PED細胞（豬內(nei) 皮細胞係）

PED細胞（Porcine Endothelial Cells，豬內(nei) 皮細胞）是從(cong) 健康豬的血管內(nei) 皮組織中分離獲得的正常內(nei) 皮細胞，常用於(yu) 血管生物學研究、藥物篩選及疾病模型的建立。PED細胞主要來源於(yu) 成年或幼年豬的血管內(nei) 皮，通常從(cong) 動脈、靜脈等大血管或微小血管內(nei) 皮層中分離而來。

PED細胞表現出典型的上皮細胞樣形態，具有貼壁生長特性。PED細胞在模擬人類內(nei) 皮細胞功能及研究心血管疾病方麵具有重要的應用價(jia) 值。

PED細胞特性特征

• 代謝活性：PED細胞在適宜的培養(yang) 條件下維持高水平的代謝活性，適合用於(yu) 藥物篩選和生物學研究。

• 基因表達：PED細胞表達多種與(yu) 內(nei) 皮功能相關(guan) 的基因，如VEGF（血管內(nei) 皮生長因子）、eNOS（內(nei) 皮型一氧化氮合酶）、CD31（內(nei) 皮細胞標誌物）等。

• 蛋白質表達：PED細胞表麵表達多種膜蛋白，包括整合素和選擇素，這些蛋白在細胞粘附、遷移及信號傳(chuan) 導中發揮關(guan) 鍵作用。

• 基因組：PED細胞的基因組與(yu) 其他哺乳動物內(nei) 皮細胞相似，包含調節血管生成、炎症反應和細胞增殖的相關(guan) 基因。

• 轉錄因子：PED細胞中活躍的轉錄因子包括NF-κB和HIF-1α，這些因子在應對缺氧和炎症反應中起著重要作用

PED細胞參數表

PED豬內皮細胞係培養教程

細胞複蘇

• 將凍存管中含有1 mL PED細胞懸液的樣品，快速放入37℃水浴中，輕輕搖晃直至細胞完全解凍。
  

• 向解凍後的PED細胞懸液中加入4 mL的完全培養(yang) 基（DMEM + 10% FBS + 1% P/S），輕輕混勻。
  

• 將PED細胞懸液轉移至離心管中，使用1000 RPM的轉速離心4分鍾，去除上清液。
  

• 加入1-2 mL新鮮的完全培養(yang) 基，輕輕吹打混勻，確保細胞均勻分散。
  

• 將重懸後的PED細胞懸液轉移至T25培養(yang) 瓶或10 cm培養(yang) 皿中，加入約8 mL完全培養(yang) 基，培養(yang) 過夜。
  

• 第二天檢查PED細胞的生長情況，確認是否有汙染，並觀察PED細胞是否已成功貼壁。
  

PED細胞傳代

• 當PED細胞的密度達到80%-90%時，準備進行傳(chuan) 代。
  

• 棄去原培養(yang) 基，使用不含鈣、鎂離子的PBS緩衝(chong) 液洗滌PED細胞1-2次，以去除殘留的培養(yang) 基。
  

• 向PED細胞上加入約1 mL的0.25%胰蛋白酶（含EDTA），輕輕搖動培養(yang) 瓶，使胰酶均勻覆蓋細胞。
  

• 將培養(yang) 瓶放入37℃培養(yang) 箱中，觀察PED細胞是否開始變圓並脫落，通常消化時間為(wei) 2-3分鍾。

• 一旦大部分PED細胞脫落，立即加入3-4 mL完全培養(yang) 基以終止胰酶的消化作用。
  

• 離心PED細胞懸液，使用1200 RPM的轉速離心3分鍾，去除上清液。
  

• 加入新鮮的完全培養(yang) 基，輕輕重懸PED細胞，確保細胞均勻分散。

• 按照1:2至1:4的比例將PED細胞懸液接種到新的培養(yang) 瓶中，補充適量的培養(yang) 基，並使用透氣瓶蓋培養(yang) 。
  

PED細胞凍存

• 配製凍存液：使用92% FBS和8% DMSO，或使用92%完全培養(yang) 基和8% DMSO，混勻。
  

• 傳(chuan) 代時，收獲生長良好的PED細胞，使用胰酶消化後離心，得到細胞沉澱。
  

• 向PED細胞沉澱中加入預先配製好的凍存液，輕輕重懸PED細胞，確保細胞均勻分散。
  

• 將PED細胞懸液迅速轉移至標記好的凍存管中，確保凍存管中的細胞量適中。
  

• 將凍存管放入程序凍存盒中，置於(yu) -80℃冰箱過夜，第二天轉入液氮保存。
  

• 如果沒有程序凍存盒，也可以將凍存管放置於(yu) 泡沫盒中，在4℃靜置5-10分鍾，然後轉入-20℃靜置2小時，再移入-80℃過夜，最後轉入液氮。