
hek293細胞(人胚腎細胞 )
- 來源:293 [HEK-293] 人胚腎細胞是從(cong) 人類胚胎的腎髒中分離出的表現出上皮形態的細胞係
- 細胞特征:293細胞是上皮細胞的一種,通常在培養(yang) 基中呈現粘附生長的特征。傾(qing) 向於(yu) 形成單層細胞(Monolayer),並具有某些致瘤性
- 培養(yang) 基:MEM(ATCC改良)+10% FBS+1% P/S
- 其他:貼壁能力較弱;染色體(ti) 核型:亞(ya) 三倍體(ti) ,含有特定的染色體(ti) 重排
HEK293細胞來源
人胚腎細胞(Human Embryonic Kidney Cells,簡稱HEK)是一種源自人類胚胎腎髒的細胞係,其中最常見的是HEK293和其衍生的293T細胞。
HEK293細胞源自夭折人類胚胎腎髒,在1973年由Van Der Eb和Graham博士成功培養(yang) ,其命名中的數字“293”實際上是指這個(ge) 細胞係的培養(yang) 過程中的第293次實驗產(chan) 生的結果。
HEK293細胞係最初是通過將人類腺病毒(Adenovirus)的DNA轉染到人類胚胎腎細胞中,使其表達了腺病毒的基因而得以永生化。
293T細胞作為(wei) 293細胞的一種衍生細胞係,在1976年由F.L.Graham和J.S.Miley成功培育而成,其主要特點是通過轉染SV40 T抗原基因而產(chan) 生的高轉染效率。
染色體核型
HEK-293細胞是一個(ge) 亞(ya) 三倍體(ti) 的人類細胞係。模態染色體(ti) 數目為(wei) 64,出現在30%的細胞中。具有較高倍性體(ti) 的細胞的比率為(wei) 4.2%。der(1)t(1;15)(q42;q13)、der(19)t(3;19)(q12;q13),其他四個(ge) 標記染色體(ti) 是大多數細胞共有的。其他五個(ge) 染色體(ti) 標記僅(jin) 出現在某些細胞中。標記der(1)和M8(或Xq+)常配對。N17和N22有四個(ge) 複製體(ti) 。在大多數細胞中,除了三個(ge) 複製的X染色體(ti) 外,還有成對的Xq+和一個(ge) Xp+。
HEK-293細胞的特性和基因組構成
HEK-293細胞有致瘤性,可在裸鼠體(ti) 內(nei) 形成腫瘤。
盡管早期的報告表明,HEK-293細胞含有來自病毒基因組右端和左端的腺病毒5 DNA[RF32764],但隻存在左端序列。細胞表達由整合素β-1亞(ya) 基和玻璃體(ti) 凝集素受體(ti) α-v亞(ya) 基組成的玻璃體(ti) 凝集素的不尋常細胞表麵受體(ti) 。對Ad5插入物進行克隆和測序,並確定從(cong) nts1到4344的共線序列整合到19號染色體(ti) 19q13.2)中。
HEK-293人胚腎細胞產品參數表
名稱 | HEK-293(人胚腎細胞) |
衍生品 | 293T, 293FT, 293A, 293E, 293F, 293H, 293S |
種屬 | 人類 |
組織來源 | 胎兒腎;以腺病毒5DNA進行轉化 |
年齡(性別) | 胎兒 |
細胞類型 | 轉化細胞係 |
形態特點 | 上皮細胞 |
生長特性 | 貼壁細胞 |
致瘤性 | + |
產物或抗原 | 大T抗原 |
染色體核型 | 亞三倍體,含有特定的染色體重排 |
生長特性 | 粘附 |
文獻評價 | 293細胞係含有Ad5基因組左端序列,表達玻基結合素受體 |
一段共線序列整合到19號染色體上 | |
凍存條件 | 凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO;溫度:液氮 |
生長培養基 | MEM(ATCC改良)+10% FBS+1% P/S |
傳代 | 0.25% 胰酶 + 0.53 mM EDTA 消化液 |
凍存條件 | 凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO溫度:液氮 |
培養基更換 | 每2-3天 |
應用 | 基因表達、蛋白質生產、病毒載體生產、癌症研究等 |
突變時間 | 約80小時 |
致瘤性 | 有,裸鼠體內可形成腫瘤 |
受體表達情況 | 玻連蛋白受體(vitronectin) |
保藏機構 | ATCC; CRL-1573 ATCC: PTA-4488 DSMZ: ACC-305;ECACC: 85120602 |
培養教程
培養(yang) 說明書(shu) :
使用前檢查細胞的健康狀況,確保無細菌或真菌汙染。
使用MEM培養(yang) 基+10% FBS + 1% P/S培養(yang) 細胞。
在37°C的CO2孵育箱中培養(yang) 細胞,每2-3天換液1次。
傳(chuan) 代比例為(wei) 1:3-1:4,可根據實驗需要進行調整。
培養(yang) 過程中細胞貼壁鬆散,操作時需輕柔處理,避免細胞損傷(shang) 。
細胞在液氮中保存,並定期檢查凍存液的完整性。
傳(chuan) 代時使用0.25% Trypsin-EDTA,注意不要過度消化。
若出現異常現象或問題,請及時谘詢保藏機構或相關(guan) 專(zhuan) 業(ye) 人士。
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STR鑒定及相關
STR點位信息
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11,12 |
D2S1338 | 19 |
D3S1358 | 15,17 |
D5S818 | 8,9 |
D7S820 | 11,12 |
D8S1179 | 12,14 |
D13S317 | 12 (JCRB; TKG) |
12,14 (ATCC; CCRID; CLS; DSMZ; ECACC; KCLB; PubMed=15218237; RCB) | |
D16S539 | 9 (DSMZ) |
9,13 (ATCC; CCRID; CLS; ECACC; JCRB; RCB; TKG) | |
D18S51 | 17 (PubMed=15218237) |
17,18 (CCRID; PubMed=11416159) | |
18 (CLS; DSMZ) | |
D19S433 | 15,18 (CCRID) |
18 (CLS; DSMZ) | |
D21S11 | 28,30.2 |
FGA | 23 |
Penta D | 9,10 |
Penta E | 7,15 |
TH01 | 7,9.3 |
TPOX | 11 |
vWA | 16,19 |
參考文獻
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- 摘要:目的 對HEK293細胞進行三級細胞庫的建立,並高效表達重組的HPV16-E6E7腺病毒....
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- J Virol Methods . 2021 Aug:294:114195.
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- Methods Mol Biol . 2015:1258:209-22.
- 摘要:Transient transfection of human embryonic kid...
- 解剖學報 > 2020年1期
- 摘要:...建針對QKI-5基因的慢病毒過表達載體和抑製表達載體,轉染293T細胞產生慢病毒顆粒...
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