
293E細胞【人胚腎細胞(EBNA1基因修飾)】
- 來源:腎髒
- 細胞特征:貼壁細胞 ,上皮細胞樣,多角形
- 培養(yang) 基:IMDM+10% FBS+1% P/S
- 其他:基因修飾:EBNA1基因;可穩定表達EBNA1
293E人胚腎細胞(EBNA1基因修飾)是從(cong) HEK293細胞係衍生而來的。HEK293細胞係最初由Alex van der Eb在1973年通過將人胚胎腎細胞轉染腺病毒5型DNA片段建立,具體(ti) 實驗由Frank Graham實施。293E細胞在此基礎上引入了EBNA1基因修飾,EBNA1即Epstein-Barr病毒核抗原1,這種修飾增強了細胞的基因表達能力,使293E細胞在穩定表達EBNA1方麵具有顯著優(you) 勢。
293E細胞特性特征
293E細胞在19號染色體(ti) 上整合了約4.5 kb的腺病毒DNA片段。
293E細胞通過引入EBNA1(Epstein-Barr病毒核抗原1)基因進行修飾。
293E細胞參數表
細胞名稱 | 293E細胞【人胚腎細胞(EBNA1基因修飾)】 |
細胞別稱 | 293 c18; 293c18; HEK 293 c18; HEK-293 c18; HEK293-EBNA1; HEK-293-EBNA; HEK 293-EBNA;HEK 293 EBNA; HEK293EBNA; 293 EBNA; |
細胞來源 | 人;胚胎腎髒 |
細胞類型 | 轉化細胞係 |
形態 | 上皮細胞樣;多角形 |
基因修飾 | EBNA1基因;可穩定表達EBNA1 |
來源細胞係 | 293 [HEK-293]細胞 |
培養方式 | 貼壁生長 |
培養基 | IMDM + 10% FBS + 1% P/S |
細胞密度 | 1×10^6cells/T25培養瓶 |
培養環境 | 37°C;5% CO2 |
生物安全等級 | BSL-2 |
應用限製 | 僅用於科研或工業,不可用於臨床診斷或治療 |
基因表達 | 可穩定表達EBNA1 |
培養教程
293E人胚腎細胞(EBNA1基因修飾)培養教程
細胞複蘇
從(cong) 液氮中取出凍存的293E細胞,迅速置於(yu) 37°C水浴中解凍。
將解凍的293E細胞懸液轉移到含有預熱培養(yang) 基的離心管中。
離心洗滌293E細胞,去除凍存保護劑。
將293E細胞重懸於(yu) 新鮮培養(yang) 基中,並轉移到培養(yang) 瓶中。
常規培養
使用T25培養(yang) 瓶,初始接種密度為(wei) 1×10^6 293E細胞/瓶。
每2-3天更換新鮮培養(yang) 基。
觀察293E細胞的生長狀態,保持細胞密度在70-80%左右。
傳代
當293E細胞密度達到80-90%時進行傳(chuan) 代。
用PBS輕輕洗滌293E細胞層。
加入適量胰蛋白酶-EDTA溶液,37°C孵育2-3分鍾。
輕輕拍打培養(yang) 瓶,使293E細胞脫落。
加入含血清的培養(yang) 基終止消化。
按照1:3 - 1:6的比例進行傳(chuan) 代,根據293E細胞的生長狀態調整具體(ti) 比例。
細胞凍存
收集對數生長期的293E細胞。
製備凍存液(90% FBS + 10% DMSO)。
調整293E細胞濃度至1-2×10^6 cells/mL。
將293E細胞懸液分裝到凍存管中。
使用程序降溫盒緩慢降溫,最終轉移到液氮中長期保存。
注意事項
定期檢查293E細胞形態和生長狀態。
保持無菌操作,防止汙染。
避免293E細胞過度生長或密度過低。
定期進行支原體(ti) 檢測。
質量控製
定期進行293E細胞活性檢測。
進行細菌、真菌、黴菌汙染物鏡檢。
進行衣原體(ti) 、支原體(ti) 檢測。
必要時進行STR鑒定,確保293E細胞係純度。
相關資料
STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11,12 |
D2S1338 | 19 |
D3S1358 | 15,17 |
D5S818 | 8,9 |
D7S820 | 11,12 |
D8S1179 | 12,14 |
D13S317 | 12,14 |
D16S539 | 9 |
D18S51 | 18 |
D19S433 | 18 |
D21S11 | 28,30.2 |
FGA | 23 |
PentaD | 9,10 |
PentaE | 7,15 |
TH01 | 7,9.3 |
TPOX | 11 |
vWA | 16,19 |
D6S1043 | 11 |
D12S391 | 19,21 |
D2S441 | 11,15 |
參考文獻
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