293F細胞（人胚腎上皮細胞） （暫不提供）

293-F人胚腎上皮細胞是從(cong) HEK-293細胞係克隆並適應於(yu) 293培養(yang) 基的細胞係。HEK-293細胞係最初由荷蘭(lan) 科學家Alex van der Eb於(yu) 1973年通過用腺病毒5型DNA轉染正常人胚胎腎細胞建立。293-F細胞係適應於(yu) 懸浮培養(yang) ，非常適合行大規模生產(chan) 。

293F細胞特性特征

• 293F細胞係源自HEK-293細胞，後者通過整合腺病毒5型DNA而永生化。

• 293F細胞表達腺病毒的E1A基因，該基因參與(yu) 轉錄激活，使細胞能夠高效表達蛋白質。
  

• 293F細胞以其高效的蛋白表達能力著稱，能夠在無血清培養(yang) 基中快速生長並表達高水平的重組蛋白。
  

• 293F細胞具有高轉染效率，適合用於(yu) 重組蛋白和病毒載體(ti) 的生產(chan) 。

• 基因表達：293-F細胞表達腺病毒E1A基因。
  

• 染色體(ti) 特征：與(yu) 其他HEK-293衍生細胞係類似，293-F細胞可能具有不正常的核型，通常表現出比正常人類細胞更多的染色體(ti) 數

293F細胞參數表

293F人胚腎上皮細胞培養教程

細胞複蘇

• 解凍293-F細胞：將凍存管中的1mL 293-F細胞懸液迅速放入37℃水浴中解凍，輕輕搖晃以確保均勻解凍。

• 添加培養(yang) 基：解凍後，立即加入4mL培養(yang) 基以稀釋293-F細胞懸液，並輕輕混合均勻。

• 離心：在1000RPM下離心4分鍾，棄去上清液。

• 補加培養(yang) 基：補加1-2mL培養(yang) 基，輕輕吹打混勻。

• 培養(yang) ：將293-F細胞懸液轉移至培養(yang) 瓶中，或轉移至10cm培養(yang) 皿中加入約8mL培養(yang) 基，培養(yang) 過夜。

• 換液與(yu) 檢查：次日換液並檢查293-F細胞的密度。

細胞傳代

• 傳(chuan) 代條件：當293-F細胞的密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代。

• PBS洗滌：棄去培養(yang) 上清液，用無鈣鎂PBS洗滌293-F細胞1-2次。

• 消化293-F細胞：加入1mL消化液（0.25%胰蛋白酶-0.53mM EDTA），在37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾。

• 觀察與(yu) 終止消化：顯微鏡下觀察293-F細胞是否大部分圓形並脫落，若是，迅速將培養(yang) 瓶輕敲後加入少量培養(yang) 基終止消化。

• 離心處理：加入6-8mL培養(yang) 基，輕輕混勻，離心1000RPM下4分鍾，棄去上清液。

• 分瓶培養(yang) ：補加1-2mL培養(yang) 液，輕輕混勻，將293-F細胞懸液按1:2比例分配至新的培養(yang) 皿或培養(yang) 瓶中，每瓶加入8mL培養(yang) 基。

細胞凍存

• 準備凍存液：配製90%完全培養(yang) 基與(yu) 10% DMSO的凍存液。

• 細胞懸液製備：將293-F細胞懸液與(yu) 凍存液混合。

• 分裝：將混合後的293-F細胞懸液分裝至凍存管中。

• 程序降溫：逐步降溫至-80℃，然後轉移至液氮中長期保存。

備注

• 293-F細胞係源自HEK-293細胞係，適合懸浮培養(yang) ，廣泛應用於(yu) 重組蛋白和病毒載體(ti) 的生產(chan) 。

• 293-F細胞在無血清培養(yang) 基中也能快速生長，並能夠達到高細胞密度，從(cong) 而支持大規模的生物製品生產(chan) 。

• 雖然293-F細胞可以進行貼壁生長，但其主要優(you) 勢在於(yu) 懸浮培養(yang) 。