
原代小鼠骨髓間充質幹細胞(bmscs細胞)
- 來源:骨髓
- 細胞特征:貼壁細胞 , 成纖維細胞樣
- 培養(yang) 基:kaiyun网站安全專(zhuan) 用培養(yang) 基
- 其他:BMSCs細胞具有免疫調節作用,通過分泌多種細胞因子(如IL-6、TGF-β等)抑製免疫反應
相關(guan) 培養(yang) 基&試劑
小鼠骨髓間充質幹細胞(Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells, BMSCs)來源於(yu) 小鼠骨髓的成體(ti) 幹細胞,具有高度自我更新能力和多向分化潛能,可分化為(wei) 骨細胞、軟骨細胞、脂肪細胞等多種細胞類型,廣泛應用於(yu) 再生醫學和幹細胞研究。
BMSCs細胞通常從(cong) 成年小鼠的脛骨或股骨骨髓腔中分離,通過衝(chong) 洗和離心等步驟獲得富含間充質幹細胞的細胞懸液,其在骨髓中的比例較低,僅(jin) 占有核細胞總數的0.001%~0.1%。小鼠BMSCs細胞在體(ti) 外培養(yang) 時表現為(wei) 成纖維細胞樣形態,依賴貼壁生長,其增殖和分化易受種植密度、培養(yang) 基成分、血清比例、溫度及pH值等條件的影響。由於(yu) 其優(you) 良的多向分化能力、低免疫原性及良好的擴增性,BMSCs細胞在組織修複、軟骨再生、神經損傷(shang) 修複及細胞治療研究中具有重要價(jia) 值。
原代小鼠骨髓間充質幹細胞(bmscs細胞)特性特征
BMSCs細胞具有高度的自我更新能力,能夠在適當的培養(yang) 條件下持續增殖而不失去幹細胞特性,在體(ti) 外培養(yang) 時可以獲得大量細胞供研究和應用使用。
BMSCs細胞能夠向多種細胞類型分化,包括:
成骨細胞:在成骨誘導條件下,BMSCs能夠分化為(wei) 骨細胞,參與(yu) 骨組織的形成與(yu) 修複。
軟骨細胞:在適當的誘導條件下,BMSCs可分化為(wei) 軟骨細胞,有助於(yu) 關(guan) 節和軟骨的再生。
脂肪細胞:通過特定的誘導因子,BMSCs能夠轉變為(wei) 脂肪細胞,參與(yu) 脂肪組織的形成。
BMSCs細胞具有一係列特定的表麵標誌物,包括:CD90(Thy-1)、CD73、CD105。不表達造血幹細胞標誌物如CD45和CD34。
BMSCs細胞在基因水平上表現出與(yu) 幹細胞相關(guan) 的基因表達,如:Oct4、Sox2、Nanog等與(yu) 幹細胞自我更新和多能性相關(guan) 的轉錄因子。
在分化過程中,BMSCs細胞會(hui) 激活特定基因,例如成骨相關(guan) 基因(如Runx2、Osterix)和成脂肪相關(guan) 基因(如PPARγ)。
BMSCs細胞具有免疫調節作用,能夠通過分泌多種細胞因子(如IL-6、TGF-β等)抑製免疫反應。
原代小鼠骨髓間充質幹細胞(bmscs細胞)參數表
細胞名稱 | 原代小鼠骨髓間充質幹細胞(bmscs細胞) |
英文名稱 | Mouse Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells , BMSCs,MSCs |
種屬來源 | 小鼠,C57BL/6品係 |
組織來源 | 骨髓 |
細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
生長特性 | 貼壁生長 |
特性 | BMSC在骨髓中的比例0.001%-0.1% |
培養基 | 原代成纖維細胞專用培養基 |
傳代比例 | 1:3 - 1:6 |
傳代周期 | 每48-72小時更換培養液 |
培養條件 | 氣相:95%空氣 + 5% CO₂,溫度:37℃ |
pH值 | 7.2 - 7.4 |
凍存液組成 | 60%基礎培養基 + 30% FBS + 10% DMSO |
凍存方式 | 液氮儲存 |
微生物檢測 | 無細菌、真菌、支原體汙染 |
毒素檢測 | <10 EU/mL |
表麵標誌物 | CD90、CD73、CD105陽性;CD45、CD34陰性 |
基因表達特征 | Oct4、Sox2、Nanog等幹細胞相關基因表達 |
自我更新能力 | 高度自我更新能力 |
多向分化潛能 | 向骨、軟骨、脂肪等多種細胞類型分化 |
再生醫學 | 用於組織修複和再生 |
免疫調節 | 在自身免疫疾病和移植排斥反應中的應用 |
注意事項 | 建議用多聚賴氨酸 PLL(0.1mg/ml)或明膠(0.1%)對接種培養皿包被處理 |
培養教程
原代小鼠骨髓間充質幹細胞(bmscs細胞)培養教程
BMSCs細胞培養
將單細胞懸液調整至適當濃度(約25×10⁶細胞/mL),分裝到6孔板或培養(yang) 瓶中。
每孔添加1.5 mL培養(yang) 基,接種後放置於(yu) 37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中培養(yang) ,確保BMSCs細胞快速貼壁生長。
初始培養(yang) 48小時內(nei) 不更換培養(yang) 基,便於(yu) BMSCs細胞貼壁。
48小時後,用PBS輕輕清洗,去除未貼壁的懸浮細胞,並補充新鮮培養(yang) 基。
每2-3天更換一次培養(yang) 基,保持培養(yang) 基清潔和細胞營養(yang) 供給。
定期通過顯微鏡觀察BMSCs細胞的生長狀態,貼壁細胞呈纖維狀且快速增殖。
BMSCs細胞傳代
當培養(yang) 瓶或培養(yang) 孔的BMSCs細胞融合度達到80%-90%時,可進行傳(chuan) 代。
用PBS清洗培養(yang) 瓶,隨後加入0.25%胰蛋白酶(2 mL),室溫作用1-2分鍾至細胞鬆散。
加入等量新鮮培養(yang) 基終止消化,輕輕吹打混勻後離心收集細胞。
將BMSCs細胞沉澱重懸於(yu) 新鮮培養(yang) 基中,按1:2或1:3的比例重新接種。
BMSCs細胞的質量檢測與鑒定
第三代BMSCs細胞可通過流式細胞儀(yi) 檢測表麵標誌物,如CD90和CD73,驗證細胞的間充質特性。
可通過成骨和成脂實驗檢測BMSCs細胞的分化能力,以進一步確認細胞特性。
注意事項
培養(yang) 過程中應避免BMSCs細胞過度傳(chuan) 代,以保證幹細胞特性。
所有試劑和操作需保持無菌條件,避免汙染對BMSCs細胞的影響。
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參考文獻
- 中華實驗外科雜誌 > 2021年3期
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- 《山西醫科大學》 2016年
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