HEK-293FT細胞（人胚胎腎細胞）

HEK-293FT細胞係衍生自293F細胞係。

HEK-293FT細胞係是一種源自於(yu) SV40大T抗原轉化的人胚胎腎細胞的衍生物，具有快速生長、高效轉染和高病毒滴度的特點。
293FT人胚腎細胞係是使用ViraPower™慢病毒表達係統產(chan) 生高滴度慢病毒的理想細胞係。當將ViraPower™表達載體(ti) 和ViraPower慢病毒包裝混合物共轉染到HEK-293FT細胞中時，會(hui) 產(chan) 生高水平的病毒RNA以及包裝所需的gag ⁄ pol和rev蛋白。
HEK-293FT細胞是非常適合生產(chan) 慢病毒的宿主。並穩定表達來自pCMVSPORT6TAg.neo質粒的SV40大T抗原。SV40大T抗原的表達由人巨細胞病毒（CMV）啟動子控製，並且是高水平和組成型的。

HEK-293FT細胞特性

• HEK-293FT細胞係是通過SV40大T抗原轉化的人胚胎腎細胞衍生物，具有快速生長、高效轉染能力和高病毒滴度。

• HEK293f細胞是慢病毒表達係統中的理想宿主，非常適合生產(chan) 慢病毒。

• HEK293f細胞來源於(yu) SV40大T抗原轉化的人胚胎腎細胞，具有高度可轉染性。
  

• 使用ViraPower™慢病毒表達係統時，293FT細胞可產(chan) 生高水平的病毒RNA和所需的包裝蛋白。

• HEK293ft細胞係具有高水平和組成型的SV40大T抗原表達。

• HEK293ft細胞係生長快速，易於(yu) 轉染。

HEK-293FT細胞參數表

HEK-293FT細胞(人胚腎細胞)培養說明

解凍步驟

• 從(cong) 液氮中取出細胞凍存管，快速在 37°C 水浴中解凍。

• 使用 70% 酒精對凍存管外壁消毒，將細胞轉移到含 PBS 的 15 mL 無菌試管中，離心並重懸於(yu) 不含 Geneticin 的 2 mL 完全培養(yang) 基中。

• 將細胞轉移至含 10 mL 完全培養(yang) 基的 T-75 cm² 培養(yang) 瓶中。

• 在 37°C 下過夜孵育，直至細胞貼附到瓶底。

• 第二天吸走培養(yang) 基，替換為(wei) 含有 500 μg/mL Geneticin 的新鮮完全培養(yang) 基。

傳代培養細胞

• 吸走培養(yang) 瓶中的全部培養(yang) 基，用 10 mL PBS 洗滌細胞，去除多餘(yu) 的培養(yang) 基和血清。

• 加入 2 mL 胰蛋白酶/EDTA 溶液，室溫下孵育至細胞脫壁，確認大多數細胞已脫壁。

• 加入 8 mL 含有 Geneticin 的完全培養(yang) 基，將細胞懸液轉移至 15 mL 無菌錐形管中。

• 測定細胞活力和總細胞數。

• 使用推薦密度接種細胞至新的培養(yang) 瓶。

冷凍細胞

• 將HEK-293FT細胞培養(yang) 至 70-90% 匯合度。

• 將細胞懸液離心，去除培養(yang) 基，轉移至預冷的冷凍培養(yang) 基中。

• 分裝細胞懸液至凍存管，控製冷凍速率並存儲(chu) 於(yu) 液氮中。

轉染細胞

• 細胞保持在健康狀態並達到適當的匯合度。

• 對細胞進行鋪板，使之在轉染時達到 90-95% 的匯合度。

• 將質粒構建體(ti) 轉染至HEK-293FT細胞中。

• 轉染完成後，加入含有 500 μg/mL Geneticin 的新鮮培養(yang) 基，恢複細胞 24-48 小時後進行實驗。