-CSF)進行生長,且生長和存活完全依賴於(yu) 該因子。
增殖能力:SKNO-1細胞在懸浮液中生長,增殖時間約為(wei) 48至72小時,表現出良好的增殖能力。
細胞形態:SKNO-1細胞呈現為(wei) 圓形至多形性,形態上類似於(yu) 成熟的髓母細胞。
SKNO-1細胞係被廣泛用於(yu) 研究急性髓係白血病的發病機製、藥物敏感性以及治療策略,為(wei) 科學家提供了重要的實驗模型
SKNO1細胞參數表
細胞名稱 | SKNO1細胞(人急性髓係白血病細胞) |
別稱 | Skno-1; SKNO1 |
種屬來源 | 人類 |
年齡/性別 | 22歲/男性 |
組織來源 | 骨髓 |
腫瘤類型 | 急性髓係白血病(AML M2) |
建立年份 | 1990年 |
生物安全等級 | BSL-1 |
細胞形態 | 圓形至多形性,淋巴細胞樣 |
生長特性 | 懸浮生長,單獨或成小簇聚集 |
生長培養基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 10 ng/ml GM-CSF + 1% P/S |
培養條件 | 37℃, 5% CO₂, 95%空氣 |
倍增時間 | 35-50小時 |
傳代比例 | 2.9-4.3 x 10^5 cells/mL |
換液頻次 | 每2-3天一次 |
最大密度 | ~2.5 x 10^6 cells/mL |
凍存液 | 55% 基礎培養基 + 40% FBS + 5% DMSO |
凍存條件 | 液氮保存 |
運輸方式 | 幹冰冷凍運輸或複蘇發貨 |
染色體特征 | t(8;21)易位,17號染色體單體缺失 |
融合基因 | AML1-RUNX1T1(AML1-ETO)融合基因表達 |
p53基因狀態 | 突變與過表達 |
無菌檢測 | 陰性(細菌、真菌、支原體) |
病原體檢查 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎均為陰性 |
應用領域 | 藥物測試、基因功能研究、動物模型研究 |
培養教程
SKNO1人急性髓係白血病細胞培養教程
複蘇SKNO1細胞
從(cong) 液氮取出SKNO1細胞凍存管後,立即將其放入37℃水浴中迅速解凍,過程中輕輕搖晃以確保均勻解凍。
解凍後,將SKNO1細胞懸液轉移至含有4 mL新鮮培養(yang) 基的無菌離心管中,輕輕混合。
在1000 rpm下離心3-4分鍾,去除上清液,保留SKNO1細胞沉澱。
使用1-2 mL新鮮培養(yang) 基重新懸浮SKNO1細胞,並將其轉移至含適量培養(yang) 基的培養(yang) 瓶中,置於(yu) 培養(yang) 箱中過夜培養(yang) 。
傳代SKNO1細胞
傳(chuan) 代條件:當SKNO1細胞密度達到**80%-90%**時,應進行傳(chuan) 代以保持細胞活力和良好的生長狀態。
棄去舊培養(yang) 液,用無菌的PBS緩衝(chong) 液輕輕清洗SKNO1細胞1-2次。
添加0.25%胰蛋白酶消化液,待SKNO1細胞回縮變圓後,加入完全培養(yang) 基終止消化反應。
將細胞懸液轉移至15 mL離心管,在1000 rpm下離心5分鍾。
棄去上清液,使用12 mL完全培養(yang) 基重新懸浮SKNO1細胞。
按照1:2或1:5的比例進行分瓶傳(chuan) 代,隨後將SKNO1細胞放入37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱繼續培養(yang) 。
凍存SKNO1細胞
選取生長狀態良好的SKNO1細胞,按傳(chuan) 代步驟處理。
消化並重懸後,加入凍存液(FBS:DMSO=9:1),使SKNO1細胞濃度達到理想凍存密度。
將SKNO1細胞懸液分裝到凍存管中,先放置在**-20℃冷凍1.5小時**,隨後移至**-80℃保存過夜**。最後,將SKNO1細胞轉移至液氮中進行長期保存。
注意事項
複蘇時檢查:收到SKNO1細胞後,首先檢查凍存管是否完好,觀察是否有漏液或渾濁。如有異常,及時聯係供應商。
消毒和檢測:複蘇前,使用75%酒精消毒SKNO1細胞瓶外表麵,並在顯微鏡下觀察細胞狀態。建議初次傳(chuan) 代前進行細胞狀態拍照記錄,以便後續參考和與(yu) 技術支持溝通。
懸浮細胞操作:對於(yu) 懸浮生長的SKNO1細胞,離心後需要用新鮮培養(yang) 基重懸。
培養(yang) 基穩定性:在傳(chuan) 代前幾天,建議使用相同成分的完全培養(yang) 基,以幫助SKNO1細胞適應新環境。
僅(jin) 供科研使用:SKNO1細胞僅(jin) 用於(yu) 科研用途,不得用於(yu) 臨(lin) 床診斷或治療。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 12,13 |
D2S1338 | 19 |
D3S1358 | 16 |
D5S818 | 10,13 |
D7S820 | 10,12 |
D8S1179 | 14,15 |
D13S317 | 8,11 |
D16S539 | 10,11 |
D18S51 | 13,14 |
D19S433 | 13,15 |
D21S11 | 29,30 |
FGA | 23 |
Penta D | 9 |
Penta E | 11,12 |
TH01 | 7 |
TPOX | 8,9 |
vWA | 14,17 |