HOMF細胞（原代人口腔黏膜成纖維細胞）

人口腔黏膜成纖維細胞（Human Oral Mucosal Fibroblasts, homf細胞）是分布於(yu) 口腔黏膜固有層中的重要細胞類型，由胚胎時期的間充質細胞分化而來，主要負責維持口腔組織的結構穩定性和損傷(shang) 修複功能。口腔黏膜作為(wei) 消化道的起始部分，由上皮層和固有層構成，並通過黏膜下層與(yu) 深部組織相連，其中固有層為(wei) 纖維結締組織，富含成纖維細胞。

homf細胞通常呈紡錘形或星形，具有突起，細胞核規則且較大，呈卵圓形或橢圓形，新分離的細胞懸浮於(yu) 培養(yang) 基中，逐漸貼壁後形態伸展並表現出貼壁生長的特性。homf細胞通常采用胰蛋白酶和膠原酶混合消化結合差速貼壁技術，以獲得高純度的成纖維細胞。

homf細胞在口腔組織中通過分泌細胞外基質（如膠原蛋白和糖胺聚糖）提供結構支持，並在組織損傷(shang) 後通過增殖和基質合成促進修複，同時在特定條件下可與(yu) 纖維細胞相互轉化。homf人口腔黏膜成纖維細胞在口腔疾病研究、組織工程、生物材料相容性評價(jia) 以及細胞治療模型構建等領域具有廣泛應用，是研究口腔黏膜功能和病理機製的重要細胞模型。

hOMF細胞特性特征

貼壁生長：HOMF細胞為(wei) 貼壁生長，分離後30分鍾內(nei) 開始貼壁，並在6小時後基本完全貼壁，細胞逐漸伸展梭形，表現出良好的生長狀態。

蛋白質合成：HOMF細胞具有明顯的蛋白質合成和分泌活動，能夠合成膠原蛋白和其他細胞外基質成分，對維持口腔黏膜的結構和功能至關(guan) 重要。

細胞質特性：HOMF細胞質嗜弱堿性，透明度高，有助於(yu) 細胞的活力和功能。

Vimentin表達：HOMF細胞通過 Vimentin 免疫熒光染色進行鑒定，Vimentin 是一種中間纖維蛋白，常用於(yu) 標記成纖維細胞，其陽性表達表明細胞為(wei) 成纖維細胞。

純度檢測：經過分離的HOMF細胞純度可達90%以上，不含有 HIV-1、HBV、HCV 等病原體(ti) ，這對於(yu) 實驗室研究及臨(lin) 床應用非常重要。

基因表達：HOMF細胞表達多種與(yu) 成纖維功能相關(guan) 的基因，包括膠原基因（如 COL1A1、COL3A1）、生長因子（如 TGF-β）等，這些基因在組織修複和再生過程中發揮重要作用。

修複作用：HOMF細胞在口腔損傷(shang) 後的修複過程中扮演關(guan) 鍵角色，能夠響應不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損，通過合成和分泌基質成分促進組織再生。

轉化能力：在一定條件下，HOMF成纖維細胞可以實現與(yu) 其他類型細胞的互相轉化，這種塑性使其在組織工程和再生醫學中具有潛在應用價(jia) 值。

hOMF細胞（原代人口腔黏膜成纖維細胞）參數表

hOMF細胞（原代人口腔黏膜成纖維細胞）培養教程

HOMF細胞複蘇步驟

• 配製適合HOMF細胞的完全培養(yang) 基：在基礎培養(yang) 基中加入10% FBS和雙抗（Penicillin-Streptomycin），37℃水浴預熱備用。

• 從(cong) 液氮或-80℃冰箱中取出HOMF細胞凍存管，迅速置於(yu) 37℃水浴中，輕輕搖晃以加速解凍（約1分鍾）。
  

• 解凍後立即用75%酒精擦拭凍存管外壁，並在超淨工作台內(nei) 操作。

• 將凍存的HOMF細胞轉入15 ml離心管，加入5 ml 37℃預熱的完全培養(yang) 基，輕輕混勻。
  

• 在1000 rpm下離心5分鍾，棄去含DMSO的上清液。

• 用2 ml完全培養(yang) 基輕輕重懸HOMF細胞。
  

• 將細胞懸液轉入培養(yang) 瓶中，培養(yang) 瓶內(nei) 預先加入5-8 ml完全培養(yang) 基。

• 將培養(yang) 瓶放入培養(yang) 箱中培養(yang) ，24小時後觀察HOMF細胞貼壁情況並更換培養(yang) 基去除死細胞。

HOMF細胞傳代步驟

• 使用倒置顯微鏡觀察，當HOMF細胞生長至80%-90%匯合時進行傳(chuan) 代。
  

• 吸棄舊培養(yang) 基，用無菌PBS輕輕洗滌一次，以去除殘餘(yu) 血清和培養(yang) 基。
  

• 加入1-2 ml 0.25%胰蛋白酶溶液，放入培養(yang) 箱中消化約1-2分鍾。觀察HOMF細胞形態，確認細胞皺縮變圓。
  

• 加入等量完全培養(yang) 基終止消化，並輕輕吹打使細胞完全脫落形成單細胞懸液。

• 轉移HOMF細胞懸液至離心管，在1000 rpm離心5分鍾，棄去上清液。
  

• 用新鮮的完全培養(yang) 基重懸細胞，並根據需要將HOMF細胞分裝至多個(ge) 培養(yang) 瓶中，繼續培養(yang) 。

HOMF細胞凍存步驟

• 按傳(chuan) 代步驟收集HOMF細胞沉澱，並使用細胞計數板計數，調整至1×10⁶ cells/ml。
  

• 使用90%完全培養(yang) 基與(yu) 10% DMSO混合製備凍存液，預冷至4℃。
  

• 用凍存液輕輕重懸HOMF細胞，確保均勻分布。

• 將細胞懸液分裝至1.2 ml凍存管中，每管1 ml，密封後放入程序冷凍盒中。
  

• 將凍存盒置於(yu) -80℃冰箱中降溫過夜，隨後轉入液氮中長期保存。

注意事項

• 始終保持無菌操作，避免汙染HOMF細胞。

• 定期檢查細胞狀態，正常健康的HOMF細胞應形態均勻、貼壁良好。

• 傳(chuan) 代時避免過度消化，確保HOMF細胞活性不受損傷(shang) 。

• 凍存時務必確認DMSO濃度準確，避免損傷(shang) HOMF細胞膜。

• 每2-3天更換培養(yang) 基一次，以維持HOMF細胞生長所需的營養(yang) 環境。