PT-K75細胞（豬鼻甲黏膜成纖維細胞）

PT-K75豬鼻甲黏膜成纖維細胞是一種來源於(yu) 新生仔豬鼻甲黏膜的成纖維細胞係，具備良好的貼壁生長能力，呈梭形成纖維細胞樣。PT-K75細胞係屬於(yu) 生物安全等級1級（ATCC編號：CRL-2528），可在一般實驗室環境中操作，主要應用於(yu) 生物醫學研究，尤其是在豬巨細胞病毒（CMV）的感染和繁殖研究中。

PT-K75細胞通過與(yu) CMV進行1:1共培養(yang) ，為(wei) 研究CMV的感染機製和病毒繁殖提供了理想的體(ti) 外模型，在研究與(yu) 豬呼吸道相關(guan) 的疾病機製、炎症反應及抗病毒藥物篩選中也具有重要的實驗應用價(jia) 值。

PT-K75細胞參數表

PT-K75豬鼻甲黏膜成纖維細胞培養教程

細胞複蘇

• 解凍：將PT-K75細胞的凍存管從(cong) 液氮或-80℃冰箱中取出，迅速放入37℃水浴中解凍，輕輕搖動，約1-2分鍾完全解凍。

• 初步處理：解凍後的PT-K75細胞轉移至15 mL離心管，加入4-6 mL預熱的完全培養(yang) 基，輕輕混勻。

• 離心：以1000 RPM離心3-5分鍾，去除上清液，保留PT-K75細胞沉澱。

• 重懸：用1-2 mL完全培養(yang) 基重懸PT-K75細胞，確保細胞分散均勻。

• 接種：將重懸的PT-K75細胞接種於(yu) T25培養(yang) 瓶中，加入6-8 mL完全培養(yang) 基，並放入37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中過夜培養(yang) 。

• 觀察生長情況：第二天通過顯微鏡檢查PT-K75細胞的貼壁及增殖情況，確保其健康狀態。

細胞傳代

• 傳(chuan) 代時機：當PT-K75細胞生長至80%-90%匯合度時，可進行傳(chuan) 代。

• 洗滌：吸棄舊培養(yang) 基，用無菌PBS輕輕洗滌PT-K75細胞，以去除殘餘(yu) 培養(yang) 基和血清。

• 消化細胞：加入1 mL 0.25%胰酶-EDTA溶液，37℃孵育1-2分鍾，觀察PT-K75細胞是否變圓脫落。

• 終止消化：加入3-4 mL含10% FBS的完全培養(yang) 基，終止胰酶消化，輕拍培養(yang) 瓶底部使PT-K75細胞完全脫落。

• 收集與(yu) 重懸：將PT-K75細胞懸液轉移至15 mL離心管，以1000 RPM離心3-5分鍾，棄去上清後用完全培養(yang) 基重懸細胞。

• 重新接種：根據需要按1:2至1:3比例將PT-K75細胞分瓶，加入6-8 mL新鮮培養(yang) 基，確保細胞分布均勻。

細胞凍存

• 收集細胞：按照傳(chuan) 代步驟收集PT-K75細胞沉澱，計數後調整細胞濃度為(wei) 1×10^6個(ge) /mL。

• 製備凍存液：使用預冷的凍存液（90%完全培養(yang) 基 + 10% DMSO）重懸PT-K75細胞。

• 分裝與(yu) 冷凍：將PT-K75細胞分裝於(yu) 1.2 mL凍存管，放入程序降溫盒中，-80℃過夜後轉存至液氮中長期保存。

注意事項

• 運輸檢查：收到PT-K75細胞後，需檢查運輸狀態，若有異常，應及時與(yu) 供應商聯係。

• 培養(yang) 基更新：勿重複使用運輸過程中使用的培養(yang) 基，務必使用新鮮完全培養(yang) 基培養(yang) PT-K75細胞。

• 傳(chuan) 代建議：首次傳(chuan) 代按1:2比例進行，以確保PT-K75細胞的穩定增殖。