
小鼠牙周膜成纖維細胞(PDLFs細胞 kaiyun网站安全)
- 來源:牙周膜組織
- 細胞特征:貼壁細胞 , 成纖維細胞樣
- 培養(yang) 基:原代成纖維細胞專(zhuan) 用培養(yang) 基
- 其他:小鼠牙周膜成纖維細胞表達膠原合成相關(guan) 基因(如COL1A1、COL3A1),以及與(yu) 細胞增殖和分化相關(guan) 的生長因子受體(ti)
小鼠牙周膜成纖維細胞(Mouse Periodontal Ligament Fibroblasts, PDLFs)來源於(yu) 牙根與(yu) 牙槽骨之間的牙周膜組織。牙周膜是一種致密結締組織,主要功能是固定牙齒並緩衝(chong) 咀嚼壓力,其內(nei) 部含有大量膠原纖維束,一端嵌入牙骨質,另一端連接於(yu) 牙槽骨壁,確保牙齒的穩定性。
PDLFs通常通過酶消化法分離獲得,具體(ti) 步驟包括利用膠原酶和胰蛋白酶對牙周膜組織進行處理,分離出的細胞懸浮於(yu) 培養(yang) 基中,經過30分鍾貼壁後部分細胞伸出偽(wei) 足並逐漸鋪展為(wei) 梭形,6小時內(nei) 完成貼壁並開始均勻生長。細胞在體(ti) 外表現為(wei) 紡錘形或星形,胞體(ti) 較大,核呈橢圓形,核仁明顯,細胞質呈弱堿性,顯示出較強的蛋白質合成和分泌活性,通常在5-7天內(nei) 形成融合狀態,細胞排列緊密並可能交叉重疊。
PDLFs在牙周組織的維持、修複與(yu) 再生中發揮重要作用,能夠合成和降解膠原蛋白、基質及彈性纖維,同時具備吞噬異物的能力,廣泛參與(yu) 牙周病變的修複過程。目前,這些細胞已被廣泛用於(yu) 體(ti) 外模型的建立,為(wei) 研究牙周病的發病機製及治療策略提供了重要支撐。
小鼠牙周膜成纖維細胞特性特征
PDLFs細胞呈現成纖維樣形態,通常為(wei) 突起的紡錘形或星形,細胞核規則且呈卵圓形,核仁明顯。剛分離時,細胞呈圓形,隨後在培養(yang) 中逐漸貼壁並伸展成梭形。
PDLFs細胞主要負責膠原蛋白的合成與(yu) 吸收,參與(yu) 基質的形成與(yu) 更新。
小鼠牙周膜成纖維細胞具有吸收膠原和吞噬異物的能力,對牙周組織的病變、修複及再生過程發揮重要作用。
PDLFs細胞在免疫熒光染色中通常表現為(wei) 陽性標誌物,如波形蛋白(Vimentin)和纖維連接蛋白(Fibronectin)。
基因表達:PDLFs表達多種與(yu) 細胞增殖和分化相關(guan) 的基因,包括膠原合成相關(guan) 基因(如COL1A1和COL3A1),以及生長因子受體(ti) 等。
這些基因的表達對於(yu) 維持細胞的功能和促進牙周組織的修複至關(guan) 重要。細胞質特性:細胞質呈弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,這與(yu) 其合成膠原和其他基質成分的功能密切相關(guan)
小鼠牙周膜成纖維細胞(PDLFs細胞)參數表
細胞名稱 | 小鼠牙周膜成纖維細胞(PDLFs細胞 kaiyun网站安全) |
英文名稱 | Mouse Periodontal Ligament Fibroblast Cells |
細胞來源 | 小鼠牙周膜組織 |
細胞類型 | 成纖維細胞 |
細胞形態 | 成纖維樣,突起的紡錘形或星形,核呈卵圓形 |
細胞直徑 | 約10-20微米 |
細胞數目 | 每個培養瓶接種密度約2×10³個細胞/平方厘米 |
生物安全等級 | BSL-1 |
培養基 | 原代成纖維細胞專用培養基 |
培養溫度 | 37℃ |
CO₂濃度 | 5% |
培養瓶類型 | T-25或T-75培養瓶 |
傳代頻率 | 每當細胞融合度達到80%-90%時進行傳代 |
接種密度 | 每平方厘米約2×10³個細胞 |
生長方式 | 貼壁生長 |
傳代次數 | 可傳3代左右 |
標誌物表達 | Vimentin(陽性)、Fibronectin(陽性) |
純度 | 經鑒定可達90%以上,不含有HIV-1、HBV、HCV等病原體 |
基因表達 | 表達膠原合成相關基因(如COL1A1、COL3A1) |
消化酶 | 胰蛋白酶或膠原酶 |
離心速度 | 300g,5-10分鍾 |
貼壁時間 | 30分鍾後開始貼壁,6小時後基本貼壁完成 |
生長狀態 | 通常在5-7天內達到融合狀態 |
發貨規格 | 活細胞:T25培養瓶1瓶或1ml凍存管1支(約5 x 10^5 cells/vial) |
凍存條件 | -80℃可保存1個月;液氮罐長期保存 |
收到後處理 | 收到後請盡快解凍複蘇,如無法立即複蘇可在-80℃保存 |
注意事項 | 建議用多聚賴氨酸 PLL(0.1mg/ml)或明膠(0.1%)對接種培養皿包被處理 |
培養教程
原代小鼠牙周膜成纖維細胞(PDLFs細胞)培養教程
pdlfs細胞培養
將重懸後的pdlfs細胞以適量培養(yang) 基稀釋後接種至T-25培養(yang) 瓶,推薦接種密度為(wei) 2×10³ cells/cm²。
加入適量培養(yang) 基,確保細胞均勻分布,放置於(yu) 37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中。
初始pdlfs細胞呈圓形,約30分鍾開始貼壁,6小時後完成鋪展,逐漸呈梭形或星形。
每24小時更換一次培養(yang) 基,以去除懸浮的細胞和代謝廢物。
傳代操作
用PBS洗滌培養(yang) 瓶以去除殘餘(yu) 培養(yang) 基。
加入適量0.25%胰蛋白酶,37℃下孵育2-3分鍾,待細胞脫落後用含血清的培養(yang) 基中和。
當pdlfs細胞融合度達到80%-90%時,需進行傳(chuan) 代。
以300 g離心5分鍾後重懸細胞,按1:3~1:5的比例接種至新培養(yang) 瓶中,以維持pdlfs細胞的增殖活性。
注意事項
細胞培養(yang) 全過程需在生物安全櫃中完成,避免汙染,尤其是在pdlfs細胞的分離和擴增階段。
嚴(yan) 格控製培養(yang) 箱溫度為(wei) 37℃,CO₂濃度為(wei) 5%,並定期監測培養(yang) 基的pH值以保證pdlfs細胞的正常代謝。
每日觀察pdlfs細胞形態,貼壁細胞應呈梭形或星形分布,細胞核清晰。若發現汙染或異常,需及時更換培養(yang) 基或調整培養(yang) 條件。
所有廢棄物及器材需經高壓滅菌處理後丟(diu) 棄,避免生物汙染對pdlfs細胞實驗環境的影響。
相關資料
STR鑒定及相關
參考文獻
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