
35.1細胞(雜交瘤細胞抗CD2)
- 來源:雜交瘤細胞;B淋巴細胞
- 細胞特征:懸浮細胞, 淋巴母細胞樣
- 培養(yang) 基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:表達並分泌抗CD2單克隆抗體(ti) ; 產(chan) 生的抗體(ti) 能夠與(yu) 人T細胞表麵蛋白Tp50(CD2)特異性結合
35.1雜交瘤細胞抗CD2是將經過佛波醇肉豆蔻酸(PMA)激活的人T淋巴細胞免疫獲得的小鼠脾細胞與(yu) NSI/1骨髓瘤細胞融合而建立。35.1雜交瘤細胞能夠持續產(chan) 生特異性為(wei) IgG2a亞(ya) 型的單克隆抗體(ti) ,該抗體(ti) 能夠識別並結合人T細胞表麵標誌蛋白Tp50(CD2)。這些抗體(ti) 在抑製T細胞增殖反應和細胞毒性方麵有顯著效果,但對抗體(ti) 介導的細胞毒性反應沒有抑製作用。
盡管35.1細胞來源於(yu) 小鼠,但生成過程涉及人類免疫係統的細胞。具體(ti) 步驟包括:使用PMA激活的人T淋巴細胞對小鼠進行免疫處理;從(cong) 這些小鼠體(ti) 內(nei) 提取脾細胞;將這些脾細胞與(yu) gp2/O-Agl4骨髓瘤細胞融合,形成能夠長時間生產(chan) 目標抗體(ti) 的雜交瘤細胞係。
35.1細胞特性特征
35.1細胞產(chan) 生針對人T細胞表麵蛋白Tp50(CD2)的單克隆抗體(ti) 、產(chan) 生的抗體(ti) 屬於(yu) IgG2a亞(ya) 型。
35.1細胞表達並分泌抗CD2單克隆抗體(ti) 、產(chan) 生的抗體(ti) 能夠與(yu) 人T細胞表麵蛋白Tp50(CD2)特異性結合。
產(chan) 生的抗體(ti) 可以抑製T細胞增殖、細胞毒性反應。
產(chan) 生的抗體(ti) 不抑製抗體(ti) 倡導的細胞毒反應。
35.1細胞含有產(chan) 生抗CD2抗體(ti) 的基因序列。
35.1雜交瘤細胞產(chan) 生的抗體(ti) 具有針對人CD2分子的高度特異性
35.1細胞(雜交瘤細胞抗CD2)參數表
細胞名稱 | 35.1細胞(雜交瘤細胞抗CD2) |
細胞別稱 | 351細胞;35.1CD2; |
來源 | 佛波醇肉豆寇酸(PMA)激活的人T淋巴細胞免疫獲得的脾細胞與NSI/1骨髓瘤細胞融合 |
特征 | 淋巴瘤,淋巴母細胞樣,懸浮生長 |
培養基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S |
培養條件 | 37℃, 95%空氣 + 5% CO2 |
傳代信息 | 比例1:2-1:4,每2-3天換液,周期24-48小時 |
細胞密度 | 3×10^5 - 5×10^5 cells/ml |
凍存條件 | 60%基礎培養基 + 30%FBS + 10%DMSO |
保存方式 | 液氮儲存 |
抗體類型 | IgG2a亞型 |
抗體反應 | 與人T細胞表麵蛋白Tp50(CD2)反應 |
抗體功能 | 抑製T細胞增殖反應和細胞毒反應,不抑製抗體倡導的細胞毒反應 |
質量檢測 | 細菌、真菌、支原體檢測均為陰性 |
免疫原 | 佛波醇肉豆寇酸(PMA)活化的人T淋巴細胞 |
融合細胞 | 小鼠脾細胞與gp2/O-Agl4骨髓瘤細胞 |
文獻信息 | Martin PJ, et al. J. Immunol. 131: 180-185, 1983. PubMed: 6190907 |
培養教程
35.1細胞(雜交瘤細胞抗CD2)培養教程
35.1細胞複蘇
解凍:將凍存的35.1細胞管在37℃水浴中快速解凍,時間為(wei) 1-2分鍾。
轉移和離心:將解凍的35.1細胞懸液轉移到含5mL完全培養(yang) 基的離心管中,以1000RPM離心5分鍾,棄去上清。
重懸:用4-6mL完全培養(yang) 基重懸35.1細胞。
培養(yang) :將35.1細胞懸液轉移到培養(yang) 瓶或6cm培養(yang) 皿中,置於(yu) 37℃、5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) 過夜。
次日處理:次日更換培養(yang) 基,並檢查35.1細胞密度和狀態。
35.1細胞培養
培養(yang) 基配方:完全培養(yang) 基由90% RPMI-1640、10% FBS及1% P/S(青黴素/鏈黴素)組成。
培養(yang) 條件:35.1細胞在37℃、95%空氣+5% CO2的環境中培養(yang) 。
細胞密度維持:保持35.1細胞密度在3×10^5 - 5×10^5 cells/ml之間。
35.1細胞換液
換液頻率:每周進行2-3次換液。
直接補充:直接向培養(yang) 瓶中加入新鮮的完全培養(yang) 基。
離心換液:收集培養(yang) 液,1000RPM離心5分鍾,棄去上清後重懸35.1細胞於(yu) 新鮮完全培養(yang) 基中。
35.1細胞傳代
傳(chuan) 代時機:當35.1細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代。
傳(chuan) 代比例:傳(chuan) 代比例為(wei) 1:2到1:5。
收集35.1細胞懸液,1000RPM離心8-10分鍾。
棄去上清,用1-2mL新鮮完全培養(yang) 基重懸35.1細胞。
按照傳(chuan) 代比例將35.1細胞分配到新的培養(yang) 瓶中,每瓶添加5-6mL完全培養(yang) 基。
35.1細胞凍存
凍存液配方:55%基礎培養(yang) 基、40% FBS和5% DMSO。
細胞懸浮:將35.1細胞懸浮在凍存液中,每管約1×10^6細胞。
緩慢降溫:使用程序降溫盒或細胞凍存盒進行緩慢降溫,最終將35.1細胞轉移到液氮中長期保存。
STR鑒定及相關
參考文獻
上一篇:SP20細胞(小鼠骨髓瘤細胞)