2v6.11細胞 (人胚腎細胞)

2v6.11細胞來源於(yu) 2001年的人胚胎腎係HEK-293。2V6.11細胞係是研究腺病毒E4癌蛋白，特別是已知參與(yu) 細胞基因組維持和修複的E4 34K蛋白的寶貴資源。

2V6.11細胞通過用質粒pVgRxR轉染，然後用pEKORF6轉染獲得，導致E4 34K蛋白的誘導表達，這與(yu) 修複DNA中雙鏈斷裂的細胞機製的抑製有關(guan) 。
2V6.11細胞係證明腺病毒蛋白E4 34k和E1b 55k通過破壞非同源末端連接（NHEJ）和破壞DNA修複蛋白的穩定來抑製染色體(ti) DNA修複，將其作用從(cong) 染色體(ti) 外擴展到細胞基因組DNA。

2V6.11誘導型細胞係具有粘附的上皮形態，是研究腎來源上皮細胞的行為(wei) 和特征的理想細胞，包括它們(men) 對人類腺病毒40感染的反應。這種可以通過蛋白質印跡檢測的多功能細胞係使研究人員能夠深入研究腺病毒E4癌蛋白抑製修複過程的分子機製，從(cong) 而有助於(yu) 我們(men) 理解腺病毒病理學和開發新治療策略的潛力。

2v6.11細胞特性

• 2V6.11細胞源自2001年的人胚胎腎係HEK-293。

• 細胞轉化過程中使用了質粒pVgRXR和pEKORF6，pEKORF6包含編碼E4 24K的Ad5 E4ORF6基因。

• 2V6.11細胞可誘導表達人腺病毒E4 34KDa蛋白。

• 2v6.11細胞可用於(yu) 研究腺病毒E4癌基因的工具。

• 2v6.11細胞細胞形態為(wei) 粘附的上皮型。

• 2v6.11細胞對人類腺病毒40感染有反應。

• 2V6.11細胞係證明腺病毒蛋白E4 34k和E1b 55k通過破壞非同源末端連接（NHEJ）和破壞DNA修複蛋白的穩定來抑製染色體(ti) DNA修複，將其作用從(cong) 染色體(ti) 外擴展到細胞基因組DNA。

2v6.11細胞參數表

2v6.11人胚腎細胞培養說明

2V6.11細胞的傳代步驟

• 細胞密度達80%-90%時傳(chuan) 代培養(yang) ：

• 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

• 加2 mL消化液（0.25% Trypsin-0.53 mM EDTA）於(yu) 培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況。若細胞大部分變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養(yang) 瓶後加少量培養(yang) 基終止消化。

• 按6-8 mL/瓶補加培養(yang) 基，輕輕打勻後吸出，在1000 RPM條件下離心4分鍾，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yang) 液後吹勻。

• 收到細胞後首次傳(chuan) 代推薦將細胞懸液按1:2的比例分到新的含6 mL培養(yang) 基的新皿中或瓶中，建議凍存一支備用。後續傳(chuan) 代根據實際情況按1:2到1:4的比例進行。

2V6.11細胞的凍存步驟

• 棄去培養(yang) 基後，PBS清洗一遍後加入1 mL胰酶。細胞變圓脫落後，加入1 mL含血清的培養(yang) 基終止消化，可使用血球計數板計數。

• 4分鍾1000 RPM離心去掉上清。加1 mL血清重懸細胞，根據細胞數量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為(wei) 5%，細胞密度不低於(yu) 1×10^6/mL，每支凍存管凍存1 mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。

• 將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，放入-80℃冰箱，至少2個(ge) 小時後轉入液氮罐儲(chu) 存。記錄凍存管位置以便下次取用。

注意事項

• 細胞傳(chuan) 代時，務必在顯微鏡下確認2V6.11細胞已充分消化但未過度消化，以保證細胞的活性和正常形態。

• 凍存時，確保DMSO濃度和2V6.11細胞密度的準確性，以保證細胞在複蘇後的存活率和活力。

• 在整個(ge) 操作過程中應保持無菌操作，避免細胞汙染。