懸浮細胞傳(chuan) 代培養(yang)

大多數原代培養(yang) 物、有限細胞係和連續細胞係都依賴於(yu) 貼壁，因此會(hui) 以單層形式附著在表麵生長。其他細胞，特別是來自造血或某些腫瘤組織的細胞，則不依賴於(yu) 貼壁，而是懸浮生長.

懸浮細胞的培養

將完全生長培養(yang) 基放入水浴中，加熱至適當的溫度（通常為(wei) 37°C）。

充分混合細胞/培養(yang) 基懸浮液；使用移液器將生長在固定燒瓶中的細胞懸浮。取出少量細胞懸浮液，使用血細胞計數器和活體(ti) 染色劑測定細胞密度和活力。

計算以該細胞係的最小密度重新接種燒瓶所需的細胞量，同時考慮將使用的新鮮培養(yang) 基的量。

將適量培養(yang) 基加入培養(yang) 容器中，然後加入細胞懸浮液。不要將濃縮的細胞懸浮液加入空燒瓶中。同一培養(yang) 容器可以重複使用，但由於(yu) 燒瓶開口處會(hui) 積聚少量培養(yang) 基，因此每次重新接種時汙染的可能性都會(hui) 增加。

如果有必要的話，用無菌過濾的CO2向燒瓶中充滿空氣，密封燒瓶，然後在適當的溫度下孵育。

通常不需要完全更換培養(yang) 基，除非細胞密度非常高或培養(yang) 基的 pH 值為(wei) 酸性（因酚紅而呈黃色）。要完全更換培養(yang) 基，請輕輕離心細胞（125 × g，10 分鍾），倒出培養(yang) 基，然後以較低的接種密度將細胞重新懸浮在新鮮培養(yang) 基中。