
小鼠雜交瘤細胞 AE-1,又稱 AE1,是一種懸浮生長的腫瘤細胞,來源於(yu) B 淋巴細胞,其特征為(wei) 淋巴瘤。 AE1細胞是通過融合脾細胞與(yu) SP2/O-Agl4骨髓瘤細胞而形成,培養(yang) 過程中利用純化的人紅細胞乙酰膽堿脂酶免疫小鼠。
AE-1 細胞表達抗人乙酰膽堿脂酶單克隆抗體(ti) 免疫球蛋白。這些抗體(ti) 能夠結合人和猴的乙酰膽堿脂酶,與(yu) AE-2 細胞的反應位點不同。AE-1細胞表現出對人乙酰膽堿酯酶的抗原決(jue) 定簇反應。AE-1 細胞被確認為(wei) 短肢畸形(鼠痘)病毒陰性。
細胞特性與(yu) 形態:AE-1 細胞具有懸浮生長特性,屬於(yu) 淋巴母細胞樣的細胞。其生長特點為(wei) 懸浮生長。
AE-1小鼠雜交瘤細胞參數表
名稱 | 小鼠雜交瘤細胞 AE-1(抗AChE) |
別稱 | AE1 |
種屬 | 小鼠 |
組織來源 | B 淋巴細胞 |
細胞類型 | 腫瘤細胞 |
腫瘤類型 | 雜交瘤細胞 |
生長特性 | 懸浮生長 |
細胞形態 | 淋巴母細胞樣 |
抗原決定簇 | 人乙酰膽堿酯酶 |
基因表達 | 抗人乙酰膽堿酯酶單克隆抗體免疫球蛋白 |
抗體結合 | 與人和猴乙酰膽堿酯酶結合,與AE-2不同的表位反應 |
特殊檢測結果 | 對牛痘病毒為陰性 |
生物安全等級 | BSL-1 |
保藏機構 | ATCC; HB-72 |
凍存條件 | 凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO,液氮儲存 |
生長培養基 | DMEM + 10% FBS + 1% P/S |
培養條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5%;溫度:37℃ |
推薦換液頻率 | 2-3次/周 |
注意事項 | 該細胞為懸浮細胞,請注意離心收集細胞懸液;請勿直接倒掉細胞培養液。 |
參考資料(來源文獻) | 用純化的人紅細胞乙酰膽堿脂酶免疫實驗動物,並將脾細胞與SP2/O-Agl4骨髓瘤細胞融合。 |
檢測發現AE-1細胞短肢畸形(鼠痘)病毒陰性。 |
培養教程
1. 培養(yang) 基準備:
準備 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium)培養(yang) 基。
向培養(yang) 基中添加 10% FBS(胎牛血清)和 1% P/S(青黴素/鏈黴素)。
混勻培養(yang) 基,並在 37°C 的培養(yang) 箱中預暖。
2. 細胞解凍:
從(cong) 液氮罐中取出凍存的 AE-1 細胞,並立即放入 37°C 的水浴中迅速解凍。
解凍後,將細胞轉移到預暖的培養(yang) 基中,並輕輕振蕩混勻。
3. 細胞傳(chuan) 代:
當細胞密度達到80-90% 的密度時,進行傳(chuan) 代。傳(chuan) 代的頻率通常為(wei) 每 2-3 天一次。
使用含有 0.25% 胰酶和 0.02% EDTA 的 PBS 緩衝(chong) 液將細胞從(cong) 培養(yang) 瓶中收集。
4. 收集懸液:
收集培養(yang) 瓶中的細胞懸液,避免直接倒掉細胞培養(yang) 液。
使用離心機將細胞懸液離心,以沉澱細胞。離心條件通常為(wei) 1200 rpm(250g左右),離心時間為(wei) 3 分鍾。
5. 細胞接種:
棄掉上清液,將細胞沉澱重新懸浮在新的預暖培養(yang) 基中。
根據需要,調整細胞密度,並將細胞重新接種到新的培養(yang) 瓶中。
6. 細胞培養(yang) 條件:
將細胞培養(yang) 在 37°C、95% 空氣和 5% CO2 的培養(yang) 箱中。
每隔 2-3 天檢查細胞密度,並根據需要進行細胞傳(chuan) 代或換液。
7. 凍存和存儲(chu) :
對於(yu) 凍存,使用含有 55% 基礎培養(yang) 基、40% FBS 和 5% DMSO 的凍存液,迅速冷凍保存在液氮罐中。
經常檢查細胞凍存狀態,確保細胞冷凍保存的穩定性和健康狀態。
8. 實驗操作:
根據實驗需要,定期從(cong) 凍存狀態中恢複細胞,並進行相關(guan) 實驗操作。
STR鑒定及相關
STR點位信息
18-3 | 17,18,19,21 |
6-7 | 12 |
5-5 | 13,14,15 |
X-1 | 25 |
1-2 | 17,18 |
7-1 | 24.2,28,29 |
8-1 | 13 |
1-1 | 16,17,18 |
19-2 | 12,13 |
15-3 | 21.3,22.3,23.3 |
12-1 | 16,17 |
6-4 | 18,19,20 |
4-2 | 21.3,23.3 |
3-2 | 13,14 |
2-1 | 16,17 |
13-1 | 15.2,16.2,17.2 |
11-2 | 15,16,17,18 |
17-2 | 15,16,17 |
參考文獻
上一篇:沒有了