
小鼠牙周膜幹細胞(kaiyun网站安全)
- 來源:牙周膜組織
- 細胞特征:貼壁細胞 , 成纖維細胞樣
- 培養(yang) 基:kaiyun网站安全專(zhuan) 用培養(yang) 基
- 其他:在成骨誘導條件下,小鼠牙周膜幹細胞相關(guan) 基因(如堿性磷酸酶ALP、骨形態發生蛋白BMP等)的表達顯著上調
小鼠牙周膜幹細胞(Periodontal Ligament Stem Cells,PDLSCs)是從(cong) 牙周膜組織中分離得到的一類多能幹細胞。牙周膜是一種致密結締組織,位於(yu) 牙齒根部與(yu) 牙槽窩骨壁之間,其主要功能是連接牙齒和頜骨,維持牙齒穩定性。該組織內(nei) 包含成束排列的纖維,這些纖維的一端嵌入牙骨質,另一端附著在牙槽骨壁上。此外,牙周膜還富含血管、神經、淋巴管和上皮細胞,為(wei) 組織的修複和再生提供必要的支持。
牙周膜幹細胞具有自我更新及多向分化的能力,可分化為(wei) 成骨細胞、脂肪細胞、軟骨細胞和肌細胞等多種終末細胞類型。這些幹細胞來源於(yu) 中胚層間充質組織,與(yu) 間充質幹細胞(mesenchymal stem cells, MSCs)具有相似的特性,後者廣泛存在於(yu) 骨髓、脂肪組織、滑膜、骨骼肌、臍帶及臍帶血等組織中。利用MSC在軟骨損傷(shang) 修複中的潛能,相關(guan) 研究已取得顯著進展。牙周膜幹細胞在牙周組織的損傷(shang) 修複及再生過程中也發揮了重要作用,是研究牙周組織疾病及其治療的重要工具。
小鼠牙周膜幹細胞特性特征
小鼠牙周膜幹細胞具有良好的自我更新能力,並能夠向多種細胞類型分化,包括成骨細胞、脂肪細胞和軟骨細胞等。
小鼠牙周膜幹細胞具備良好的克隆形成能力,能夠在適宜條件下形成獨立的細胞集落。
小鼠牙周膜幹細胞表麵表達多種幹細胞標誌物,常見的包括:CD146:陽性表達率高達84.26%;STRO-1:陽性表達率約為(wei) 30.20%;其他標誌物如CD34和CD45的表達率較低。
小鼠牙周膜幹細胞在成骨誘導條件下,相關(guan) 基因(如骨形態發生蛋白BMP、堿性磷酸酶ALP等)的表達顯著上調。這些基因與(yu) 成骨分化密切相關(guan) ,表明PDLSCs在成骨過程中的潛力。
在超微結構觀察中,小鼠牙周膜幹細胞表現出豐(feng) 富的粗麵內(nei) 質網和線粒體(ti) ,顯示出其活躍的蛋白質合成能力,這與(yu) 其高增殖和分化潛能相一致
小鼠牙周膜幹細胞參數表
細胞名稱 | 小鼠原代牙周膜幹細胞(PDLSCs) |
英文名稱 | PDLSCs,Mouse Periodontal Ligament Stem Cells |
細胞來源 | 實驗動物的正常牙周膜組織 |
細胞形態 | 成纖維樣細胞,貼壁生長 |
純度 | ≥90% |
表麵標誌物 | CD146、STRO-1陽性 |
不含汙染 | 無HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌 |
自我更新能力 | 良好的自我更新能力 |
多向分化能力 | 可向成骨細胞、脂肪細胞等多種細胞類型分化 |
主要成分 | 由致密結締組織構成,含有神經、血管和淋巴等 |
培養基 | 小鼠原代牙周膜幹細胞專用培養基 |
培養條件 | 37℃,5% CO₂ |
換液頻率 | 每3天更換一次培養基 |
傳代條件 | 當細胞匯合度達到80%-90%時進行傳代 |
凍存液 | 90% 完全培養基 + 10% DMSO |
凍存條件 | -80℃冰箱逐步降溫後轉移至液氮儲存 |
澄清度 | 澄清 |
pH值 | 7.3 ± 0.2 |
內毒素含量 | ≤10 EU/mL |
無菌檢測 | 細菌:陰性;真菌:陰性;支原體:陰性 |
細胞生長試驗 | 細胞形態正常,生長實驗合格 |
操作環境 | 所有操作需在無菌條件下進行 |
觀察情況 | 定期檢查細胞狀態和生長情況,如發現汙染需及時處理 |
再生醫學 | 在牙周組織再生和修複中發揮重要作用。 |
疾病模型研究 | 可用於建立體外模型,以研究牙周疾病的機製。 |
組織工程 | 在組織工程和再生醫學領域展現出廣泛的應用潛力 |
注意事項 | 建議用多聚賴氨酸 PLL(0.1mg/ml)或明膠(0.1%)對接種培養皿包被處理 |
培養教程
原代小鼠牙周膜幹細胞培養教程
小鼠牙周膜幹細胞的傳代
當小鼠牙周膜幹細胞匯合度達到80%-90%時,進行傳(chuan) 代操作,以避免過度生長。
加入0.25%胰酶/EDTA溶液,37℃消化2-5分鍾,觀察細胞開始脫落。
用完全培養(yang) 基終止消化,並輕輕吹打使細胞均勻分散。
離心沉澱後,重懸細胞,並調整至合適密度。
將細胞接種於(yu) 新培養(yang) 板中,繼續培養(yang) 小鼠牙周膜幹細胞。
小鼠牙周膜幹細胞的凍存
使用90%完全培養(yang) 基和10% DMSO混合製備凍存液,保證細胞存活率。
將小鼠牙周膜幹細胞懸液分裝至凍存管,逐步降溫至-80℃,並轉移至液氮中長期保存。
複蘇
將凍存管置於(yu) 37℃水浴中解凍,同時輕輕搖晃加快速度。
解凍後,加入4 mL完全培養(yang) 基稀釋細胞,離心去除凍存液。
重懸細胞並接種於(yu) 培養(yang) 板中,繼續培養(yang) 小鼠牙周膜幹細胞。
注意事項
培養(yang) 和傳(chuan) 代過程中,確保操作環境無菌,避免汙染對小鼠牙周膜幹細胞的影響。
定期觀察細胞生長情況,確保小鼠牙周膜幹細胞的狀態符合實驗需求。
妥善處理廢棄物,確保實驗室安全。
相關資料
STR鑒定及相關
參考文獻
- 《中國臨床新醫學》 2021年02期
- 摘要:目的研究人牙周膜幹細胞(h PDLSCs)-條件培養液(CM)對MC3T3-E1細胞形態及...
- 《第十次全國牙周病學學術會議論文摘要匯編》 2014年
- 摘要:...pithelial cells,HGE)原代培養新的、簡單的方法,為進一步研究牙周組...
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