人氣管成纖維細胞（kaiyun网站安全）

人氣管成纖維細胞是由胚胎中胚層的間充質細胞分化而來，形態多為(wei) 紡錘形或星形扁平狀，細胞核呈橢圓形，核仁明顯，具有合成細胞外基質和修複組織損傷(shang) 的功能。在體(ti) 外培養(yang) 中，剛分離的成纖維細胞呈圓形，懸浮於(yu) 培養(yang) 液中，30分鍾後部分貼壁，6小時內(nei) 完成貼壁並伸展成梭形，5-7天後細胞融合，排列緊密，表現出強大的增殖能力。

人原代肺成纖維細胞通常來源於(yu) 手術切除的正常肺組織，通過機械切割和酶消化分離獲得，隨後在培養(yang) 基中擴增，並通過檢測特定標誌物（如Fibronectin和Vimentin）驗證純度（高於(yu) 90%）。在正常條件下，人氣管成纖維細胞負責維持肺組織結構，合成細胞外基質支持氣體(ti) 交換；在病理情況下，異常增殖可導致肺纖維化等疾病。成纖維細胞還可通過骨髓前體(ti) 細胞遷移或上皮-間充質轉化（EMT）生成，在纖維化和腫瘤等疾病中具有重要作用，是組織修複和疾病研究的重要模型。

人氣管成纖維細胞特性特征

• 合成與(yu) 分泌：人氣管成纖維細胞主要合成III型膠原、彈性蛋白和蛋白多糖，構成細胞外基質（ECM），為(wei) 氣管及肺組織提供結構支持。

• 修複作用：在組織損傷(shang) 後，成纖維細胞能夠迅速聚集到受損部位，促進修複和再生。標誌物表達：Fibronectin：免疫熒光染色陽性表達，Vimentin：陽性表達。

• 基因表達：成纖維細胞中與(yu) 膠原合成相關(guan) 的基因（如COL1A1、COL3A1）以及其他基質蛋白（如Elastin）的表達水平較高，這些基因在維持組織結構和功能中起著關(guan) 鍵作用。

• 再生能力：在適宜條件下，人氣管成纖維細胞可以進行快速增殖，並在組織損傷(shang) 後發揮重要的修複作用。過度或不足的成纖維細胞聚集可能導致肺部功能異常，如肺纖維化等病理狀。
  

人氣管成纖維細胞（kaiyun网站安全）參數表

人氣管成纖維細胞（kaiyun网站安全）培養教程

培養

• 將消化後的組織轉移至離心管中，離心1000 rpm 3-5分鍾，去除上清液。
  

• 用適量的培養(yang) 基（如DMEM/F12）重懸細胞沉澱，並輕輕吹打混勻形成細胞懸液。此時，培養(yang) 的主要就是人氣管成纖維細胞。

• 將細胞懸液接種到無菌培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿中，通常每瓶接種1-2 mL細胞懸液。
  

• 補充適量的胎牛血清（FBS）以促進人氣管成纖維細胞的生長，並放入37°C、5% CO₂的培養(yang) 箱中培養(yang) 。

傳代培養

• 當人氣管成纖維細胞的匯合度達到80%-90%時，即可進行傳(chuan) 代。

• 倒掉培養(yang) 瓶中的舊培養(yang) 基，用PBS清洗細胞1-2次。
  

• 加入適量的胰蛋白酶（0.25%），覆蓋整個(ge) 瓶底，放入37°C CO₂培養(yang) 箱消化2-5分鍾。

• 觀察細胞開始收縮和變圓後，用吸頭輕輕拍打瓶壁使細胞脫落。

• 加入2倍體(ti) 積的新鮮培養(yang) 基，輕輕混勻。

• 通過離心（1000 rpm，3-5分鍾）去除上清液，重懸細胞。

• 根據細胞密度，將人氣管成纖維細胞以適當的數量接種到新的培養(yang) 瓶中。

凍存

• 若需長期保存人氣管成纖維細胞，應在對數生長期時進行凍存。使用無血清凍存液重懸細胞，並分裝至凍存管中，置於(yu) 液氮或-80℃保存。

• 凍存後的細胞複蘇時，將凍存管迅速放入37°C水浴中融化，並用新鮮培養(yang) 基重懸細胞後接種。

注意事項

• 無菌操作：所有操作應在超淨工作台內(nei) 進行，確保無菌操作，以防細胞培養(yang) 受汙染。操作時應特別注意，避免人氣管成纖維細胞受到外界汙染。

• 生長狀態監測：定期觀察人氣管成纖維細胞的生長狀態，根據需要更換培養(yang) 基或進行傳(chuan) 代操作。