HUMSC細胞（原代人臍帶間充質幹細胞）

人臍帶間充質幹細胞（MSC）是一種具有多向分化潛能的幹細胞，來源於(yu) 健康足月分娩孕婦的臍帶。MSC細胞具有強大的增殖能力，可分化成骨細胞、脂肪細胞和軟骨細胞，在低血清條件下可維持生長。

臍帶是連接胎兒(er) 和胎盤的管狀結構，含有豐(feng) 富的幹細胞資源，其中的間充質幹細胞被提取自臍帶華通氏膠，具有低免疫原性、高純度且不含病原體(ti) 。MSC存在於(yu) 多種成體(ti) 組織中，具有促進造血幹細胞增殖與(yu) 分化、免疫調節、抗炎和組織修複等功能。

MSC細胞標誌物包括CD44、CD105、SH2和SH3，有助於(yu) 鑒定MSC。

HuMSC人臍帶間充質幹細胞特性

• 人臍帶間充質幹細胞（MSC）具有多向分化潛能，可分化成骨細胞、脂肪細胞和軟骨細胞，且具有強大的增殖能力。

• 臍帶間充質幹細胞取自健康足月分娩孕婦的臍帶，具有自我更新能力。

• MSC具有低免疫原性、高純度和無病原體(ti) 的特點。
  

• MSC可應用於(yu) 組織工程、細胞治療和基因治療，主要用於(yu) 風濕免疫疾病的治療。

• MSC存在於(yu) 多種成體(ti) 組織中，具有促進造血幹細胞增殖與(yu) 分化、免疫調節、抗炎和組織修複等作用。

• 細胞培養(yang) 條件對MSC的分化潛能和功能有重要影響，適宜的培養(yang) 條件可以促進其分化成不同細胞類型。

• MSC的標誌物包括CD44、CD105、SH2和SH3，這些標誌物有助於(yu) 鑒定MSC。

• MSC可在適宜的條件下分化成脂肪、骨和軟骨細胞，並在低血清條件下維持生長。

MSC人臍帶間充質幹細胞參數表

人臍帶間充質幹細胞(MSC)培養教程

實驗材料準備

• 試劑：完全培養(yang) 基、消化液、PBS、凍存液

• 耗材：50ml離心管、10ml移液管、1000ul槍頭、200ul槍頭、T25培養(yang) 瓶、眼科手術剪、鑷子

• 儀(yi) 器設備：離心機、超淨工作台、細胞計數儀(yi) 、電子移液器、手動移液器

細胞處理步驟

培養基及培養凍存條件準備

• 配製完全培養(yang) 基。

• 培養(yang) 條件: 氣相-空氣, 95%；二氧化碳, 5%。 溫度: 37攝氏度，濕度70%-80%。

• 凍存液，液氮儲(chu) 存。

細胞處理

• 複蘇細胞

• 在37℃水浴中迅速搖晃解凍含有1mL細胞懸液的凍存管。

• 加入4-9mL培養(yang) 基混合均勻後，在1000RPM條件下離心4分鍾，棄去上清液，補加培養(yang) 基後吹勻。

• 將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培養(yang) 過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yang) 基，培養(yang) 過夜）。

  
  

• 細胞傳(chuan) 代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。

• 細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。

細胞分離培養

• 樣本采集及預處理

• 取臍帶組織置於(yu) 生理鹽水中清洗血液。

• 將清洗幹淨的臍帶組織放置於(yu) 無菌培養(yang) 皿中，剪成2-3cm的小段。

• 清洗臍帶小段，擠壓臍帶，擠出臍帶內(nei) 部殘留血液，將清洗幹淨後的臍帶小段浸泡於(yu) 含有1%P/S的PBS中備用。

• 沿縱向剪開臍帶，清洗剖開臍帶內(nei) 部的血跡。

• 用鑷子夾緊臍帶內(nei) 部表層的華氏通膠，輕輕撕下華氏通膠組織塊，浸泡於(yu) PBS中備用。

  
  

• 人臍帶間充質幹細胞分離培養(yang)

• 將華氏通膠組織加入T75培養(yang) 瓶中，加入20ml完全培養(yang) 基。

• 置於(yu) 5% CO2、37℃培養(yang) 箱中培養(yang) ，顯微鏡下觀察細胞形態。

注意事項

• 細胞處理過程需保持無菌操作。

• 培養(yang) 條件需控製在37攝氏度、濕度70%-80%、5% CO2的環境中。

• 細胞傳(chuan) 代時注意細胞密度，保持細胞生長狀態良好。

• 細胞凍存前，添加DMSO並進行液氮凍存。