
MARC145細胞(非洲綠猴胚胎腎細胞)
- 來源:胚胎
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:病毒敏感性:對豬繁殖與(yu) 呼吸綜合征病毒(PRRSV)高度敏感,也可用於(yu) 雞傳(chuan) 染性支氣管炎病毒(IBV)和豬小病毒(PPV)的體(ti) 外增殖
MARC145細胞係是從(cong) 非洲綠猴(Cercopithecus aethiops)的胚胎腎上皮細胞中衍生出來的,為(wei) 母細胞係MA-104的克隆細胞,MA-104細胞係同樣來源於(yu) 非洲綠猴的腎組織,而非恒河猴。MARC145細胞具備穩定的上皮樣形態,能夠在體(ti) 外連續培養(yang) 並具有快速增殖的特性。MARC145細胞係因對豬繁殖與(yu) 呼吸綜合征病毒(PRRSV)高度敏感而受到廣泛應用,尤其適合用於(yu) PRRSV的感染機製研究和疫苗生產(chan) 。
MARC145細胞特性特征
MARC145細胞對豬繁殖與(yu) 呼吸綜合征病毒(PRRSV)具有高度敏感性,是該病毒研究的重要模型。
MARC145細胞在接種PRRSV後,通常在24至48小時內(nei) 開始出現病變,72至96小時達到80%的病變率。
MARC145細胞係表達多種與(yu) 病毒感染相關(guan) 的受體(ti) 和輔助因子,這使其成為(wei) 研究病毒感染機製的理想模型。
在無血清培養(yang) 條件下,MARC-145細胞可以使用含有胰島素樣生長因子、表皮生長因子和成纖維生長因子的培養(yang) 基,以促進其快速增殖並降低動物源成分的含量,從(cong) 而提高疫苗的安全性。
MARC-145細胞廣泛應用於(yu) 病毒學研究、疫苗開發以及藥物篩選等領域
MARC145細胞參數表
細胞名稱 | MARC145細胞(非洲綠猴胚胎腎細胞) |
細胞別稱 | Marc-145; MARC 145; Marc 145; MARC145; Marc145; Meat Animal Research Center-145 |
細胞來源 | 非洲綠猴(Cercopithecus aethiops)胚胎腎細胞 |
母細胞係 | MA-104 |
細胞類型 | 上皮樣細胞 |
傳代特性 | 可連續傳代 |
細胞形態 | 扁平或多邊形,貼壁生長 |
感染敏感性 | 對豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)高度敏感 |
適用病毒 | PRRSV、雞傳染性支氣管炎病毒(IBV)、豬小病毒(PPV) |
培養基 | DMEM+10% FBS+1% P/S |
培養環境 | 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ |
pH值 | 7.0 - 7.3(最佳7.2) |
傳代比例 | 通常為1:2或1:3 |
培養時間 | 通常48小時後可觀察到細胞單層形成 |
凍存液 | 生長培養基 + 10% DMSO |
凍存溫度 | -80℃(短期),液氮(長期) |
生長模式 | 貼壁生長 |
最大細胞密度 | 在生物反應器中可達8×10^6 cells/mL |
無血清培養基成分 | 胰島素樣生長因子 5μg/mL 表皮生長因子 10μg/mL 成纖維生長因子 8μg/mL 轉鐵蛋白 15μg/mL 亞硒酸鈉 25μg/mL 小麥蛋白酶解物 4mg/mL 酶解明膠溶液 2%體積百分比 乙醇胺 15μg/mL |
檢測汙染 | 定期檢查支原體等汙染 |
培養注意事項 | 確保無支原體感染,及時傳代,避免細胞老化 |
培養教程
MARC145非洲綠猴胚胎腎細胞培養教程
MARC145細胞複蘇
將含MARC145細胞的凍存管在37℃水浴中迅速解凍,並輕輕搖晃至完全融化。
向解凍的MARC145細胞懸液中緩慢加入4mL DMEM培養(yang) 基,混勻。
以1000 RPM離心4分鍾,去除上清液。
補加1-2mL新鮮培養(yang) 基並輕輕吹打,均勻懸浮MARC145細胞。
將細胞懸液轉移至培養(yang) 瓶,並置於(yu) 37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中過夜培養(yang) ,確保MARC145細胞附著和恢複。
MARC145細胞傳代
當MARC145細胞生長至80%-90%匯合度時,棄去舊培養(yang) 基,用PBS清洗細胞1-2次。
加入1mL胰蛋白酶消化液於(yu) 培養(yang) 瓶中,放置於(yu) 37℃培養(yang) 箱消化1-2分鍾,密切觀察MARC145細胞是否變圓、脫落。
加入適量新鮮培養(yang) 基終止消化,並輕輕吹打,確保MARC145細胞完全分散。
以1000 RPM離心4分鍾,棄去上清液。
重懸MARC145細胞於(yu) 新鮮培養(yang) 基中,按1:2的比例分瓶,並加入適量DMEM培養(yang) 基,放入培養(yang) 箱繼續培養(yang) 。
MARC145細胞凍存
在MARC145細胞狀態良好時,將培養(yang) 基棄去,用PBS清洗一次。
加入胰蛋白酶消化MARC145細胞,待細胞變圓時加入1mL含血清的培養(yang) 基中止消化。
離心後去除上清液,重懸於(yu) 適量的血清中,同時加入DMSO使終濃度為(wei) 10%。
將MARC145細胞懸液分裝於(yu) 凍存管中,放入程序降溫盒,置於(yu) -80℃冷凍2小時後轉入液氮保存。
MARC145細胞培養注意事項
汙染防控:應確保培養(yang) 過程無支原體(ti) 等汙染,定期檢查MARC145細胞的狀態。
pH控製:MARC145細胞培養(yang) 液pH值保持在7.0-7.3之間,最佳為(wei) 7.2。
傳(chuan) 代頻率:當MARC145細胞達到適當密度(80%-90%匯合)時傳(chuan) 代,避免長時間培養(yang) 導致細胞狀態老化。
異常情況:若MARC145細胞出現汙染或狀態異常,需及時處理並聯係細胞供應商。
相關資料
STR鑒定及相關
參考文獻
- 《中國畜牧獸醫學會動物傳染病學分會第四次豬病防控學術研討會論文集》 2010年
- 摘要:本實驗采用激流式生物反應器大規模培養Marc-145細胞,通過控製DO、pH等條件,開發出...
- 《基因組學與應用生物學》 2020年07期
- 摘要:...功能及其在病毒複製中的作用機製。本試驗擬獲取Marc145細胞源DCP2基因序列,構...
- 《華南農業大學》 2016年
- 摘要:豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)引起的一種以豬的呼吸...
- 查看完整內容 >
上一篇:vero細胞(非洲綠猴腎細胞)