Kasumi-6細胞（人急性髓細胞白血病細胞） （暫不提供）

Kasumi-6細胞係是於(yu) 1999年從(cong) 一名64歲亞(ya) 洲男性複發性急性髓係白血病（M2亞(ya) 型）患者的外周血中分離建立。Kasumi-6細胞係作為(wei) 非t(8;21)型急性髓係白血病的研究模型，尤其用於(yu) 探索突變型CCAAT/增強子結合蛋白α (C/EBPα)在白血病發生過程中的作用。

Kasumi-6細胞特性特征

• 基因特征：Kasumi-6細胞係存在8號和21號染色體(ti) 的轉位，導致AML1基因與(yu) ETO基因的融合，形成AML1-ETO融合基因。這一融合基因在急性髓係白血病的發展中起著關(guan) 鍵作用。

• 原始白血病細胞和Kasumi-6細胞均存在C/EBPα基因的半合子點突變。

• 抗原表達：Kasumi-6細胞表達CD33、CD13、CD11b、HLA-DR等標誌物，且CD3、CD14、CD19、CD41和CD34陰性。這些抗原的表達特征表明其髓係來源。

• 蛋白質表達：Kasumi-6細胞係表達C/EBPα蛋白，但缺乏C/EBPα結合活性，影響其正常的分化功能。

• 基因表達：髓過氧化物酶陰性；
  

• 生長因子反應：對多種生長因子（如IL-3、IL-6、G-CSF和GM-CSF）有響應，但對IL-1和IL-5沒有反應。

• TPA誘導：使用12-O-十四烷酰佛波醇-13-乙酸酯（TPA）可以誘導Kasumi-6細胞分化為(wei) 貼壁的單核細胞樣細胞。

• 細胞核型：核型為(wei) 45, XY, -9，加（12）（p11），加（13）（p111），顯示出其染色體(ti) 異常特征

Kasumi-6細胞參數表

Kasumi-6人急性髓細胞白血病細胞培養教程

細胞複蘇

• 從(cong) 液氮中取出凍存的Kasumi-6細胞管，立即放入37℃水浴中輕輕搖晃，快速解凍（約1-2分鍾）。
  

• 取出後用75%酒精消毒管壁，確保無菌操作。

• 將解凍的Kasumi-6細胞懸液移至離心管，加入5 mL預溫的完全培養(yang) 基。
  

• 在1000 RPM下離心5分鍾，棄去上清液。

• 用4-6 mL完全培養(yang) 基輕輕重懸Kasumi-6細胞。
  

• 將細胞懸液轉移至培養(yang) 瓶，置於(yu) 37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中培養(yang) 過夜。

細胞傳代

• 每天檢查Kasumi-6細胞的密度，當細胞密度達到80%-90%時，需要進行傳(chuan) 代。
  

• 懸浮細胞傳(chuan) 代：

1. 將Kasumi-6細胞懸液收集到離心管中，以1000 RPM離心8-10分鍾，棄去上清。

2. 加入1-2 mL新鮮培養(yang) 基，輕輕吹打使細胞均勻重懸。

3. 按1:2至1:5的比例將Kasumi-6細胞懸液分配至新培養(yang) 瓶中，補充至8 mL完全培養(yang) 基。

• 貼壁細胞傳(chuan) 代（如存在少量貼壁）：

1. 棄去培養(yang) 基，使用無鈣鎂PBS洗滌Kasumi-6細胞1-2次。

2. 加入1-2 mL胰蛋白酶-EDTA消化液，置於(yu) 37℃培養(yang) 箱消化1-2分鍾。

3. 當Kasumi-6細胞大部分變圓脫落時，立即加入5 mL含血清的完全培養(yang) 基終止消化。

4. 輕輕吹打細胞使其完全脫落，離心並重懸後傳(chuan) 代。

• 每2-3天進行一次培養(yang) 基更換，定期觀察Kasumi-6細胞的狀態。
  

細胞凍存

• 當Kasumi-6細胞生長至80%-90%密度時，棄去培養(yang) 基並用PBS洗滌一次。
  

• 加入0.25%胰蛋白酶消化液約1 mL至培養(yang) 瓶中，當Kasumi-6細胞開始變圓時，立即加入完全培養(yang) 基終止消化。
  

• 將細胞懸液轉移至離心管，1000 RPM離心5分鍾，棄去上清。

• 用含10% DMSO的完全培養(yang) 基重懸Kasumi-6細胞，確保均勻。
  

• 將重懸的Kasumi-6細胞分裝入凍存管中，置於(yu) -80℃冰箱中進行初步冷凍，隨後轉移至液氮中長期保存。